薯蓣皂苷通过信号通路对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的:探讨薯蓣皂苷对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化及Hedgehog信号通路的影响。方法:分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,分为对照组、薯蓣皂苷低(15%胎牛血清的DMEMMC3配制培养基中加1μmol/mL薯蓣皂苷)、中(15%胎牛血清的DMEM培养基中加3μmol/mL薯蓣皂苷)、高(15%胎牛血清的DMEM培养基中加9μmol/mL薯蓣皂苷)浓度组、阳性对照组(15%胎牛血清的DMEM培养基中加成骨诱导液),培养7 d后,茜素红染色观察骨髓间充质干细胞矿化结节;细胞计数试剂盒-8法检测骨髓间充质干细胞增殖能力;检测碱性磷酸酶(ALP)水平;荧光定量PCfoetal immune responseR法检测骨髓间充质干细胞中SHH、IHH、RunCHIR-99021x2信使RNA(mRNA)表达水平;蛋白免疫印迹法检测骨髓间充质干细胞中Smo、Gli1、Ptch1蛋白表达水平。结果:对照组可见点状矿化结节,与对照组相比,薯蓣皂苷低、中、高浓度组的矿化结节数目依次增多,体积依次增大,骨髓间充质干细胞增殖率、碱性磷酸酶水平,SHH、IHH、Runx2 mRNA,Smo、Gli1、Ptch1蛋白表达水平依次升高,差异有统计学意义(P<0.05);阳性对照组的矿化结节数目最多,连接成片,体积较大,且骨髓间充质干细胞增殖率、碱性磷酸酶水平,SHH、IHH、Runx2 mRNA,Smo、Gli1、Ptch1蛋白表达水平高于薯蓣皂苷高浓度组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:薯蓣皂苷可以促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,可能与Hedgehog信号通路的激活有关。