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目的 探讨双硫仑/铜(DSF/Cu)诱导肝癌细胞铁死亡的作用机制。方法 采用DSF/Cu 0、0.5、1.0、1.5、2.0和4.0μmol/L处理人肝癌细胞株Huh7,CCK-8法检测细胞活力，激光共聚焦显微镜观察细胞内脂质过氧化物和谷胱甘肽(GSH)水平的变化，流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平，Western blot和实时荧光定量PCR检测铁死亡相关基因谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的蛋白和mRNA表达。结果 随着DSF/Cu浓度的升高，细胞活力逐渐降低(P<0.0commensal microbiota5)。与DSF/Cu 0μmol/L比较，DSF/Cu处理细胞后，脂质过氧化物积累，细胞内ROS水平升高。与DSF/Cu 0μmKD025浓度ol/L比较，DSF/Cu 2.0μmol/L能够下调细胞GPX4蛋白和mRNA的表达(P<0.05),降低细胞GSH水平(P<0.05)。铁死亡抑制剂去铁胺能够部分恢复DSF/Cu抑制的细胞活力(P<0.05)。结论 DSF/Cu可抑制肝癌DNA Methyltransferas抑制剂细胞活力，并通过抑制GPX4表达来诱导肝癌细胞发生铁死亡。

目的 对化疗所致恶心呕吐的非药物干预措施进行系统评价再评价。方法 检索有关非药物干预防治化疗所致恶心呕吐的系统评价或Meta分析文献。检索数据库包括中国知网、万方全文数据库、维普全文数据库、中国生物医学文献数据库、Cochrane Library、卫生保健及护理学数据库(CINAHL)、Embase、Pubmed,检索时间为建VX-445体内库至2022年6月30日。筛选文献后，提取纳入文献的相关资料，并评价分析其方法学质量和证据质量。结果 共纳入19篇系统评价文献，其中中质量等级4篇，低质量等级8篇，极低质量等级7篇。文献共评价8种非药物措施的证据，其中穴位刺激对化疗所致恶心呕吐的积极影响最为显著。结论 通过对目前已发表的系统评价再评价发现，非药物干预可尝试作为临床或居家管理化疗所致恶心呕吐的辅助手段，其中穴位刺激LY294002使用方法可优先考虑。但纳入文Cicindela dorsalis media献的方法学质量不高、证据等级偏低，其效果仍需进一步验证。

茄子(Solanum melongenaL.)是中国及亚洲一些地区广泛种植的经济型茄科蔬菜。茄科作物多属于无限生长型,矮化是茄科作物主要育种目标之一。矮化与植株抗逆、高产有密切关系,利用矮化基因材料进行品种的遗传改良、简化栽培管理在生产中具有重要意义。本研究通过对茄子矮化突变体slf的候选基因定位及验证,明确了候选基因SmAFB5在调控茄子株高中的关键作用;进一步研究证明了SmAFB5在抗生长素CCRG 81045类除草剂picloram中的功能;揭示了生长素信号在调控叶片大小分子机制中的作用。主要结果如下:1.对F2分离群体进行BSA测序及KASP验证,确定了候选基因为AUN SIGNALING F-BOXPROTEIN 5(SmAFB5),编码一个TIR1/AFB家族的F-box蛋白。突变体在第三个外显子核苷酸序列1601处,氨基酸序列534处,由C突变为T,引起编码的氨基酸由精氨酸(R)变为赖氨酸(K)。该基因在突变体及确认细节野生型植株的同一组织中表达量相似,不同组织中叶片相对表达量高于根、茎及子叶;编码的蛋白亚细胞主要定位在细胞核,该基因碱基突变对亚细胞定位没有显著影响。2.利用生物信息学对茄子中TIR1/AFB家族基因进行分析表明,SmAFB5与拟南芥中AtAFB5基因及番茄中SlAFB4/5基因进化关系较近。我们对茄子中SmTIR1/AFB家族基因之间的进化关系、各基因的cis元件、3D结构、可能互作的miRNA及蛋白功能结构域等进行了分析,结果表明这一家族基因存在功能冗余和分化,预测在响应生长发育,激素和抗逆等方面发挥着重要作用。3.外施一定浓度的picloram能够抑制茄子幼苗的生长,这种毒害效应与picloram浓度成正相关;slf突变体与野生型相比对picloram有一定的抗性。qRT-PCR分析表明,外施picloram在野生型及突变体植株中对叶片中的SmAFB5基因表达没有显著影响,但能够显著诱导Aux/IAA家族一些基因的上调表达,而突变体中这些基因受picloram诱导表达量显著低于野生型;在野生型植株中利用VIGS技术沉默SmAFB5基因后发现幼苗对picloram抗性增强。这些结果表明SmAFB5功能缺失可以使茄子获得对picloram的抗性。4.对picloram处理的野生型及slf在不同时间取样进行RNA-Seq分析,结果表明差异基因显著富集于生长素信号通路,其中Aux/IAA家族基因在slf中的表达显著低于野生型。6h上调差异表达基因在谷胱甘肽代谢通路中显著富集,表明picloram能够诱导slf突变体植株中合成GST的基因上调表达;同时slf突变体中合成GST的一些基因表达在picloram处理前也略高于野生型。这些结果说明,GST合成酶在突变体中的高水平表达可能对茄子植株增强对picloram的抗性也起到了重要作用。进一步研究表明,picloram处理后钙离子内流在突变体中显著高于野生型,外施一定浓度的模拟钙离子流的钙离子通道激发剂BayK8644能够诱导GST合成基因的上调表达,说明钙离Medical Symptom Validity Test (MSVT)子内流可能参与调控GST合成和植株对picloram的抗性。5.slf植株叶片显著小于野生型,但叶肉细胞面积大于野生型,表明突变体叶片中细胞分裂受到抑制。叶片激素含量分析表明,生长素含量在突变体中高于野生型。RNA-Seq分析表明slf突变体叶片中上调差异表达基因富集在生长素信号通路,尤其是SmAux/IAAs。外施Auxinole下调叶片中Aux/IAA家族基因的表达可以抑制野生型叶片生长,但可以促进slf叶片生长。这一结果揭示了Aux/IAA家族基因表达稳态在茄子叶片大小调控机制中的重要作用。

为了研究双贝糖浆的抗炎物质基础，利用UHPLC-Q-Orbitrap HRMS识别鉴定双贝糖浆与组方君药板蓝根的主要化学成分及入血成分。UHPLC-Q-Orbitrap HRMS结果显示，板蓝根提取物中含71个主要的化学成分、其中有46个成分可入血，以上化学成分在双贝糖浆中被检测到66个、其中42个成分可入血。进一步通过网络药理学探讨其君药板蓝根的抗炎活性成分及作用机制，通过Griess法结合MTT法验证双贝糖浆和板蓝根二者共同入血成分的抗炎活性。网络药理学分析结果表明板蓝根抗炎的关键化学成分有金合欢素、Lateral medullary syndrome异牡荆素、半齿泽兰素等。以LPS诱导RAW CX-5461纯度264.7细胞建立体外炎症模型，5-羟甲基糠醛、胞苷、异牡荆素、丁香酸在100 μmol/L时，能够显著抑制炎症介质NO的释放。在大鼠灌胃双贝糖浆与板蓝根提取物的血清样品中均Captisol配制能够检测到异牡荆素，抗炎活性实验结果表明，其对炎症介质NO的抑制作用最强，为双贝糖浆及其君药板蓝根的关键抗炎活性成分。

金柑(Citrus japonica,曾名为Fortunella japonica)原产于中国,是芸香科柑橘属一种常绿灌木或小乔木。其果实风味独特,深受消费者喜欢。前期研究中,课题组在福建尤溪发现了一株果实基本无油胞的金柑实生变异,其典型特点为果皮极为光滑、极少甚至没有油胞、果皮色泽明亮、果肉分室不明显(暂名为滑皮金柑)。为揭示该突变体果实品质形成的机制,本研究对滑皮金柑和尤溪金柑果实品质相关指标等进行了测定;分析了不同生长发育时期两种金柑果实类胡萝卜素与类黄酮含量的变化及相关基因的表达情况;对两种金柑的叶绿体基因组进行了组装和比较;利用RNA-Seq对不同生长发育时期的两种金柑果实进行了比较转录组学分析并对差异表达基因(DEGs)显著富集的途径相关生理指标(如:植物激素含量、纤维素含量、全钙含量等)进行了测定验证。本研究的主要结果如下:1.滑皮金柑和尤溪金柑果实品质比较滑皮金柑果实的可食率为97.09%,总糖含量为36.41 mg/g,可溶性固形物含量为12.68%,均显著高于尤溪金柑。果实色泽参数测定结果表明,滑皮金柑果皮的L值和b值显著高于尤溪金柑,而a值显著低于尤溪金柑。果实质地指标测定结果显示,两种金柑果实质地差异显著,滑皮金柑果实的硬度、脆性、弹性、胶着性和咀嚼性等指标都极显著高于尤溪金柑,而粘附性显著低于尤溪金柑。2.滑皮金柑和尤溪金柑类胡萝卜素和类黄酮代谢比较研究两种金柑果实果皮和果肉中的类胡萝卜素含量均随着果实成熟升高。两种金柑果皮中类胡萝卜素代谢相关基因,如PSY、PDS、ZDS、CRTISO、LCYe、HYb和ZEP等的表达随着果实成熟总体呈上升趋势,并与胡萝卜素含量存在显著正相关。两种金柑果皮类黄酮含量随果实成熟逐步降低,而果肉中的类黄酮含量呈先升后降的趋势。此外,两种金柑果皮中类黄酮代谢相关基因的表达差异较大。除花后90天的果实外,滑皮金柑果皮medicine containers类胡萝卜素与类黄酮含量均极显著高于尤溪金柑。花后180天滑皮金柑果实果皮的类胡萝卜素和类黄酮含量分别为0.221 mhttps://www.selleck.cn/products/r428.htmlg/g和22.08 mg/g,分别为尤溪金柑的1.66倍和1.85倍。3.滑皮金柑果实突变性状形成的分子机制分别组装了尤溪金柑和滑皮金柑的叶绿体基因组,发现两种金柑的叶绿体基因组无差异,说明滑皮金柑突变性状的形成与叶绿体无关。进一步利用RNA-Seq研究了花后90、120和150天的两种金柑果实转录组差异。总计鉴定获得1823个DEGs,其中大部分DEGs在滑皮金柑中下调表达。GO富集结果显示:这些DEGs显著富集在生物学过程、代谢过程、氧化还原过程、有机酸代谢、羧酸代谢和含氧酸代谢等GO条目上。KEGG富集分析结果显示,涉及次生代谢产物的生物合成、氨基酸的生物合成、植物激素信号转导和植物-病原互作等途径的DEGs显著富集。值得注意的是:不同成熟阶段的两种金柑果实中存在140个共有DEGs,它们主要涉及细胞壁的合成、钙离子结合、细胞程序性死亡、植物激素的合成、类黄酮和类胡萝卜素合成、脂类代谢、抗逆防御等途径,暗示它们在滑皮金柑果实品质性状形成中发挥重要作用。4.DEGs显著富集途径相关生理生化指标的测定验证基于转录组测序结果,对两种金柑中鉴定获得的DEG显著富集途径的相关生理生化指标进行了测定验证。结果显示:内切-β-1,4-葡聚糖酶(Cx)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和几丁质酶活性在两种金柑中的变化趋势整体较为一致。其中,两种金柑果实GST活性的差异最大,花后150天的滑皮金柑GST活性是尤溪金柑的2.31倍。果胶酯酶(PE)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)在两种金柑中呈相反的变化趋势。花后150天的滑皮金柑果实中除全钙含量外,可溶性蛋白、纤维素、类黄酮、类胡萝卜素等物质的含量都显著高于尤溪金柑。花后90、120和150天的两种金柑果实中生长素(IAA)和玉米素(ZT)含量差异很小,而脱落酸(A获悉更多BA)、赤霉素(GA_3)、玉米素核苷(ZR)、水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)含量差异显著。其中,滑皮金柑果实中的SA、ZR、ABA和JA含量均显著高于尤溪金柑。滑皮金柑果实中JA含量更是一直处于较高水平,花后90天的果实中JA含量最高,约为同时期尤溪金柑的3.49倍。此外,滑皮金柑中的GA_3含量显著低于尤溪金柑且一直处于极低水平。综上:滑皮金柑品质整体优于尤溪金柑。滑皮金柑油胞的消失可能与PCD相关基因的下调表达有关系。Cx和PE活性差异暗示它们通过影响分泌腔的形成继而在油胞形成过程中发挥作用,同时它们可能与两种金柑果实质地差异有关。此外,滑皮金柑果实SA、JA、PAL和GST等指标显著高于尤溪金柑,这可能与果实的抗逆性有关。

目的 探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)和血小板/淋巴细胞比值(PLR)在小儿肺炎支原体(MP)感染中的诊断和预后价值。方法 采用回顾性分析，以2023年1-6月肺炎支原体抗体-免疫球蛋白M(MP-IgM)阳性患儿100例为病例组，同期抽取健康患儿100例为对照组；再以病例组患儿NSC 125973体内实验剂量首次复查结果为准，分为未恢复组(MP-IgM阳性)和已恢复组(MP-IgM阴性);将各组NLR、PLR水平进行比较，建立logistic回归模型，利用受试者的工作特征曲线(ROC曲线)对二者的诊断价值进行此网站分析。结果 病例组NLR、PLR水平显著高于对照组(P<0.05);NLR、PLR单独和联合检测诊断儿童MP感染的曲线下面积(AUC)分别为0.749、0.701和0.758,联合检测AUC最大，对应灵敏度为83.00%,特异度为61.00%(P<0.001)。未恢复组NLR和PLR水平也较已恢复组明显提高(P<0.05)。结论 NLRDNA biosensor、PLR与MP感染联系密切，联合检测对MP感染的预测灵敏度更高，两者对患儿预后情况也有一定的提示作用。

木质纤维素生物质,如农业和林业残留物、纸浆厂废弃物和能源作物,由于其高碳水化合物储存,被视为生产生物乙醇的制造过程中糖的良好替代品。因此,近年来人们通过酶水解方法从木质纤维素转化可发酵糖方面做出了巨大努力。纤维素酶在酶水解过程中可以与木质素非生产性结合,对酶解消化率产生负面影响。预处理可以破坏致密的木质纤维素结构,降解大量木质素显著提高木质纤维素生物质的酶消化率。然而,完全去除木质素的成本昂贵,并且严苛的处理条件会导致高碳水化合物损失。可以使用添加剂来减少纤维素酶对底物木质素的非生产性吸附以增强酶的糖化效果。磺化木质素能显著促进木质纤维素底物的酶水解。木质素是一种多酚类化合物,因此,磺化多酚可能具有类似的效果。本课题将单宁酸(TA)磺甲基化制得五种不同磺化度的磺甲基化单宁酸(STA),将其作为8%Na OH预处理麦草酶水解添加剂,探究STA对木质纤维素酶水解和纤维素酶吸附的影响。并且探究STA对酶水解体系p H值的影响以及不同p H值对以STA为添加剂的酶水解糖转化率的影响。(1)制备不同磺化度的磺甲基化单宁酸。通过控制亚硫酸钠的用量制备了不同磺化度(即不同磺酸基含量)的磺甲基化单宁酸(STA)。磺酸基含量分别为0.9,SB431542溶解度1.2,1.8,2.4,3.0 mmol/L的磺甲基化单宁酸,称为STA-0.9,STA-1.2,STPF-6463922作用A-1.8,STA-2.4,STA-3.0;且在本研究的亚硫酸钠用量范围内,STA的磺酸基含量随着亚硫酸钠用量的增加呈线性增加。(2)STA对酶水解的影响。研究了TA与STA对Na OH预处理麦草酶水解效率的影响。结果表明,酶水解效率与STA的磺化程度密切相关。TA对底物的酶消化率有较强的抑制作用,而STA对底物酶消化率有较强的促进作用。单宁酸浓度越高对酶水解的抑制作用越强,添加1.6 g/L的TA完全抑制酶水解。不同磺化度的STA对酶水解的促进作用不同。对于低磺化度的STA(STA-0.9,STA-1.2,STA-1.8)随着添加浓度升高(0-1.6 g/L),对酶水解的促进作用不断上升;但过多且磺化度高(≥2.4 mmol/g)的STA不利于进一步提高糖转化率。添加0.8 g/L的STA-2.4对酶水解的促进效果最明显,低纤维素酶用量(5 FPU/g-葡聚糖)下的葡聚糖转化率由60.6%提高到97.9%。(3)TA与STA对酶水解过程中纤维素酶吸附的影响。在酶水解过程中,大部分纤维素酶被底物快速吸附。TA的添加抑制了酶水解液中的可溶性游离蛋白含量;而STA的加入则提高了游离蛋白含量,纤维素酶在底物上非生产性吸附显著减少。在24 h内,底物上吸附的纤维素酶蛋白与水解产物的酶蛋白已经接近平衡。添加0.8 g/L的STA-2.4水解96 h后,上清液中游离蛋白由0.0174 mg/m L增加到0.0734 mg/m L,即纤维素酶吸附在底物上的量由87%下降到44%。在一定的STA添加浓度(0～1.6 g/L)范围内,添加磺化度较低(<2.4 mmol/g)的STA,游离蛋白含量几乎呈线性增加。而加入磺化程度较高的STA(≥2.4mmol/g),游离蛋白含量先上升后下降。根据酶水解葡聚糖含量与游离蛋白含量的关系,添加STA后,葡聚糖产量随着游离蛋白含量的增加而增加。高磺化度的STA能够结合更多的纤维素酶,不过在高浓度下可能聚集沉淀。与添加STA-2.4相比,添加STA-3.0的酶水解体系中单位游离蛋白的糖转化效率较低,很可能因为STA-3.0携带更多负电荷所形成的STA-Cel聚集体与纤维素之间的结合相对不稳定。综合来看,磺化度较高的STA能更有效地抑制纤维素酶对底物木质素的非生产性吸附,从而显著促进底物酶水解。荧光光谱可用来研究化学分子和酶蛋白之间的结合机制,因其反映了猝灭常数、结合常数等信息;荧光发射光谱说明TA、STA与纤维素酶之间确实存在相互作用,且它们二者对纤维素酶的荧光猝灭机制为静态猝灭作用。(4)pH对添加STA的酶水解体系的酶水解及酶吸附的Mesoporous nanobioglass影响。对于不添加STA和添加STA-0.9,STA-2.4的酶水解体系,随着缓冲液p H由4.4上升到4.8,酶水解糖转化率先不断增加;当p H值超过4.8时,酶水解糖转化率略有下降。p H对酶水解的影响作用与p H影响纤维素酶电负性、底物电负性、底物木质素亲水性以及纤维素酶活性有关。与酶水解糖转化率规律一致,缓冲液p H升高,上清液中游离蛋白含量略微上升,随着缓冲液p H继续提高,上清液游离蛋白含量略下降。在不同p H的缓冲液中,酶水解液中游离蛋白含量变化不明显。p H=4.8为对酶水解糖转化率最有利的酶水解pH值。

目的：研究乳酸脱氢酶联合同型半胱氨酸在巨幼细胞贫血诊断中的应用效果。方法：选取2018年9月至2022年7月我院收治的41例巨幼细胞贫血患者及41例骨髓增生异常综合征患者为研究对象，共82例。所有患者均经治疗确诊。为所有患者进行生化实验室检测。收集并分析两组患者的生化检测指标、检测准确度、灵敏度、特异度等数据。结果selleck NMR：巨幼细胞贫血组患者总胆红素（TBiL）、间接胆红素（IBiL）、直接胆红素（DBiL）、乳酸脱氢酶（LDH）、同型neonatal infection半胱氨酸（Hcy）等指标均高于骨髓增生异常综合征组患者，血小板（PLT）、血红蛋白（Hb）水平低于骨髓增生异常综合征组患者（P<0.05）；单项指标检测的准确度、特异度、灵敏度与确诊结果相比，差异存在统计学意义（P<0.05）；多项指标联合检测的准确度、特异度、灵敏度与确诊结果相比，差异不存在统计学意义（P>0.05）。结论：在对巨幼细胞贫血进行诊断时，选择LDHDNA Damage/DNA Repair抑制剂、Hcy等指标进行检测能够进一步提高诊断的准确度，与骨髓增生异常综合征进行有效鉴别，建议在实际的诊断中应用。

目的：探究岩藻黄素对高脂饮食诱导的C57BL/6小鼠非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)的修复作用及其机制Lab Automation。方法：将52只C57BL/6小鼠随机分成4组，正常组14只，其余为实验组，实验组给予8周的高脂饮食喂养之后，再分为模型组、岩藻黄素低剂量和高剂量组，给予岩藻黄素6周，每日一次。每周记录小鼠的体重，第14周结束时小鼠禁食12小时后全部处死。后续分别测定各组小鼠血清中谷草转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）活力、总胆固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL-C）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL-C）、游离脂肪酸（free fatty acid， FFA）浓度、脂联素和瘦素含量；检测肝脏组织匀浆液中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽（glutathione，GSH-Px）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、过氧化氢酶（catalase，CAT）、白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-6（Interleukin 6， IL-6）和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）含量；镜下观察肝脏的组织病理学变化并采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏中AMPK、Nrf2和TLR4信号通路蛋白表达情况。结果：与模型组相比，岩藻黄素组中的TC、TG、LDL-C、ALT、AST显著降低（P < 0.05），HDL-C显著升高（P < 0.05），且降低了瘦素水平，增加了脂联素分泌。岩藻黄素组中的GSH、SOD、CAT升高（P < 0.05），MDA降低（P < 0.05），且降低了炎症因子的水平。苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，H&E）染色、油红O染色、糖原染色（Periodic Acid-Schiff stain，PAS）和透射电镜结果显示岩藻黄素组肝脏组织学结构好转，趋近于正常组。WB结果显示岩藻黄素治疗后AMPK信号通路中p-AMPK和PPARα的蛋白表达水平显著上升，PD0325901配制SREBP-1c表达下降，上调p-ACC、CPT-1蛋白和抑制FAS蛋白的表达；抑制Keap-1/Nrf2信号通路中Keap-1的水平，提高Nrf2及其下游抗氧化蛋白HO-1、NQO1和GCLM的表达水平；下调TLR4信号通路中TLR4蛋白的表达，抑制MyD88、p-IκBα和p-NF-κB (p65)蛋白的表达。结论：岩藻黄素可通过调节脂质代谢、减少氧CP-690550化应激和调节炎症等途径修复高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝。

背景:乳腺癌目前已成为全世界女性发病率最高的恶性肿瘤。根据雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER2)和增殖标记蛋白Ki-67的表达情况划分,乳腺癌有luminal A型、luminal B型、HER2阳性和三阴性乳腺癌(TNBC)四种类型。其中,HER2阳性乳腺癌恶性程度较高,侵袭性较强,早期容易转移。尽管,靶向药物的出现极大地改善了HER2阳性乳腺癌患者的生存现状和预后,但是治疗后耐药性的出现使得乳腺癌复发及转移机率仍然很高,严重影响治疗效果。因此,探索新的靶点和治疗策略依然非常重要。MYCN是一种与乳腺癌细胞干性、EMT、存活和休眠表型增加相关的转录因子,MYCN的异常表达与乳腺癌不良预后和较差的临床结果有关。已有研究报道,乳腺癌患者血液中的循环乳腺肿瘤细胞簇中存在MYCN转录本,并与肿瘤起始转移细胞的干细胞程序相关。在相当一部分原发性和复发性TNBC中,MYCN异质性表达,并且在新辅助化疗后更高比例的TNBC中没有表现出病理完全应答。然而,这些研究大都集中在TNBC中,在HER2阳性乳腺癌中,关于的MYCN研究甚少。槐耳是中国的传统中草药,已有上千年的历史,其具有重要的药用价值,对消CCRG 81045使用方法化、呼吸、血液等系统的多种肿瘤具有良好的治疗作用,被广泛应用于乳腺癌、肝癌、肺癌、胃癌等多种恶性肿瘤的辅助治疗。但是,槐耳对HER2阳性乳腺癌的治疗作用以及其具体的作用机制尚不明确。因此,我们欲探究槐耳清膏对MYCN异常表达的HER2阳性乳腺癌中的治疗作用及机制,以期为HER2阳性乳腺癌提供新的治疗方向。目的:明确槐耳清膏对不同的MYCN表达水平的HER2阳性乳腺癌细胞的治疗作用并探讨其作用机制。研究方法:1、Western Blot检测MYCN蛋白在HER2阳性乳腺癌病人组织标本和乳腺癌细胞系selleck、构建的MYCN过表达乳腺癌细胞系中的表达情况;检测浓度槐耳清膏浓度梯度下,凋亡相关蛋白的表达情况。2、RT-PCR检测MYCN在HER2阳性乳腺癌病人组织标本和构建的MYCN过表达乳腺癌细胞系中的m RNA表达情况。3、合成MYCN基因表达载体并通过慢病毒转染法构建MYCN过表达的HER2阳性乳腺癌细胞系。4、生物学功能试验:通过细胞计数法检测MYCN对HER2阳性乳腺癌细胞增殖能力的影响;通过克隆形成实验检测MYCN对HER2阳性乳腺癌细胞克隆形成能力的影响;通过划痕实验检测MYCN对HER2阳性乳腺癌细胞迁移转移能力的影响。5、CCK8细胞活性试验:检测不同浓度槐耳清膏对不同MYCN表达水平的HER2阳性乳腺癌细胞的抑制作用,并验证这种抑制作用是否依赖于铁死亡通路。研究结果:1、HER2阳性乳腺癌患者中,MYCN差异性表达,有一部分患者表达水平高。2、MYCN高表达的SKBR3细胞增殖和克隆形成能力更强。3、槐耳清膏抑制SKBR3细胞的增殖能力,MYCN高表达的SKBR3细胞对槐耳清膏更敏感。4、槐耳清膏可以诱导SKBR3细胞发生凋亡,且MYCN高表达的细胞的凋亡程度更高。5、槐耳清膏可以诱导SKBR3细胞发生铁死亡,且MYCNmedical overuse高表达的细胞,铁死亡依赖性更强。研究结论:槐耳清膏对MYCN高表达SKBR3细胞增殖抑制作用更敏感,更容易诱导其发生凋亡和铁死亡。