目的:本研究旨在探索乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)整合对代谢功能的影响及HBV整合发生的潜在机制。方法:1.测序分析本研究通过代谢组学和转录组学联合分析探索HBV整合对能量代谢的影响。从东方肝胆外科医院的手术患者中收集了49例肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)和对应癌旁组织样本,运用HBV捕获测序和转录组测序技术,探索HBV整合数量和比例以及胞苷脱氨酶-脱辅基脂蛋白B mRNA编辑酶的催化多肽3(Apolioprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptides,APOBEC)家族基因和核酸内切酶基因表达水平。2.细胞实验本研究采用共聚焦显微成像技术,研究细胞中HBV、APOBECTrichostatin A浓度3B和线粒体之间的亚细胞定位关系。检测HBV整合对细胞中APOBEC3B的表达、线粒体拷贝数以及细胞凋亡和增殖的影响。3.统计方法在进行两样本的比较时,采用Shapiro-Wilk检验来检验数据是否符合正态性检验,如果符合正态分布并且方差齐,则使用独立样本t检验,否则使用两个样本的t’检验。如果数据不符合正态分布,则采用Mann-Whitney检验进行分析。代谢组学检测出来的差异代谢物使用Metabo Analyst 5.0进行代谢通路分析。采用Bonferroni校正和False discovery rate校正来消除多重比较的影响。相关性分析采用Spearman检验计算双变量相关系数。定义双边P<0.05为具有统计学意义的结果。结果:1.线粒体-HBV整合对泛酸和辅酶A代谢途径的影响。相比较无HBV整合的类器官,有HBV整合的类器官中泛酸盐及其所在的循环代谢路径中的代谢物和代谢酶均显著上升,而辅酶A却未见改变。2.线粒体-HBV整合对精氨酸代谢途径的影响。线粒体-HBV整合显著升高鸟氨酸盐及其所在代谢途径中的代谢物和代谢酶,然而尿素却没有显著变化。3.线粒体-HBV整www.selleck.cn/products/azd6738合对核苷酸生物合成途径的影响。嘌呤生物合成途径中,胞苷二磷酸、脱氧鸟苷、二磷酸腺苷、腺苷和腺嘌呤等在有HBV整合的类器官中显著下降,而鸟嘌呤核苷却显著上升。嘧啶生物合成途径中,胸苷、胸腺嘧啶、胞苷和尿苷二磷酸等在有HBV整合的类器官中显著下降。与之对应的代谢酶的表达量也显著降低。4.线粒体-HBbiomechanical analysisV整合对谷胱甘肽代谢途径的影响。谷氨酸盐在有HBV整合的类器官中升…