基于网络药理学方法探究过氧麦角甾醇（EP）抗乳腺癌的靶点及作用机制，并通过体外实验验证。采用网络药理学对EP作用靶点进行筛选，构建靶点网络及蛋白-蛋白互作（PPI）网络，对EP抗乳腺癌潜在的作用靶点及相关通路进行预测。采用MTT法检测EP对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制活性，克隆形成实验检测EP对MCF-7细胞增殖影响；采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测细胞的凋亡情况、线粒体膜电位及活性氧水平的变化情况；通过Western blot法检测EP对B细胞淋巴瘤（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、细胞色素C（Cyt C）、半胱氨酸蛋白酶蛋白（caspase）-7、活化的caspase-7（cleaved caspase-7）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、丝氨酸-苏氨酸激酶B(AKT)蛋白表达水平的影响情况。结果显示，经网络药理学预测，得出EP与乳腺癌有173个共同靶点；KEGG富集分析结果显示EP治疗乳腺癌结果主要在癌症通路、PI3K-AKT信号通路、细胞衰老信号通路、病毒致癌作用等信号通路；MTT结果显示，与对照组相比，EP组MCF-7细胞的活性明显降低，呈时间-浓度依赖趋势；EP能够抑制乳腺癌细胞MCF-7集落形成；采用10、20、40 μmol·L~(-1)的EP作用MCF-7细胞24 h后，点击此处MCF-7细胞总凋亡率均selleck NN2211显著升高，线粒体膜电位均显著降低，活性氧水平均显著升高；此外，transboundary infectious diseasesMCF-7细胞经过EP处理后，细胞内Cyt C、Bax、cleaved caspase-7蛋白的表达水平上升，p-PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白的表达水平下降。研究表明，EP可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖，减少集落形成，其机制可能与PI3K-AKT通路介导线粒体凋亡途径有关。