目的基于NF-κB信号通路探究鬼箭羽醇提物对AD大鼠模型学习记忆影响的机制,为鬼箭羽醇提取物防治AD提供实验依据。方法将60只SPF级雄性SD大鼠,随机分为6组,每组10只,分别为:假手术组(Sham operation group,SG)、模型组(Model group,MG)、盐酸多奈哌齐组(Donepezil Hydrochloride,DPH)、鬼箭羽醇提物低、中、高剂量组(Alcohol extract of Euonymus Alatus,EA-L,EA-M,EA-H),各治疗组及模型组予Aβ_(25-35)双侧海马注射复制AD模型,假手术组注射等体积无菌生理盐水。分别给予假手术组、模型组大鼠双蒸水、西药组给予盐酸多奈哌齐片、鬼箭羽醇提物组分别给予不同剂量的鬼箭羽醇提物连续灌胃4w。采用水迷宫insects infection model实验检测各组大鼠的学习记忆能力情况。用WST-1法检测大鼠海马组织中SOD活力和TBA法检测MDA的Z-VAD-FMK半抑制浓度含量,观察鬼箭羽醇提物对AD模型大鼠氧化应激的影响。ELISA检测大鼠血清中1L-1β、TNF-α炎症因子水平;采用HE、尼氏染色法(Nissl staining)观察大鼠海马CA1区的组织形态学改变;Western Blot检测NF-κB、IκB-α、Caspase-3的表达情况。结果1.水迷宫实验(定位航行与空间探索实验):定位航行实验显示,与SG相比,MG大鼠逃避潜伏期时间下降趋势缓慢;各治疗组显著优于模型组。空间探索实验显示,MG大鼠穿越平台次数减少、首次通过原平台的时间增加、在目标象限游泳的时间缩短;与MG比较,各治疗组大鼠的学习记忆能力明显改善。2.大鼠海马组织中氧化应激指标:与SG对比,MG大鼠脑组织中SOD活力显著降低,MDA含量显著增加(P<0.01);与MG对比,各治疗组大鼠脑组织中SOD活力明显升高,EA-M、EA-PLX-4720小鼠H和DPH大鼠脑组织中的MDA含量明显降低(P<0.05或P<0.01),呈现明显的剂量依赖性。3.大鼠血清中炎症因子含量:与SG对比,MG大鼠血清中炎症因子IL-1β、TNF-α水平显著升高(P<0.01);与MG对比,EA-M、EA-H、DPH大鼠血清中TNF-α、IL-1β水平明显降低(P<0.05),EA-H、DPH较为显著(P<0.01),呈现明显的剂量依赖性。4.HE、Nissl染色法结果:HE:与SG比较,MG大鼠海马区结构异常,神经元数目明显减少,锥体细胞数量减少,细胞带紊乱、变稀、散在分布甚至中断,同时可见许多细胞体积缩小,胞核固缩,染色加深,有大量的小胶质细胞增生;各治疗组,神经元细胞数量增多,细胞排列相对整齐,分布较为均匀,细胞内结构清晰正常,胶质细胞增生减少。Nissl:与SG比较,MG鼠海马区阳性染色细胞显著降低,细胞排列疏松;各治疗组大鼠海马区阳性染色细胞显著增加,细胞排列相对紧密。5.Western blot结果:与SG比较,MG大鼠NF-κB、caspease-3表达显著增高(P<0.01);IκB-α的表达显著降低(P<0.01)。与MG相比,EM-M、EA-H、DPH的NF-κB、caspease-3蛋白表达显著降低,(P<0.05或P<0.01);EM-M、EA-H、DPH的IκB-α的表达显著增高(P<0.05或P<0.01),呈现明显的剂量依赖性。结论1.鬼箭羽醇提物具有改善AD模型大鼠学习记忆能力作用。2.鬼箭羽醇提物改善AD模型大鼠学习记忆能力作用的机制可能是与具抗炎、抗氧化的作用有关:(1)通过增加海马组织中SOD的活力、减少MDA含量;(2)降低血清中炎症细胞因子IL-1β和TNF-α含量水平,抑制IkB-α、促进NF-κB、Caspase-3蛋白的表达,通过抗炎和抗氧化抑制和清除Aβ的生成,增加大鼠的学习和记忆能力,发挥防治AD的作用。