背景:乳腺癌目前已成为全世界女性发病率最高的恶性肿瘤。根据雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER2)和增殖标记蛋白Ki-67的表达情况划分,乳腺癌有luminal A型、luminal B型、HER2阳性和三阴性乳腺癌(TNBC)四种类型。其中,HER2阳性乳腺癌恶性程度较高,侵袭性较强,早期容易转移。尽管,靶向药物的出现极大地改善了HER2阳性乳腺癌患者的生存现状和预后,但是治疗后耐药性的出现使得乳腺癌复发及转移机率仍然很高,严重影响治疗效果。因此,探索新的靶点和治疗策略依然非常重要。MYCN是一种与乳腺癌细胞干性、EMT、存活和休眠表型增加相关的转录因子,MYCN的异常表达与乳腺癌不良预后和较差的临床结果有关。已有研究报道,乳腺癌患者血液中的循环乳腺肿瘤细胞簇中存在MYCN转录本,并与肿瘤起始转移细胞的干细胞程序相关。在相当一部分原发性和复发性TNBC中,MYCN异质性表达,并且在新辅助化疗后更高比例的TNBC中没有表现出病理完全应答。然而,这些研究大都集中在TNBC中,在HER2阳性乳腺癌中,关于的MYCN研究甚少。槐耳是中国的传统中草药,已有上千年的历史,其具有重要的药用价值,对消CCRG 81045使用方法化、呼吸、血液等系统的多种肿瘤具有良好的治疗作用,被广泛应用于乳腺癌、肝癌、肺癌、胃癌等多种恶性肿瘤的辅助治疗。但是,槐耳对HER2阳性乳腺癌的治疗作用以及其具体的作用机制尚不明确。因此,我们欲探究槐耳清膏对MYCN异常表达的HER2阳性乳腺癌中的治疗作用及机制,以期为HER2阳性乳腺癌提供新的治疗方向。目的:明确槐耳清膏对不同的MYCN表达水平的HER2阳性乳腺癌细胞的治疗作用并探讨其作用机制。研究方法:1、Western Blot检测MYCN蛋白在HER2阳性乳腺癌病人组织标本和乳腺癌细胞系selleck、构建的MYCN过表达乳腺癌细胞系中的表达情况;检测浓度槐耳清膏浓度梯度下,凋亡相关蛋白的表达情况。2、RT-PCR检测MYCN在HER2阳性乳腺癌病人组织标本和构建的MYCN过表达乳腺癌细胞系中的m RNA表达情况。3、合成MYCN基因表达载体并通过慢病毒转染法构建MYCN过表达的HER2阳性乳腺癌细胞系。4、生物学功能试验:通过细胞计数法检测MYCN对HER2阳性乳腺癌细胞增殖能力的影响;通过克隆形成实验检测MYCN对HER2阳性乳腺癌细胞克隆形成能力的影响;通过划痕实验检测MYCN对HER2阳性乳腺癌细胞迁移转移能力的影响。5、CCK8细胞活性试验:检测不同浓度槐耳清膏对不同MYCN表达水平的HER2阳性乳腺癌细胞的抑制作用,并验证这种抑制作用是否依赖于铁死亡通路。研究结果:1、HER2阳性乳腺癌患者中,MYCN差异性表达,有一部分患者表达水平高。2、MYCN高表达的SKBR3细胞增殖和克隆形成能力更强。3、槐耳清膏抑制SKBR3细胞的增殖能力,MYCN高表达的SKBR3细胞对槐耳清膏更敏感。4、槐耳清膏可以诱导SKBR3细胞发生凋亡,且MYCN高表达的细胞的凋亡程度更高。5、槐耳清膏可以诱导SKBR3细胞发生铁死亡,且MYCNmedical overuse高表达的细胞,铁死亡依赖性更强。研究结论:槐耳清膏对MYCN高表达SKBR3细胞增殖抑制作用更敏感,更容易诱导其发生凋亡和铁死亡。