【目的】研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)钙结合蛋白S100A16的结构adhesion biomechanics特征、系统进化关系及组织表达分布情况等，进一步分析S100A16在抗菌免疫中的AZD1152-HQPA生产商作用，为深入研究S100A16基因功能特征奠定基础。【方法】根据S100A16基因序列设计特异性引物克隆尼罗罗非鱼S100A16基因，构建原核表达载体并采用SMART 4.0、DNAMAN 9.0及MEGA 6.0等软件对尼罗罗非鱼S100A16(On-S100A16)氨基酸序列进行生物信息学分析。通过实时荧光定量PCR检测On-S100A16在尼罗罗非鱼中的组织分布情况及无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)感染后在尼罗罗非鱼各组织中的表达变化，并制备重组蛋白用于孵育尼罗罗非鱼头肾淋巴细胞后检测炎症相关因子的表达情况。【结果】克隆获得的On-S100A16蛋白编码区长度为276 bp，可编码91个氨基酸的多VX-445抑制剂肽链，含有S100保守结构域，与其他鱼类的On-S100A16氨基酸序列具有较高的相似度。进化分析显示，尼罗罗非鱼On-S100A16与斑马拟丽鱼On-S100A16的亲缘关系最近。组织分布分析结果表明，On-S100A16在尼罗罗非鱼的各组织中广泛表达，在肝脏和肠道组织中的相对表达量最高。经无乳链球菌感染后，On-S100A16在罗非鱼中脑、肠道、脾脏组织中的表达量显著上调，且均在感染24 h后达峰值。成功制备重组蛋白rOn-S100A16后用于孵育头肾淋巴细胞。荧光定量PCR结果表明，rOn-S100A16孵育头肾淋巴细胞后抗炎因子的表达量显著上调，促炎因子的表达量则显著下调。【结论】On-S100A16的氨基酸序列含有S100蛋白家族典型的S100结构域，其可能具有与其他S100蛋白相似的生物学功能。重组蛋白rOn-S100A16可促进IL-4与TLR1表达，抑制IL-6与TNF-α表达，故推测On-S100A16通过调控淋巴细胞活性来参与鱼体抗菌免疫反应。