高表达分泌颗粒蛋白Ⅱ增加结直肠癌细胞对奥沙利铂的耐药性

目的 探究分泌颗粒蛋白Ⅱ(SCG2)在结直肠癌(CRC)组织中的表达特点,并分析其对奥沙利铂化疗敏感性的影响。方法 通过对组织芯片(包括96个癌组织和84个癌旁组织)进行免疫组化染色检测CRC患者癌组织及配对癌旁组织中SCG2的表达量并分析SCG2表达量与结直肠癌患者临床特征的关系。进一步采用蛋白免疫印迹Western blot和实时荧光定量PCR(qPCR)等方法检测化疗药物奥沙利铂(Oxa)处理结直肠癌细胞系后的SCG2的表达水平。利用CRISPR/Cas9技术建立SCG2敲除(SCG2-KO)的DLD1细胞株,采用CCK-8实验检测SCG2对药物敏感性的影响,采用Western blot和qPCR实验检测凋亡相关蛋白的表达水平。最后,用高浓度奥沙利铂持续处理DLD1细胞构建了对奥沙利铂耐药的DLD1细胞株,采用Western blot实验检测耐药株的SCG2的表达水平。结果 相较于癌旁组织,癌组织中SCG2表达量更高(P<0.0001),且更高的肿瘤N分期和临床分期患者结直肠癌组织SCG2阳性表达率更高。奥沙利铂处理结直肠癌细胞系oncology staff可以显著增加其SCG2的表达LXH254量(P<0.05)。反过来,敲除SCG2降低了DLD1细胞对于奥沙利铂的药物敏感性(P<0.05)。机制研究发现SCG2敲除后凋亡相关分子表达量上调。并且,相较于亲本细胞株,SCG2在奥沙利铂耐药的DLD1细胞株(DLD1-OXAR)中显著高表达(P<0.05)。结论 SCG2是一个结直肠癌的危险性基因,且能够降低结直肠癌患者对奥沙利铂化疗药物的敏感selleck性。