目的：研究松杉灵芝多糖的结构和单糖组成及对小鼠运动性疲劳的缓解作用。方法：采用沸水煎煮、热水浸提和乙醇醇沉提取松杉灵芝多糖，进一步分离纯化得到多糖纯品，采用电镜、傅里叶红外光谱仪和HPLC对多糖的结构S63845小鼠和单糖组成进行分析；通过小鼠爬杆试验和负重游泳试验，分别测定爬杆时间和负重游泳时间，同时测定血清中肝糖原（HG）、肌糖原（MG）、血乳酸（BLA）、血尿素氮（BUN）、丙二醛（MDA）的含量和乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性。结果：灵芝多糖表面凹凸不平呈瘤状物形态，其异头碳为β构象，进一步分析发现灵芝多糖是由甘露糖、木糖、葡萄糖、半乳糖组成的杂多糖，其中葡萄糖占比最大达到了55.01%。与正常喂养组（CK）相比，灵芝多糖低、中、高剂量组均显著延长了小鼠的爬杆时间和负重游泳时间（P <0.05），同时还显著增加了小鼠体内HG和MG的含量（P <0.05），并减少了Bbrain pathologiesLA、BUN、MDA的含量，此外，还显著增加了LDH和抗氧化酶（SOD、GSH-Px、CAT）的活性（P <0.05）。结论：灵芝多糖能够Taurine增加小鼠体内HG和MG的储备，降低机体内BLA和BUN水平，同时还可提高小鼠清除自由基和活性氧的能力，提高抗氧化酶活性进而降低了细胞的脂质过氧化，具有较好的抗疲劳能力，从而缓解运动性疲劳对机体造成损伤。