目的:探讨Nur77调控NETosis在脂多糖(LPS)所致急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠肺损伤中的作用。方法:(1)将16只野生型(Wild Type,WT)C57BL/6J小鼠以及16只Nur77基因敲除(Nur77-/-)小鼠按随机区组设计的原则分配至4组,分别为WT+NS组、WT+LPS组、Nur77-/-+NS组、Nur77-/-+LPS组,每组8只,通过气道内滴注LPS(20mg/kg)构建重型ARDS小鼠模型,共观察72小时,记录小鼠存活时间,绘制生存曲线图。(2)将36只野生型(WT)C57BL/6J小鼠以及36只Nur77-/-小鼠按随机区组设计的原则分配到4组内,分别为WT+NS组、WT+LPS组、Nur77-/-+NS组、Nur77-/-+LPS组,设计4 h、12 h、24 h,共3个时间点,每组每个时间点6只。通过气管插管气道内滴注LPS(5mg/kg)建立ARDS小鼠模型以及气道内滴注生理盐水(NS)建立对照组。分别在造模后4 h、12 h、24 h眼眶放血处死小鼠,收集肺组织、支气管肺泡Carotene biosynthesis灌洗液(BALF)用于后续实验。(3)通过肺组织切片苏木精-伊红(HE)染色观察野生型与Nur77敲除小VE-822使用方法鼠肺损伤病理形态,湿干比重(W/D)评估肺水肿,使用ELISA检测小鼠肺组织中促炎细胞因子TNF-ɑ、IL-1β的表达,使用Western blot、免疫组化检测肺组织中PAD4、MPO的表达,Western blot检测肺组织Nur77、MPO、PAD4、Cit-H3表达,免疫荧光染色检测肺组织中Cit-H3、MPO的共表达。结果:(1)监测72小时小鼠存活时间发现,LY294002细胞培养Nur77敲除小鼠在气道内滴注20mg/Kg LPS后首次出现死亡时间在8 h,24h死亡率达50%,72 h死亡率为100%;野生型小鼠气道内滴注LPS后首次出现死亡时间为12 h,较Nur77敲除小鼠死亡时间延迟,8h、24 h、72 h死亡率分别为0%、37.5%、75%,死亡率较Nur77敲除小鼠低。(2)观察ARDS小鼠肺组织病理形态及病理评分发现,Nur77-/-+NS组及WT+NS组,肺组织结构完整,均未见病理损伤(P>0.05)。Nur77-/-+LPS组及WT+LPS组4 h、12 h、24h 3个时间点肺组织均见病理性损伤,Nur77敲除小鼠病理损伤较野生小鼠重,病理评分亦更高,差异具有统计学意义(P<0.05)。Nur77-/-+NS组及WT+NS组肺泡灌洗液总蛋白、W/D、促炎因子水平组间、组内比较未见明显差异(P>0.05)。经LPS处理后,Nur77敲除小鼠与野生型小鼠肺泡灌洗液总蛋白、W/D、促炎因子水平从4 h到24 h均呈明显上升的趋势,且Nur77敲除小鼠升高更加显著(P<0.05)。(3)使用免疫组化、免疫荧光以及Western blot检测ARDS小鼠肺组织中NETosis表达,Nur77-/-+NS组及WT+NS组各个时间点几乎未见NETosis表达。Nur77-/-+LPS组及WT+LPS组4 h检测NETosis表达基本相似(P>0.05)。气道内滴注LPS后Nur77基因敲除小鼠12 h、24 h NETosis表达均较野生型小鼠高(P<0.05)。Western blot结果显示野生型小鼠在气道内滴注LPS后4h、12h及24h NETosis表达均较Nur77-/-小鼠相同时间点低(P<0.05),Nur77基因敲除ARDS小鼠较野生型ARDS小鼠NETosis表达高,肺损伤更重(P<0.05)。结论:Nur77可延缓重型ARDS小鼠起病时间并降低其死亡率;Nur77或可通过下调NETosis净生成发挥抗炎作用从而减轻ARDS小鼠肺组织损伤。