背景与目的 放疗是肺癌最常见的治疗方法之一，40%-50%的患者在放疗后会出现局部肿瘤未控或复发，放射抵抗是导致肺癌局部控制失败的重要原因。然而，体外放疗抵抗模型的缺乏是阻碍其机制研究的主要因素。因此，本研究旨在通过建立人肺腺癌H1975和H1299辐射耐受细胞株，为未来开展肺癌放射抵抗相关性研究创建体外模型，并更多初步探索其放射抵抗机制。方法 对H1975和H1299细胞进行等剂量的X射线分次照射，构建辐射耐受细胞株H1975DR和H1299DR；采用克隆形成实验比较H1975和H1975DR细胞、H1299和H1299DR细胞的克隆形成能力，线性二次模型拟合细胞存活分数曲线；DNA损伤修复能力的检测采用彗星实验，并计算DNA尾部百分比（Tail DNA%）；利用光学显微镜、CCK-8、FACS、细胞划痕和侵袭等方法比较细胞形态、细胞增殖能力、细胞凋亡水平和周期分布、细胞迁移和侵袭能力等生物学特性；通过Western blot免疫印迹分析DNA-PKcs、53age of infectionBP1、RAD51、p-ATM等DNA损伤修复因子的表达。结果 历经5个月的照射及持续培养获得稳定的辐射耐受细胞株H1975DR和H1299DR。X射线照射下，两株辐射耐受株的细胞增殖活性、克隆形成能力、DNA损伤修复能力均显著提高；细胞周期G2期/M期比例均显著下调，G0期/G1期比例上调；细胞迁移及侵袭能力显著增强。非同源末端连接（nonhomologous end-joining, NHEJ）修复通路的p-DNA-PKcs(Ser2056)、53BP1及同源重组（homologous rBI 10773浓度ecombination, HR）修复通路的p-ATM(Ser1981)、D51相对蛋白表达量较H1975及H1299均有不同程度的增高。结论 通过等剂量分次照射可诱导H1975和H1299细胞株分化为肺腺癌辐射耐受细胞株H1975DR和H1299DR，为肺癌患者放疗抵抗的机制研究提供了体外细胞学模型。