二参真武汤调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制心肌纤维化的体外实验研究

目的探究二参真武汤抑制心肌细胞纤维化的作用机制LEE011价格。方法采用灌胃给予SPF大鼠二参真武汤、贝那普利7d的方法制备含药血清,从出生3d内乳鼠心脏提取原代心肌成纤维细胞,采用免疫荧光和台盼蓝染色法鉴定细胞纯度与成活率,采用CCK-8法确定二参真武汤含药血清的最佳给药浓度与给药时间,采用血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激原代心肌成纤维细胞复制心肌纤维化模型,将原代心肌成纤维细胞分为正常组、模型组、二参真武汤组、贝那普利组,采用ELISA法检测胶原蛋白(collagenase,Col)-Ⅰ和Col-Ⅲ含量,采用Westernblot法检测平滑肌肌动蛋白(alpha-smoothmuscleactin,α-SMA)、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达水平,qRT-PCR法检测α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、PI3K、AKT、mTORmRNA表达水平。结果提取的原代心肌成购买Alisertib纤维细胞纯度与成活率均达到95%以上。与正常组比较,模型组α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ表达水平显著升高(P<0.05),p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,二参真武汤组原代心肌成纤维细胞中α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、p-PI3K、p-AKT、Hepatitis Ep-mTOR蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论二参真武汤抑制心肌纤维化的机制与调节PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。