向海雁鹅为向海鸿雁(Anser cygnoides)与籽鹅(Semen anserinum)杂交的物种。本文以向海雁鹅血为原料,对其多肽进行提取、分离、纯化并分析其成分;基于网络药理学及分子对接技术对其抗肺癌作用机制进行分析;并考察其抑制肺癌细胞的活性。研究内容如下:以新鲜向海雁鹅血为原料,水解度为指标,筛选工具酶;采用单因素实验,确定向海雁鹅血多肽的酶解工艺;通过响应面法优化向海雁鹅血多肽的最佳提取工艺;通过氨基酸分析仪对其氨基酸组成进行分析;采用Sephadex G-25凝胶层析纯化分离向海雁鹅多更多肽。结果表明:优选出复合蛋白酶作为工具酶;最佳酶解工艺为超声功率540 W,超声波频率20 KHz,加酶量4000 U/g,超声时间4.5 h,此时水解度为28.77%;并测得其中含有17种氨基酸,其中8种为人体必需氨基酸;经Sephadex G-25凝胶层析纯化得到向海雁鹅血多肽(XGP)。通过UPLC-Q-TOF-MS/MS对XGP成分组成进行分hepatitis C virus infection析;采用网络药理学方法对向海雁鹅血多肽的活性成分、潜在靶点和分子机制进行预测;包括药物相似性评估、口服生物利用度预测、蛋白互作(PPI)网络构建和分析、基因本体论(GO)术语和通路注释;selleck激酶抑制剂基于网络药理学,构建“成分-靶点-通路”的互作网络;利用分子对接模拟方法进一步说明了配体的活性位点和结合程度,解释了其可能的作用机制。结果表明:分析其成分为H-Asn-Asp-Asp-Met-OH、Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr-Asp、Ala-Trp-Met-Asp-Phe-Val;网络药理筛选出相关靶点258个,通过PPI筛选得到46个核心靶点,如AKT1、IL1B、SRC、STAT3、MMP9和CCND1等;GO功能富集分析64个条目,主要调控肺癌反应、蛋白质磷酸化、氧化还原过程等生物功能,影响着细胞增殖、凋亡、氧化还原等;KEGG分析富集到56个信号通路,主要包括PI3K-ATK、RAS、Hepatitis B等信号通路;XGP通过多成分、多靶点和多通路协同作用于肺癌的网络;向海雁鹅血多肽P1、P2、P3与核心靶点AKT1、SRC、MMP9具有良好的结合能力,证明向海雁鹅血多肽对肺癌具有潜在的抑制作用。采用CCK-8法考察不同浓度的XGP抑制人肺癌A549细胞的增殖作用,考察不同浓度XGP对细胞内Ca~(2+)释放、细胞氧化损伤和ATP的含量,使用XGP诱导人肺癌A549细胞,采用q PCR和Western blot检测细胞关键通路靶蛋白的表达水平。结果表明:XGP呈浓度和时间依赖性地抑制人肺癌A549细胞的增殖;XGP可能通过人肺癌A549细胞发生Ca~(2+)超载,氧化损伤,抑制ATP的合成和干扰能量代谢使细胞凋亡;q PCR结果显示XGP可抑制核心靶点AKT1的表达水平;Western blot结果显示XGP通过降低AKT1的m RNA表达水平,从而起到抑制人肺癌细胞A549的作用,进一步验证向海雁鹅血多肽对肺癌的抑制作用。向海雁鹅血多肽在抗肺癌方面具有广阔的应用前景,为未来向海雁鹅血的开发应用提供了理论基础和参考依据。