目的 利用原核表达系统，经优化诱导条件及变、复性将包涵体形式肠道病毒71型结构蛋白VP1进行纯化。方法 通过RT-PCR扩增VP1基因，并应用基因克隆技术将VP1基因与pBIBW2992 IC50ET-28a原核表达载体连medical chemical defense接，之后将重组载体转化至大肠埃希菌Rosseta(DE3)感受态细胞，经IPTG诱导后对包涵体进行变、复性，采用His镍柱亲和层析对VP1蛋白进行纯化，利用SDRepSox体外S-PAGE和Western blot对VP1蛋白进行分析鉴定。结果 PCR扩增出891 bp的EV71-VP1基因，双酶切鉴定原核重组质粒pET-28a-EV71-VP1构建正确。重组载体转化DE3后经IPTG诱导表达VP1蛋白，且以包涵体形式存在。将包涵体变、复性，经SDS-PAGE分离后进行镍柱纯化，得到较纯的目的蛋白，Western blot分析该蛋白能被相应抗体识别。结论 构建的原核重组质粒pET-28a-EV71-VP1转化DE3后经IPTG诱导表达以包涵体形式存在的VP1蛋白，复性后纯化的VP1蛋白具有免疫原性，为EV71 VP1蛋白的研究与开发奠定了基础。