基于PTEN/PI3K/Akt通路探讨归芍运脾汤对肝郁脾虚型乳腺增生大鼠的干预机制

目的:基于磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/苏氨酸蛋白激酶(Akt)通路探讨归芍运脾汤对肝郁脾虚型乳腺增生大的鼠干预机制。方法:PCI-32765分子量将70只SPF级SD大鼠随机分为正常组(n=15)和造模组(n=55),造模组大鼠采用综合造模法(饥饱失常法+夹尾刺激法+苯甲酸雌二醇+黄体酮)复制肝郁脾虚型乳腺增生模型,随后各取5只进行模型验证。模型复制成功后将造模组大鼠随机分为模型组、阳性对照组和归芍运脾汤高、中、低剂量组,共5组,每组10只。正常组和模型组大鼠给予10 mL·kg~(-1)·d~(-1)蒸馏水灌胃,归芍运脾汤高、中、低剂量组分别给予17.2、8.6、4.3 g·kg~(-1)·d~(-1)归芍运脾汤汤剂灌胃,阳性对照组给予4m g·kg~(-1)·d~(-1)他莫昔芬药剂灌胃,治疗30 d后观察大鼠一般生存状况,采用超声诊断仪测定乳腺组织厚度,采用旷场实验阳性反应进行行为学评价,采用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)测定乳腺组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、BCL2-Associated X(Bax)的含量,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测乳腺组织中PTEN、PI3K、Akt基因表达水平,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PTEN、PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠暴躁易激惹,扎堆蜷卧,旷场实验反应阳性,乳头肿胀明显,乳腺厚度显著增加(P<0.05);乳腺组织中Bcl-2含量明显升高、Bax含量明显降低(P<0.05),乳腺组织AZD9291采购中PTEN基因表达水平显著降低、PI3K、Akt基因表达水平显著升高(P<0.05),PTEN、PI3K、Akt蛋白表达水平与基因基本一致;与模型组比较,各给药组大鼠一般生存theranostic nanomedicines状态、乳头肿胀程度不同程度缓解,旷场实验反应阳性不同程度改善,乳腺厚度变薄(P<0.05),乳腺组织中Bcl-2含量明显降低、Bax含量明显升高(P<0.05),乳腺组织中PTEN基因表达水平显著升高、PI3K、Akt基因表达水平显著降低(P<0.05),PTEN、PI3K和Akt蛋白表达水平与基因基本一致。结论:归芍运脾汤能够有效改善肝郁脾虚型乳腺增生大鼠一般生存状况及乳腺增生程度,其具体机制可能与归芍运脾汤有效调控PTEN/PI3K/Akt通路而实现。