目的:帕金森病(Parkinson’s disease,PD)认知障碍严重影响患者生活质量,但是目前缺乏有效治疗手段。已有研究表明髓样细胞表达的触发受体-2(triggering receptor expressed on myeloid cells 2,TREM2)通过抑www.selleck.cn/products/PLX-4720制神经炎症以及淀粉样蛋白聚集在阿尔茨海默病中起保护作用。最新研究发现疾病相关小胶质细胞(Diseased associated microglia,DAM)在多种神经退行性疾病中发挥保护性作用,且由TREM2依赖性调控。基于此,本研究探讨TREM2是否调控DAM表型在PD认知障碍中起保护性作用以及其机制。方法:首先本研究通过临床病例分析脑脊液中可溶性TREM2(soluble TREM2,sTREM2)表达水平与PD病理标志物以及认知情selleck合成况的相关关系。体内研究中,采用立体定位注射技术在A53T α-Syn PD小鼠模型中注射腺病毒,沉默TREM2蛋白表达;进一步通过Morris水迷宫以及新物体识别评估小鼠的认知情况,同时通过Western blot、免疫荧光、免疫组化以及qPCR等观察α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)聚集、小胶质细胞激活以及炎症因子表达、DAM表型核心标志物表达以及MAPK和NF-κB通路蛋白表达情况;体外研究中,首先使用慢病毒沉默TREM2表达,并一步使用α-Syn原纤维(α-Syn Preformed Fibrils,α-Syn PFF)刺激BV2小胶质细胞,通过qPCR以及Western blot检测炎症因子、DAM核心标志物以及MAPK以及NF-κB通路蛋白表达情况,并进一步用培养基刺激HT22神经元细胞,Western blot检测磷酸化α-Syn表达,CCK8以及流式细胞学检测细胞活力以及细胞凋亡情况。结果:(1)在临床病例研究中发现病程不小于2年的PD患者脑脊液中sTREM2升高,并与脑脊液中α-Syn呈正相关,以及与全面认知功能(MoCA)呈反比;(2)体内研究中发现4月龄A53T α-Syn PD海马中TREM2蛋白表达较C57小鼠明显下降,小胶质细胞中离子钙结合适配器分子1(ionized calcium binding adaptor 1,Iba 1)升高;(3)沉默海马中TREM2表达后,PD小鼠中突触蛋白(PSD95)以及神经元标志物NeuN表达下降,而不改变α-SyGenetic researchn的聚集,并加重小鼠认知障碍;(4)沉默海马中TREM2表达后,PD小鼠中Iba1表达升高,炎症因子(iNOS、COX2蛋白以及TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA)表达升高;小鼠中DAM核心标志物 Itgax 蛋白以及 Itgax、APOE、Timp2、Clec7a、CD68、Lpl、Axl、Ctsl、CCL6等基因mRNA表达明显下降,MAPK通路中P-JNK和P-ERK以及NF-κB通路中P-P65蛋白表达明显升高;(5)沉默BV2小胶质细胞TREM2表达后,予PFF刺激小胶质细胞,炎症因子(iNOS、COX2蛋白以及TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA)表达升高,具有抑制炎症作用的DAM核心标志物APOE、Timp2、Cst7等mRNA表达明显下降,MAPK通路中P-JNK和P-ERK以及NF-κB通路中P-P65蛋白表达明显升高;(6)沉默BV2小胶质细胞中TREM2蛋白表达后,PFF刺激小胶质细胞后的培养基刺激HT22神经元,神经元中磷酸化α-Syn表达明显升高,细胞活力下降以及细胞凋亡增加;(7)由于TREM2表达下降导致下降的DAM核心标志物Timp2 mRNA在ERK1/2信号途径抑制后显著升高。结论:本研究提示,在α-Syn导致的神经炎症中,TREM2可能通过ERR1/2信号途径促进抗炎性DAM激活,进而抑制神经炎症,减少海马中神经元损伤,而在PD认知障碍中起保护作用。