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目的 利用iTRAQ标记的蛋白组学技术探讨骨肉瘤肺转移患儿血清中蛋白的表达。方法 纳入10例骨肉瘤患儿和10例骨肉瘤肺转移患儿作为研究对象，收集piezoelectric biomaterials所有研究对象血清5 ml,采用iTRAQ标记的蛋白组学技术分析2组血清中的差异表达蛋白，并对差异表达蛋白进行GO富集分析、KEGG通路富集及蛋白-蛋白互作分析。外科手术后获取2例骨肉瘤肺转移患儿及2例骨肉瘤患儿瘤体组织，采用Western blot验证2组患儿癌组织中CDK1、hnRNP A2/B1、ITGAV和SRSF10的蛋白表达水平。结果 与骨肉瘤患儿相比，骨肉瘤肺转移患儿血清中高表达的蛋白共477种，低表达的蛋白共235种。KEGG通路富集显示，ECM及受体的相互作用、黏着力及PI3K-Akt信号通路等可能是骨肉瘤肺转移的主要发病机制。骨肉瘤肺转移患儿血清中差异蛋白前10种为CDK1、CTNNB1、ITGB1、SNRPE、SNRPG、HNRNPH1、SNRPD3、HNRNPC、ITGAV和SRSF1。与骨肉瘤患儿的癌组织相比，骨肉瘤肺转移患儿癌组织中CDK1、hnRNP A2/B1、ITGAV和SRSF10蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 与骨肉瘤患儿相比，EPZ-6438配制骨肉瘤肺转移确认细节患儿血清中存在多种差异表达蛋白，采用iTRAQ标记的蛋白组学技术能很好地筛选出差异蛋白，为骨肉瘤发生肺转移的分子机制研究提供了潜在的血清学标志物。

目的 妊娠与系统性红斑狼疮(SLE)相互影响，但初发时的妊娠状态是否会影响SLE的疾病过程尚未明确。文章旨在对比妊娠前及产后初发SLE患者临床特征及预后情况。方法 回顾性分析纳入1999年1月-2009年12月486例SLE患者临床资料，并根据初次入院时孕产史分为无妊娠史更多的妊娠前初发SLE组(n=143)及有活产史的产后初发SLE组(n=343)。对比2组患者初次入院时的症状、实验室检查、系统受累及用药情况。随访至2014年12月，对比患者5年生存率及死因。结果 妊娠前初发组初次入院时的疾病活动指数较高(P=0.041),脱发、皮肤黏膜受累、贫血、补体C4降低发生率及抗Smith(Sm)抗体阳性率更高(P<0.05)。排除年龄因素后，妊娠前初发组贫血发生率仍较高(77.8%vs 53.2%,P=0.036)。妊娠前初发SLE患者羟氯喹、硫唑嘌呤、霉酚酸酯使用率较高，而环磷酰胺使用率较低(P<0.05)。两组患者5年生存率及死因差异无统计学意义(P>0.05)。结论 妊娠前初发SLE较产后初发SLE贫血发生率更高。其疾病活动度和部分症状发生率较高则Adavosertib临床试验可能与较低的发病年龄相关。两组患者初始治疗选择存在差Medical apps异，而预后无显著差异。

目的 探讨吸入七氟醚对低浓度顺铂预处理的人神经母细胞瘤（SH-SY5Y）细胞增殖活性的影响，并讨论相关机制。方法 建mixture toxicology立低浓度顺铂预处理细胞模型，噻唑蓝比色法检测不同浓度梯度七氟醚对SH-SY5Y细胞增殖活性的影响，利用Western blotting检测CaspZ-VAD-FMK供应商ase-3和LC3Ⅱ蛋白表达，利用钙成像技术分析细胞内钙离子浓度变化。结VX-765果 低浓度顺铂预处理后，0.6%七氟醚对SH-SY5Y细胞增殖活性未产生影响，但可诱导细胞LC3-Ⅱ表达增加，而1.7%七氟醚显著抑制SH-SY5Y细胞增殖活性（P<0.01），诱导LC3-Ⅱ和Caspase-3表达增加（P<0.01），并且增加胞内钙离子浓度（P<0.01）；当部分干扰IP_3R-1表达后，1.7%七氟醚诱发的LC3-Ⅱ和Caspase-3表达减少（P <0.05）。结论 1.7%七氟醚诱导低浓度顺铂预处理SH-SY5Y增殖活性的降低，可能与IP_3R-1介导胞内钙离子浓度变化致细胞凋亡增加以及自噬水平增强有关。

为建立一种快速、准确的梅迪-维斯纳病毒（MVV）抗体检测方法，本研究利用DNAStar生物学软件对MVV衣壳蛋白（CA）和MVV跨膜蛋白（TM）的抗原表位分析，利用重叠延伸PCR(SOE PCR)获得CA-TM融合基因，构建controlled infection表达质粒p Easy-E1-CA-TM，将其转化大肠杆菌BL21后诱导蛋白表达并纯化，经SDS-PAGE检测结果显示，得到重组CA-TM蛋白（rCA-TM）,r CA-TM以包selleck抑制剂涵体形式表达。以获得的rCA-TM作为包被抗原，采用BIBW2992分子式方阵法优化各反应条件，建立了MVV间接ELISA检测方法。利用该方法检测羊临床常见病原阳性血清，结果显示，除MVV阳性血清以外，口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、绵羊肺炎支原体等绵羊临床常见病原的阳性血清均为阴性，特异性较强，且该方法能识别感染MVV病畜体内产生的CA蛋白和TM蛋白抗体。将MVV阳性血清2倍倍比稀释（1:500～1:32 000）后，分别利用建立的MVV间接ELISA方法及商品化MVV抗体ELISA试剂盒检测，结果显示商品化MVV抗体ELISA试剂盒最低可检测出1:40 00倍稀释的阳性血清，而本研究建立的间接ELISA方法最低可检测出1:16 000倍稀释的阳性血清，敏感性较高。重复性试验结果显示，该方法批内、批间试验的变异系数分别为3.6%～6.9%、2.3%～8.5%，均小于10%，重复性较好。利用本实验建立的MVV间接ELISA方法和商品化MVV抗体ELISA试剂盒对69份绵羊临床样品检测，结果显示，本实验建立的ELISA方法检测出31份阳性样品，38份阴性样品；商品化MVV抗体ELISA检测试剂盒检出37份阳性样品，32份阴性样品。二者的阳性符合率为83.7%，阴性符合率为100%，总符合率为91.3%。本研究首次基于MVV rCA-TM建立了MVV间接ELISA检测方法，且该方法能够分别识别CA蛋白抗体和TM蛋白抗体，不仅减少了因为血清转换而导致血清抗体检测不准确的影响，还扩大了检测范围，为内蒙地区绵羊梅迪-维斯纳病的诊断及净化提供了检测手段。

目的 探讨互动达标理论应用于乳腺癌术后护理中的效果。方法 选择接受乳腺癌改良根治术治疗的93例女性患者，根据入院顺序将其分为对照组（n=47）和干预组（n=46）。对照组接受常规护理，干预组在对照组的基础上接受基于互动达标理论的护理干预，两组均在术后接受护理12周。比较两组护理前后的Piper疲乏调查量表（PFS）、乳腺癌患者生存质量评定量表（FACT-B）评分。结果 治疗前Navitoclax半抑制浓度两组PFS各项评分比较，差microbiome data异点击此处无统计学意义（P> 0.05），护理后干预组的PFS各项评分与对照组比较，差异有统计学意义（P <0.05）；治疗前两组FACT-B各项评分及总分比较，差异无统计学意义（P> 0.05），护理后干预组的FACT-B各项评分及总分与对照组比较，差异有统计学意义（P <0.05）。结论 互动达标理论应用于乳腺癌术后护理中可减轻患者的癌因性疲乏程度，提高生存质量。

目的 探究氯化两面针碱诱导小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC)细胞H1688和H446发生凋亡及其可能的作用机制。方法 MTT法检测氯化两面针碱或顺铂(cisplatin, DDP)对SCLC细胞活性的影响；采用倒置荧光显微镜和HE染色法观察氯化两面针碱或DDP处理后细胞形态变化；流式细胞术检测氯化两面针碱或DDP对细胞凋亡的影响；MTT法检测凋亡抑制剂Z-VAD-FMK对氯化两面针碱或DDP诱导细胞发生凋亡的影响；Western blot法检测氯化两面针碱或DDP处理后细胞中Bax、Bcl-2、caspase-3、PARP、p-PI3K及p-Akt蛋白的表达变化。结果 MTT结果显示，氯化两面针碱作用于细胞48 h后，细胞的活力明显降低；与DDP相比，氯化两面针碱能以LEE011研究购买更小的IC_(50)抑制SCLC细胞；倒置荧光显微镜与HE染色结果表明，与DDP相似，氯化两面针碱可诱导SCLC细胞发生凋亡的形态学变化；流式细胞术结果表明，与DDP相似，氯化两面针碱可诱导SCLC发生细胞凋亡；MTT实验结果表明，氯化两面针碱对SCLC细胞凋亡的抑制作用可被immune-checkpoint inhibitor凋亡抑制剂Z-VAD-FMK部分拮抗；Western blot结果显示，与DDP相似，氯化两面针碱可抑制PI3K及Akt的表达，升高Bax、抑制Bcl-2,促进caspase-3和PARP的裂解。结论 氯化两面针碱可通过抑制PI3K及Akt的激Tamoxifen使用方法活，来诱导SCLC细胞发生凋亡。

目的:研究自噬调控中的主要蛋白雷帕霉素靶蛋白(mTO)R)、蛋白激酶B(AKT)、Beclin 1在良、恶性多形性腺瘤中的表达及意义。方法:用免疫组织化学显色检测p-AKT和p-mTOR在腮腺癌在多形性腺瘤、良性多形性腺瘤和正常腮腺组织中的表达。免疫印迹检测p-AM-2282抑制剂AKT、p-mTOR、Beclin 1在各组织中的表达。结果:p-AKT在正常腮腺组enzyme-linked immunosorbent assay织、良性多形性腺瘤、癌在多形性腺瘤中的阳性表达分别为15%、40.5%、59.1%。p-mTOR在正常腮腺组织、良性多形性腺瘤、癌在多形性腺瘤中的阳性表达分别为20%、43.2%、65.7%。AKT、mTOR的表达在正常腮腺组织、良性多形性腺瘤、癌在多形性腺瘤中呈递增的趋势。Beclin 1在3种组织中呈递减趋势。结论:mTOR、AKT在大部分腮腺癌在多形性腺瘤组织中呈现过度表达而Beclin 1表达下降,这可能与腮腺癌在多形性腺瘤Erastin价格病因、病理机制相关。

目的 分析IA期乳腺癌患者中医证候分型特点及预后的相关影响因素。方法 选取IA期乳腺癌患者100例，分析其中医证候分型特点，并对其临床资料进行单因素分析，对其中差异有统计学意义的因素进行多因素Logistic回归分析。结果 IA期乳腺癌患者的中医证候分型中痰毒蕴结占比最大。IA期乳腺癌患者Gut dysbiosis5年随访期间共有2例死亡，有21例发生复发/转移。其中，IA期乳腺癌患者中组织学分级为Ⅲ级者5年PFS为56.76%,低于组织学分级Ⅰ级(100.00%)、Ⅱ级(92.16%)者；有淋巴脉管癌栓者5年PFS为61.22%,低于无淋巴脉管癌栓者(96.08%);Ki-67高表达者5年PFS为7获悉更多2.06%,低于Ki-67低表达者(93.75%);临床分期为T_(1mic)～T_(1a)期者5年PFS为100.00%,高于临床分期为T_(1b)期(75.00%)、T_(1c)期(7Tofacitinib分子量2.00%)者，差异均有统计学意义(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析结果显示，组织学分级为Ⅲ级、Ki-67高表达、临床分期为T1b、T1c期为影响IA期乳腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 IA期乳腺癌患者以痰毒蕴结型占比最高，且组织学分级、Ki-67表达水平、临床分期均会影响患者预后，临床可据其予以有效的中西医干预措施以改善患者预后。

以2-氨基-4-氯吡啶为起始原料，经过缩合、取代、环合、乌尔曼反应和水合肼还原硝基5步反应得到中间体4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-氧基)-3-甲基苯胺(Ⅷ)。2-氨基-5-硝基苯腈先与N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛（DMF-DMA）缩合，再与4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-氧基)-3-甲基苯胺环合得到N-[3-甲基-4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-氧基)苯基]-6-硝基-4-喹唑啉胺(ⅩⅦ)，再经硝基还原得到N~4-[3-甲基-4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡Compound C啶-7-氧基)苯基]-4,6-喹唑啉二胺(ⅩⅧ)。同时，采用二硫化碳和2-氨基-2-甲基-1-丙醇为原料，经两步反应制备4,5-二氢-4,4-二甲基-2-(甲硫基)唑三氟甲CL 318952临床试验磺酸盐，收率68.6%。最后，N~4-[3-甲基-4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-氧基)苯基]-4,6-喹唑啉二胺和4,5-Nonalcoholic steatohepatitis*二氢-4,4-二甲基-2-(甲硫基)唑三氟甲磺酸盐以三乙胺为碱进行缩合反应得到妥卡替尼，收率62.8%,HPLC纯度99.08%。采用~1HNMR、~(13)CNMR和HRMS对产物结构进行了表征。

偶氮染料和抗生素是两种典型的难降解新型污染物,其废水在环境中的大量排放和迁移对生态系统造成严重危害。相比于物理化学方法,微生物降解技术在有机物废水处理中显示出巨大的潜力,尤其是真菌介导的生物降解,由于其能够分泌多种非特异性的氧化酶,在难降解有机物的降解处理方面,相比于细菌降解更具有优势。真菌在降解偶氮染料过程中,不会累积形成有毒的中间产物苯胺,对抗生素进行降解时,不易引起抗性基因的传播。目前,关于偶氮染料和抗生素的真菌降解主要是丝状真菌的好氧降解。虽然丝状真菌能够分泌厌氧代谢相关的酶,并可能存在高效的厌氧降解能力,但极少有相关的研究证实,关于其厌氧降解机制的研究更是没有。本文筛选得到可以厌氧降解偶氮染料与抗生素的烟曲霉Aspergillus tabacinus LZ-M,发现其可以完全矿化两种有机物,说明其具有高效的降解能力。因此,在此基础上,本文以Aspergillus tabacinus LZ-M为研究对象,以酸性红73(AR73)和甲硝唑(MNZ)为模式污染物,分BLZ945体外析了LZ-M对这两种有机物的厌氧降解效果;利用代谢组学分析了其降解通路;结合基因组学、比较转录组学和蛋白组学揭示了其降解机理;并通过固定化生物强化技术探索了LZ-M菌在城市废水处理中的应用潜力。具体研究结果如下:(1)降解能力分析试验发现:LZ-M在好氧条件生长,厌氧条件下分解葡萄糖产生CO_2,并有效降解不同染料和抗生素。其对400 mg/L AR73、400 mg/L的甲基橙、200 mg/L的中性红和30 mg/L孔雀石绿的降解率分别为90.28%、86%、87%和63.23%;对5 mg/L MNZ、10 mg/L呋喃唑酮和10 mg/L 3,5-二硝基水杨酸的降解率分别为75.02%、87.17%和68.13%。结果表明,LZ-M的厌氧降解能力明显优于其在好氧培养时的降解能力。(2)在(1)的基础上,对AR73的代谢产物利用LC-MS进行代谢组学分析发现:AR73先水解成2-羟基萘和N-苯基亚硝酰胺,随后矿化成CO_2。在降解过程中,电子转移引起了碳氧化和氮还原,揭示了AR73通过自氧化还原过程进行完全矿化,首次揭示了偶氮染料的新的降解机制。碳平衡和电子平衡分析表明,AR73中有31.8%的碳可以通过LZ-M菌的厌氧作用矿化并转化为CO_2。(3)对AR73降解的比较转录组学分析显示:差异表达基因中,参与芳香族降解、糖酵解、细胞色素C和醌氧化还原酶相关基因表现出高的转录水平和显著上调,进一步说明AR73降解产生的芳香类化合物通过儿茶酚通路和糖酵解过程矿化产生CO_2。而关键的脱色酶,即将AR73分解成2-羟基萘和N-苯基亚硝酰胺的水解酶基因并没有被发现。同时,在上调基因中未知基因占比59.23%,说明了大量功能未知蛋白的存在。进一步对这些未知基因进行克隆,发现了具有显著的AR73脱色能力的新水解脱色蛋白Ord95,以NADH为电子供体。通过产物鉴定,该酶可将AR73裂解为2-羟基萘和N-苯基亚硝酰胺,这与LZ-M的降解产物一致。说明Ord95为LZ-M进行AR73降解的关键脱色酶。通过SWISS-MODEL结构分析,该酶包含一个谷氧还蛋白结构域。通过点突变实验检确定38R、54R和55R是该结构域中的关键活性位点。(4)对MNZ的降解产物进行LC-MS分析表明:MNZ在降解中发生了-C-C-键断裂、-C-N-键断裂和羟基化,最后生成乙炔和尿素。对其菌胞内代谢物的代谢组学分析发现,氨基酸代谢通路中的代谢物显著上调,且其参与的转化反应与水解酶、转氨酶和氧化还原酶有关。(5)对MNZ降解的比较转录组学分析结果显示:在差异表达PD-0332991基因中,转氨酶、甲基转移酶、单加氧酶、-C-N-裂解酶和水解酶相关基因显著上调。这些酶可能是参与MNZ降解中断裂-C-C-、-C-N-和羟基化的关键酶。进行蛋白组学分析也发现这些酶在LZ-M中进行了高表达。说明LZ-M利用分泌的转氨酶、甲基转移酶、单加氧酶、-C-N-裂解酶和水解酶,通过-C-C-和-C-N-的断裂和羟基化对MNZ进行降解。(6)利用固定化生物强化技术,对LZ-M在MNZ废水厌氧处理中的进一步应用发现:将LZ-M菌通过海绵进行固定,然后添加到厌氧活性污泥系统中进行生物强化实验时,可以增加LZ-M菌在活性污泥系统中的存活率。同时,以海绵作为载体,LZ-M菌能与活性污泥在海绵孔隙中共存。经固定化生物强化后,系统能有效去除废水中的MNZ,对COD的去除率增加了7.12倍,产气量增加了6.14倍。此外,生物强化减轻了MNZ对活性污泥的毒性作用,促进了其代谢和生长,并保护了活性污泥的微生物群落免受MNZ的侵害。通过nim基因检测发现MNZ能够引起AD系统中抗性基因的增加,而Cross infection生物强化作用减少了该抗性基因的丰度。这些结果表明:在存在MNZ污染的情况下,利用固定化LZ-M的生物强化是保护厌氧活性污泥系统的有效方法。本研究从土壤中获得的曲霉真菌LZ-M可高效降解多种偶氮染料和抗生素类新型污染物,同时进行了关键降解酶与基因的挖掘。研究为偶氮染料和抗生素的真菌降解提供了新的微生物资源和研究思路;同时,对真菌在抗生素废水处理中的应用和对抗性基因的治理提供了新的方法。