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目的 分析硫酸镁联合不同剂量低分子肝素(LMWH)治疗对重度子痫前期产妇胎盘缺氧及氧化应激指标的影响。方法 选取2020年1月—2023年1月南阳市第一人民医院收治的120例重度子痫前期产妇，以随机数字表法分为小剂量组(40例，硫酸镁联合小剂量LMWH治疗)、大剂量组(40例，硫酸镁联合大剂量LMWH治疗)、硫酸镁组(40例，硫酸镁治疗),3组产妇均治疗1周。比较治疗前后3组产妇selleck HPLC血压[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)]、肾脏功能[24 h尿蛋白量、尿蛋白/尿肌酐]、脐血流指数[脐动脉子宫动脉搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、收缩期与舒张期血流比值(S/D)]、胎盘缺氧程度[胎盘生长因子(PLGF)、可溶性Endoglin(sEng)、可溶性fms样酪氨酸激酶-1(sF1t-1)Selection for medical school]、氧化应激反应[超氧化物歧化酶1(SOD-1)、丙二醛(MDA)、晚期蛋白质氧化产物(AOPP)]、凝血功能[纤维蛋白原(FIB)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆凝血酶时间(TT)]。比较治疗1周内3组产妇药物不良反应总发生率[便秘、口干出汗、自发性出血],比较3组产妇不良妊娠结局总发生率[胎盘早剥、剖宫产、产后出血];比较3组胎儿出生体质量。结果 治疗1周后3组产妇SBP、DBP、24 h尿蛋白量、尿蛋白/尿肌酐、sEng、sF1t-1、MDA、AOPP、FIB、PI、RI、S/D水平显著低于治疗前，且大剂量组显著低于小剂量组、硫酸镁组(P<0.05);3组产妇PLGF、SOD-1、APTT、TT水平显著高于治疗前，且大剂量组显著高于小剂量组、硫酸镁组(P<0.05)。治疗1周内，3组产妇不良反应总发生率比较无统计学意义(SAG小鼠P>0.05)。大剂量组产妇不良妊娠结局总发生率显著低于小剂量组、硫酸镁组(P<0.05),胎儿出生体质量显著大于小剂量组、硫酸镁组(P<0.05)。结论 硫酸镁联合大剂量LMWH治疗重度子痫前期产妇可改善其胎盘缺氧情况，缓解产妇氧化应激反应，且药物安全性良好。

近年来,土壤重金属污染对粮食安全和人类健康构成巨大威胁,已成为一个亟需解决的环境问题。镉(cadmium)因其高度的生物富集性和潜在生物毒性,成为目前土壤中主要的重金属污染物之一。玉米是我国重要的粮饲作物与工业原料,土壤中高浓度的镉污染严重影响玉米的正常生长发育。WRKY转录因子是调控植物应答各种生物和非生物胁迫的关键调控因子,但其在玉米响应镉胁迫过程中的功能和调控机制尚不清晰。本研究基于实验室之前玉米根部镉胁迫转录组数据,克隆寻找更多得到了一个响应镉胁迫的玉米WRKY基因Zm WRKY64;并利用拟南芥过表达植株和玉米突变体来分析鉴定Zm WRKY64在植物响应镉胁迫信号通路中所起的作用,并尝试解析其调控植物镉胁迫耐受性的分子机制,获得的主要结果如下:(1)基于实验室玉米镉胁迫转录组数据筛选到了一个响应镉胁迫的WRKY基因,蛋白质序列比对和系统发育树分析表明该WRKY转录因子与Sb WRKY64的亲缘关系最近,故将其命名为Zm WRKY64。在镉胁迫下,玉米根和叶片中Zm WRKY64基因的表达量均显著上升。烟草瞬时转化实验证明Zm WRKY64定位在细胞核中;酵母转录激活实验表明Zm WRKY64在酵母中具有转录激活活性。(2)构建Zm WRKY64基因拟南芥超表达载体并转入拟南芥,对转基因材料进行镉胁迫耐受性评测;结果显示在拟南芥中过量表达Zm WRKY64基因显著增强了转基因植株种子,幼苗和成苗对镉胁迫的抗性;镉胁迫处理后,与野生型(WT)相比,过表达Zm WRKY64基因的拟南芥植株中镉含量显著降低;进一步分析发现参与拟南芥镉吸收和转运的相关基因(At IRT1,At ZIP1,At HAM2,At NRAMP3和At NRAMP4)的表达量在过表达植株中显著降低。(3)在玉米Ac/Ds转座子插入突变体库中筛选到两个Zm WRKY64基因突变体(zmwrky64-1和zmwrky64-2),进一步鉴定表明zmwrky64-1是一个敲低(knockdown)突变体,而zmwrky64-2突变体中Zm WRKY64基因的表达未受影响。与对照相比,zmwrky64-1突变体出现了镉敏感表型。镉胁迫后,zmwrky64-1突变体叶片中镉积累量显著增加,根中镉含量虽与对照相比无明显差异,但是根的生长受到抑制。通过实时定量PCR和根系转录组测序分析发现参与镉细胞分布,转运和生长素运输相关基因(Zm ABCG51,Zm ABCB13/32,Zm ABCB10,Zmrole in oncology care ABCC4,Zm HAM3和Zm NRAMP5)的表达量在zmwrky64-1突变体中显著降低。综上所述,本文初步研究了Zm WRKY64转录selleck化学因子在植物应答镉胁迫过程中的功能及调控机制,相关结果可为玉米耐镉胁迫生物技术育种提供优异候选基因。

目的:青光眼是世界范围内导致失明的主要不可逆原因之一,以往的研究显示,青光眼患者的视觉皮层存在异常的功能连通性(functional connectivity,FC)。丘脑是视觉信号传递的中继核,然而,目前尚不清楚青光眼患者丘脑的FC是如何改变的。本研究运用静态功能连接(s FC)与动态功能连接(d FC)方法,观察原发性闭角型青光眼(primary angle closure glaucoma,PACG)患者丘脑的功能连通性及变异性模式,并分析异常脑区与临床眼科参数之间的关系。方法:回顾性分析2015年7月至2022年10月间确诊的PACG患者及健康对照Vorinostat采购者共83例,最终纳入符合入组标准且年龄、性别相匹配的PACG患者34例和健康对照者33例,PACG组患者均由南昌大学第一附属医院的高年资主治医生根据《中国青光眼指南(2020)》中提出的PACG临床诊断标准确诊。所有PACG患者均进行了完整的眼科检查,包括视网膜神经纤维层厚度(retinal nerve fiber ldrug-resistant tuberculosis infectionayer thickness,RNFLT)、眼压(intraocular pressure,IOP)、平均杯盘比(average cup-to-disc ratio,A-CDR)、垂直杯盘比(vertical cup-to-disc ratio,VCDR)和平均视力。入组的PACG和HC均进行3.0T静息态脑功能磁共振数据采集,数据经过预处理后,以双侧丘脑分别作为种子点,进行全脑水平的s FC分析,同时以滑动时间窗的方法捕获两组的d FC变异系数,并与临床眼科参数进行相关性分析。结果:(1)s FC结果显示,PACG组相较于HC组,双侧丘脑与右侧颞横回以及左侧前扣带回功能连接减低,左侧丘脑与左侧岛叶的功能连接减低;双侧丘脑与左侧额上回功能连接增加。(2)d F更多C结果显示,与HC组相比,PACG患者左侧丘脑与右侧颞上回、右侧丘脑与右侧脑干的功能连接变异性减低,与右侧小脑前叶的功能连接变异性增加。(3)相关性分析显示PACG患者双侧丘脑与左侧额上回的s FC值与RNFLT呈正相关(左侧r=0.432,p=0.011;右侧r=0.377,P=0.028),与A-CDR、V-CDR呈负相关(左侧A-CDR:r=-0.361,p=0.036;左侧V-CDR:r=-0.389,p=0.023;右侧A-CDR:r=-0.345,p=0.045:右侧V-CDR:r=-0.366,p=0.033);左侧丘脑与左侧岛叶之间的s FC值与IOP呈负相关(r=-0.444,p=0.008)。结论:本研究发现PACG患者双侧丘脑存在异常的FC改变,且s FC和d FC分析提供了互补的结果,证实了PACG患者丘脑与视觉、听觉、情绪调节以及认知控制等相关脑区存在广泛的异常静息态功能连接,并且与临床眼科参数存在一定的相关性,提示丘脑功能连接异常在PACG患者的疾病进展中起重要作用。

目的:本研究的目的是通过生物信息学分析来确定胰腺癌中铁自噬相关基因的预后意LY2835219体外义。方法:针对这一问题,采用最小绝对收缩与选择算子模型(LASSO)方法建立了胰腺癌铁自噬相关基因的预后模型。对癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合数据库(GEO)数据集中的胰腺癌患者根据中位数风险评分进一步分为两组:低危组和高危组。采用R软件(版本4.1.2)、Cytoscape(版本3.9.1)、STRING数据库、人类蛋白图谱(HPA)等进行综合生物信息学分析,探讨胰腺腺癌(PAAD)中铁自噬相关基因成员的预后价值。结果:共有 8 个基因(ALOX15、ATG16L1、ATG7、BCAT2、CYB561A3、SNCA、TNF、FBXW7)在LASSO回归模型中,功能富集分析揭Human hepatic carcinoma cell示了细胞对点击此处氧化应激的反应、对氧化应激反应的调节、自噬相关的生物学过程和信号通路。采用STRING数据库对8个铁自噬预后相关基因的蛋白-蛋白相互作用进行分析。Cox回归分析显示,在临床胰腺癌患者中,BCAT2的高表达水平和SNCA的高表达水平与预后好显著相关。结论:综上所述,生物信息学功能分析表明铁自噬相关预后基因对胰腺癌患者具有良好的预后价值,我们的结论可能揭示胰腺癌的发生机制,为胰腺癌治疗提供新的策略和思路。

目的 探究血小板(PLT)、平均红细胞体积(MCV)、乳酸脱氢酶(LDH)、羟丁酸脱氢酶(HBDH)、同型半胱氨酸CL13900使用方法(Hcy)在巨幼细胞性贫血(MA)中的诊断价值。方法 回顾性分析2020年07月-2022年08月于我院就诊的血液系统疾病患者60例的临床资料，所有患者均经临床明确诊断为MA患者37例入MA组，23例为骨髓增生异常综合征(MDS)入MDS组，另选择30例均为我院同期行健康体检的志愿者入对照组。抽取所有参检者清晨空腹肘静脉血测定PLT、MCV、LDH、HBDH、Hcy水平。对比三组PLT、MCV、LDH、HBDH、Hcy水平，另分析PLT、MCV、LDH、HBDH、Hcy单项及联合检测在MA中的诊断价值。结果 MA组PLT水平低于MDS组及对照组，MCV、LDH、HBDH、Hcy水平均高于MA组及对照组，有统计学差异(P<0.05);且MDS组PLT水平低于对照组，MCV、LDH、HBDH、Hcy水平均高于对照组，有统计学差异(P<0.05)。联合检测在MA诊断中应用价值最高(AUC为0.921,灵敏度为86.50%,特异度为73.30%),AM-2282抑制剂其次为LDH(AUC为0.785,灵敏度为54.10%,特异度为83.30%)、Hcy(AUC为0.776,灵敏度为56.80%,特异度为73.30%)、HBDH(AUC为0.741,灵敏度为43.20%,特异度为86.70%)、MCV(AUC为0.717,灵敏度为51.40%,特异度为66.70%)、PLT(AUC为0.654,灵敏度为48.60%,特异度为73.30%)。结论 PLT、MCV、LDH、HBDH、Hcy联合检测在MA诊断中应用价值较高，通过对各指标水平变化的判断利于评估患者病情状desert microbiome况，为临床进一步明确诊疗提供有效参考，具有较高的临床推广应用价值。

【目的】鉴定调控水稻耐盐性状的新基因并分析其可能的作用机制对提高水稻耐盐特性意义重大。【方法】利用转录组测序技术对耐盐性不同的水稻材料明恢86（盐敏感）和突变体（耐盐）幼苗在正常和盐胁迫条件下进行全基PLX3397 MW因组表达谱分析，筛选差异表达基因，分析其功能；采用ABI PRISM 7 500序列检测系统和SYBR Green realtime软件进行qRT-PCR分析验证。【结果】在NaCl处理前，对比明恢86和突变体共有2 588个差异表达基因，其中，有1 181个基因表达上Opportunistic infection调，1 407个基因表达下调。而经NaCl处理24 h后，对比明恢86和突变体则有2 376个差异表达基因，917个基因上调，1 459个基因下调。对这些差异表达基因进行GO功能富集分析与KEGG pathway分析，发现转录因子（TFs）和抗氧化酶可能在水稻盐胁迫响应中起主导作用，尤其是转录因子BGIOSGA034613、BGIOSGA026766、BGIOSGA003709和BGIOSGA003710以及抗NSC 119875采购氧化酶CatB和SOD1可能直接参与水稻盐胁迫下的渗透传感。qRT-PCR分析发现参与氧化还原过程并发挥氧化还原活性的CatA、CatB、SOD1和POX2在突变体中的表达量显著提高。【结论】转录因子BGIOSGA034613、BGIOSGA026766、 BGIOSGA003709和BGIOSGA003710等几个功能未知蛋白以及抗氧化酶CatB和SOD1能够作为水稻耐盐机制研究中的功能基因。

癌症是一组可影响身体任何部位的多种疾病的通称。癌症的一个特征是异常细胞快速产生,这些细胞不受控制地增殖,最终可以形成肿瘤。世界卫生组织报告,癌症是全球第二大致死疾病,并造成了全球约六分之一的死亡。面对肿瘤对人类健康造成的重大威胁,肿瘤诊疗技术也一直在推陈出新。传统成像技术具有一定程度的辐射风险,而且属于静态成像方式,只能用于术前成像。而传统三大癌症治疗手段也都存在一定的局限性。例如,手术切除存在易复发的风险;化疗药物的副作用大,易产生耐药性;放疗则会对癌旁的正常组织构成威胁。因此,肿瘤诊疗技术的进一步发展是亟待解决的问题。近年来,光诊疗技术包括近红外荧光成像(NIR-FLI)、光动力治疗(PDT)和光热治疗(PTT),其因非侵入性、时空可控性、低毒副作用和诊疗一体化等特点引起了科研工作者的广泛关注。光敏剂(PSs)通过辐射跃迁产生荧光或磷光用于光学成像,通过非辐射跃迁将光能转化为化学能或者热能,用于肿瘤治疗。当前,大部分报道的PSs主要包括无机纳米材料,如金纳米粒子、过渡金属化合物、碳基材料等,它们在实际应用过程中面临着不可降解性和潜在的毒性问题。另一类是卟啉类,花菁类及二氢叶酚e6等有机商业化染料,虽已被广泛用于生物领域,但仍面临稳定性不够、产生活性氧(ROS)有限、光热转化效率(PCE)低等问题。近十年来,具有螺旋桨构型和供-受体(D-A)结构的新型有机PSs被逐渐开发出来。一方面,该类PSs能有效缓解无机纳米材料倍受关注的毒性问题;另一方面,不同于商业化染料大多具有平面化的分子结构,其扭曲的分子构型能显著抑制π-π堆积导致的荧光淬灭,易光漂白和ROS生成不足等问题。此外,增强的分子内电荷转移(ICT)还有利于促进吸收和发射波长红移、降低单重态-三重态能隙(ΔE_(S-T))、促进系间穿越(ISC)并激活光动力性能。因此,含有D-π-A结构的有机光敏剂被认为是最具有潜力的生物纳米材料之一。本论文基于具有D-π-A结构的有机光敏剂,分别通过分子工程、供体工程和π桥工程策略,构建了三个系列的新型有机纳米光敏材料并探究其在NIR-FLI引导的肿瘤光诊疗中的应用。这些有机光敏剂展现出较低的暗毒性,明显的光毒性,良好的生物相容性,优异的活体成像能力及肿瘤抑制效果,为构筑新型诊疗一体化的有机光敏剂提供了独特的设计策略。本论文开展的具体研究内容如下:1、在第二章中,本论文采用分子工程策略在不改变π桥结构的基础上,通过改变电子供体的类型或受体的数量,设计并合成了一系列具有D-A、D-A-D或A-D-A结构的有机光敏剂。其中以苯基吡咯烷(PPR)为供体,氰基为受体且具有A-D-A结构的光敏剂PPR-2CN表现出最长的荧光发射和优异的I型ROS生成能力。理论计算表明,较小的ΔE_(S-T)和相对较大的自旋轨道耦合常数(SOC)促进了ISC,进而诱导了ROS的产生。此外,确认细节PPR-2CN还展现出独特的谷氨酸(Glu)和谷胱甘肽(GSH)消耗能力,可直接抑制肿瘤细胞内GSH的生物合成。随着GSH含量的下降,可进一步引起谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)失活和脂质过氧化(LPO),最终导致细胞铁死亡。在本章中,本论文首次实现了单组分有机光敏剂能够同时作为I型光动力试剂和非金属的铁死亡诱导剂用于NIR-FLI引导的多模态协同诊疗。2、在第三章中,基于第二章对光敏剂结构与其对应性能的认识,本论文在不改变π桥和受体结构的基础上,利用供体策略逐渐提高供体的供电子能力,实现了光诊疗性能的进一步提升。其中以三苯胺(TPA)作为供电子基团,氰基作为吸电子基团的光敏剂CNTPA-TPA具有最强的D-A强度,并表现出优异的I型ROS生成能力。此外,氰基同样也能够与Glu和GSH反应,直接降低细胞内GSH的含量,进而诱发铁死亡。光动力治疗和铁死亡的协同作用会进一步导致免疫原性细胞死亡(ICD),但免疫应答仍不足。因此,为了进一步增强免疫效应,本论文通过联合抗PD-L1,不仅成功治愈了原位肿瘤,而且有效抑制了远端肿瘤的生长和肺转移。在本章中,本论文首次实现了单组分有机光敏剂能够用于NIR-更多FLI引导的铁死亡辅助的光动力免疫治疗用于肿瘤多模态协同诊疗。3、在第四章中,在不改变供体和受体结构的基础上,本论文通过π桥工程策略构建了一系列分别以苯环、呋喃和噻吩作为π桥的有机光敏剂,用于靶向肿瘤线粒体的I型PDT和PTT的协同治疗。通过调控π桥的给电子能力和分子内的自由运动,以噻吩为π桥的光敏剂STB在固态下荧光主峰超过790 nm,并表现出优异的超氧自由基(O_2~(·-))和羟基自由基(·OH)生成能力和可观的光热转化能力。理论计算表明,STB具有较强的D-A强度,有利于降低ΔE_(S-T),促进ISC并诱发PDT。此外,较高的摩尔消光系数和更自由的二面角旋转促进了分子内运动,使STB的PCE高达51.9%。值得一提的是,带正电荷的STB可通过静电作用主动靶向肿瘤细胞的线粒体,改善其在肿瘤区域的富集度,以提升治疗效果。体外和体内实验证明,STB纳米粒Molecular phylogenetics子(NPs)显著抑制了癌细胞的增殖和肿瘤的生长。在本章中,本论文实现了单组分有机光敏剂能够用于NIR-FLI和光热成像(PTI)引导的高效PDT和PTT的协同诊疗。

目的 建立和验证丹磺酰氯柱前衍生化高效液相色谱法测定骨肽注射液中组胺含量的检测分析方法。synthetic biology方法 将骨肽注射液经三氯乙酸沉淀后，取上清液以丹磺酰氯丙酮溶液为衍生化试剂，衍生化后进行高效液相色谱测定。色谱条件为：色谱柱采用C_(18)柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以乙腈为流动相梯度洗脱，柱温：30℃,检测波长：254 nm。方法构建后对此方法进行方法学考察(标准曲线、检出限、加标回收率、专属性、重复性、耐用性)。结果GW-572016供应商 进样量在1.018ng～203.6ng范围内峰面积与进样量呈良好的线性Q-VD-Oph采购关系，相关系数r=0.999,检出限为1.27ng·mL~(-1),加标平均回收率为93.06%,重复性RSD值小于1.0%,专属性及耐用性均符合要求。结论 该方法准确可靠、灵敏度高，重复性好，可用于测定骨肽注射液中的组胺含量。

目的：探究通督调神针刺法联合双重抗血小板(DAPT)治疗短暂性脑缺血发作(TIA)的临床效果。方法：选取2020年5月—202PS-341作用2年5月我院收治的78例TIA患者为观察对象，根据数字随机法分为观察组及对照组，各39例，对照组采用DAPT治疗，观察组在此基础上联合通督调神针刺法治疗。比较AMG510浓度两组患者的临床疗效、脑氧代谢指标、脑血流动力学、血清因子[人血浆脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)、可溶性血管细胞黏附因子(sVCAMass spectrometric immunoassayM-1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)]水平。结果：观察组的总有效率为94.87%,高于对照组的79.49%;治疗后，观察组左椎动脉、右椎动脉、基底动脉血流速度及CjvO_2、SjvO_2水平均高于对照组(P<0.05),观察组的Lp-PLA2、sVCAM-1及HIF-1α水平均低于对照组(P<0.05)。结论：采用通督调神针刺法联合DAPT方案治疗TIA患者疗效确切，可有效改善患者脑氧代谢、脑血流动力学水平，降低其血管炎症反应，改善血管内皮功能。

前期研究已验证青黄散联合补肾健脾方为主的含砷中药复方治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的有效性和安全性,并发现青黄散治疗MDS具有促进造血,遏制恶性克隆的作用,并且可以调控MDS患者的HIF-1α水平,为进一步探索含砷中药复方治疗MDS和HIF-1α在MDS患者中的表达情况和与治疗时间的影响,以及青黄散调控HIF-1α作用机制,本研究拟从临床试验研究结合MDS细胞fungal infection实验两个方面进行机制探讨。研究一含砷中药复方治疗MDS患者的临床观察和对HIF-1 α表达的影响目的:观察分析含砷中药治疗MDS的疗效和特点,以及MDS患者骨髓细胞中HIF-1α水平,分析HIF-1α与患者临床特征的相关性。方法:采用病例系列研究方法根据纳入排除标准入组2022年1月至2022年9月在中国中医科学院西苑医院血液科接受治疗的MDS患者,观察2个疗程后进行疗效评定,在接受治疗后1年定期随访记录血常规情况。从观察病例中根据治疗前后的骨髓样本情况分组,治疗6个月后组和治疗1年后组,将两组治疗前后的骨髓血分别提取血浆和骨髓单个核细胞,采用ELISA、qRCR技术方法检测治疗前后各组MDS患者骨髓中HIF-1α的蛋白和mRNA相对表达量,并将MDS患者骨髓中HIF-1α相对表达量与骨髓增生情况、染色体核型、血常规、IPSS-R等临床指标进行相关性分析。结果:(1)共纳入28例MDS患者,含砷中药复方治疗2个疗程后总有效率为64.3%,根据2022年MDS诊断分型标准,MDS-LB有效率(60%),与MDS-IB1有效率(66.7%)相近,含砷中药复方治疗MDS可有效改善外周血,PLT 6～12个月后上升明显且稳定。(2)接受含砷中药复方治疗6个月后、以及治疗1年后的MDS患者骨髓HIF-1α的mRNA相对表达量明显低于治疗前(P=0.0072,P=0.0156),而治疗后的两组比较无统计学意义(P>0.05)。治疗前后MDS患者骨髓中的HIF-1 α蛋白水平无明显差异(P>0.05)。(3)MDS患者骨髓中HIF-1α的mRNA与蛋白存在中等正相关性(r=0.4923,P=0.0380)。MDS患者骨髓单个核细胞中的HIF-1α mRNA与骨髓增生程度呈正相关(r=0.3839,P=0.0481);与骨髓粒系细胞占比也呈明显正相关(r=0.5596,P=0.0024),与血常规 MCV 呈负相关(r=-0.4060,P=0.0356)。MDS患者骨髓血浆中的HIF-lα蛋白相对表达量与骨髓增生程度呈正相关(r=0.5628,P=0.0121);与血常规WBC呈现明显正相关情况(r=0.6038,P=0.0062)。结论:1.以青黄散联合补肾健脾中药为主的含砷中药复方治疗MDS患者2疗程后的总有效率为64.3%,并随着治疗时间延长可有效改善患者外周血PLT水平,6～12个月左右血象更趋于平稳。2.含砷中药复方可明显降低MDS患者骨髓单个核细胞中HIF-1α mRNA表达水平,且随治疗时间延长作用趋势明显。3.MDS患者骨髓细胞的HIF-1 α水平与骨髓增生程度和粒系细胞呈正相关,与外周血有一定联系。研究二青黄散干预MDS细胞株SKM-1调控HIF-1 α的机制研究目的:验证青黄散对MDS细胞株SKM-1中的HIF-1 α调节作用,以及结合线粒体中间代谢产物探讨青黄散调控MDS细胞株中HIF-1 α的作用机制。方法:(1)采用CCK-8实验分析青黄散的主要作用成分靛玉红、As2S2对SKM-1细胞的存活率检测,计算细胞半抑制率药物浓度;(2)根据药物IC50设置浓度梯度干预细胞,通过qRCR技术检测分析单药物成分作用SKM-1细胞时HIF-1α mRNA表达水平,设置药物不同配比情况以模拟青黄散高、低两种不同浓度;(3)通过qRCR、Western blot技术检测SKM-1细胞中HIF-1α,和相关作用分子VHL、PHDs的表达水平、获悉更多采用LC-MS/MS技术检测SKM-1细胞线粒体中间代谢产物α-KG、α-HG和琥珀酸的含量,探讨青黄散对MDS调控HIF-lα的分子作用机制。结果:(1)靛玉红对SKM-1细胞中HIF-1 α mRNA水平无明显影响,As2S2可下调HIF-1α的mRNA表达水平,并且当药物预浓度为1、2、4μmonl/L时HIF-1α水平下降明显(P<0.05);高低两种浓度的青黄散均可有效下调HIF-1α的蛋白表达,与空白对照组差异显著(P<0.0001),Imidazole ketone erastin并且与青黄散低浓度组相比,高浓度组对SKM-1细胞中HIF-1 α蛋白抑制作用更明显(P<0.01);(2)青黄散可显著上调PHD1 mRNA表达水平,上调PHD1蛋白水平;可下调PHD2 mRNA水平,上调PHD2蛋白水平,且高浓度组作用明显(P<0.001);下调PHD3蛋白表达水平;(3)青黄散可影响SKM-1细胞中TCA中间代谢产物α-KG、α-HG、琥珀酸的浓度含量。低浓度组可明显下调α-KG(P<0.01),而高浓度组无差异;两组青黄散均可显著抑制α-HG的产生(P<0.0001),且高浓度组作用更明显;两组青黄散均可下调中间代谢产物琥珀酸水平(P<0.01),但不同浓度干预无差异(P>0.05)。(4)青黄散可下调VHL mRNA相对表达量(P<0.05),但对VHL的蛋白表达水平无影响;高浓度组可明显上调pVHL蛋白相对表达量。结论:1.青黄散可明显下调MDS细胞株SKM-1中HIF-1α蛋白表达水平,且高浓度青黄散分子作用效果更明显。2.青黄散通过调控线粒体中间代谢产物α-HG、琥珀酸、α-KG的表达,上调PHD2的活性,进而促进HIF-1α的羟化。3.青黄散通过上调pVHL蛋白水平促进识别并泛素化降解HIF-1α。