研究背景和目的神经营养酪氨酸受体激酶(neurotrophic tyrosine receptor kinase,NTRK)基因编码原肌球蛋白受体激酶,该家族基因与不同的伴侣基因重排后翻译的新融合蛋白可持续激活下游通路,已被证实是多种人类癌症的驱动因素。实体瘤中NTRK融合频次约为0.3%左右,且融合伴侣基因较多。检测NTRK融合的方法有免疫组化(immunohistochemistry,IHC)、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptase PCR,RT-PCR)、下一代测序(nextbiocomposite ink generation sequencing,NGS)和 nCounter 系统(NanoString Technologies)等,针对IHC是否是一种可靠的NTRK融合检测方法,IHC 阳性判读标准等问题,研究结论并不一致。甲状腺乳头状癌(papillarythyroidcarcinoma,PTC)是甲状腺癌中最常见的类型,已知PTC中NTRK融合频次为1%～25%,融合比例高于其他常见肿瘤。本研究旨在运用IHC和NGS方法检测PTC中NTRK融合,探讨IHC能否预测NTRK融合情况,并分析NTRK融合PTC临床病理特征和分子病理学特点。研究方法收集2017年6月至2020年6月深圳市人民医院病理科存档的848例PTC样本,均经过病理确诊。利用pan-TRK(EPR17341,Ventana)IHC检测PTC组织中TRK蛋白过表达水平,用NGS检测IHC 阳性样本中NTRK融合,进一步用IHC和PCR检测NTRK融合PTC的免疫表型和BRAF V600E突变。收集所有患者的临床病理特征,并总结NTRK融合与临床病理特征之间的关系。分析检验认为P<0.05有统计学差异。研究结果1.在848例PTC样本中,IHC发现120例(14.15%)pan-TRK阳性样本,81.7%(98/120)显示弱阳性。2.IHC 阳性样本均显示≥10%的肿瘤细胞着色,阳性定位在细胞质、核和膜,细胞质染色最常见(111/120,92.5%)。pan-TRK IHC着色亚细胞定位与NTRK融合相关(P=0.028)。3.NGS 显示 13 例 NTRK 融合,均表达 pan-TRK、TTF1、TG 和 PAX8,不表达 s100、Mammaglobin 和 GATA-3,均为 BRAFV600E 野生型。NTRK 融合频次为1.53%。4.共发现7种伴侣基因,分别是:ETV6、SQSTM1、TPR、EML4、CDH1、GJD2 和 TFG。5.IHC染色强度与NTRK融合相关(P<0.001),pan-TRK IHC预测NTRK融合的敏感度和阴性预测值均为100%,特异度为21.9%,阳性预测值为10.83%。6.NTRK融合与肿瘤变异类型(P<0.001)、慢性淋巴细胞性甲状腺炎(P=0.015)、瘤体多灶性生长(P<0.001)和砂粒体(或钙化)(P<0.001)有点击此处统计学相关性,与性别、年龄、肿瘤大小和淋巴结转移均无统Belumosudil临床试验计学意义。研究结论1.NTRK融合在PTC中低频变异,包含多个融合伴侣。2.pan-TRK IHC可作为NTRK融合检测的高效筛查手段,但特异度不足,pan-TRK IHC 阳性病例需用NGS或FISH证实。3.NTRK融合PTC多数组织学表现为滤泡变异或滤泡和乳头混合变异模式,常见慢性淋巴细胞性甲状腺炎、多灶性生长和钙化。