目的:构CHIR-99021细胞培养建靶向Pexidartinib供应商坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,将其克隆至PLKO.1载体,构建CRMP1重组干扰质粒。将重组正确的shCRMP1质粒转染HEK-293T细胞进行慢病毒包装,将获得的慢病毒上清液浓缩后感染SH-SY5Y细胞,WCell Cultureestern blot检测SH-SY5Y细胞内CRMP1的干扰效果以及对NLRP3炎症小体各组分蛋白表达的影响。结果:测序结果显示,shCRMP1慢病毒干扰质粒构建成功;转染HEK-293T细胞包装慢病毒后,细胞内CRMP1蛋白表达下降;慢病毒浓缩液感染SH-SY5Y细胞经嘌呤霉素筛选,Western blot结果发现shCRMP1慢病毒能显著下调SH-SY5Y细胞中CRMP1的蛋白表达量。同时,在稳定敲减CRMP1的SH-SY5Y细胞系中发现,在MPP+诱导作用下,抑制CRMP1表达可有效抑制NLRP3炎症小体活化。结论:成功构建pLKO.1-shCRMP1慢病毒干扰质粒,且干扰CRMP1后可抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞中NLRP3炎症小体的活化,为进一步研究CRMP1在帕金森病等神经退行性疾病的发生机制奠定基础。