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1目的:2022年11月流行病调查的研究数据显示,中国糖尿病患者人数超1.4亿,其中95%是2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者,居世界首位。糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是T2DM最严重的并发症之一,是导致慢性肾脏疾病发展的主要病因。DN早期肾小球的病理改变以肾小球基底膜的厚度增加、肾小球体积的代偿性肥大以及系膜基质扩张为主,随后出现肾小球硬化、肾小球滤过率下降等,临床可检测到蛋白尿。足细胞是保证滤过功能稳定的重要组成成员,足细胞受损与蛋白尿的发生直接相关。桦褐孔菌(Inonotus obliquus,chaga)是一种药用真菌,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、降血糖等多种药理作用。我们的前期工作表明,桦褐孔菌具有降低T2DM大鼠的血糖血脂、减少蛋白尿的药效作用。我们推测,桦褐孔菌对以上指标、尤其是蛋白尿的改善作用,与保护T2DM所致的足细胞损伤相关。环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,c GMP)是重要的第二信使,参与调节肾脏多种生理过程。肾脏损伤与c GMP降低直接相关,提高c GMP水平可以有效缓解肾脏损伤。c GMP水平的高低与一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性和磷酸二酯酶(phosphodiesterase,KD025 molecular weightPDE)活性密切相关,其中PDE5抑制剂,如己酮可可碱,目前已用于治疗DN患者,且具有可靠的临床疗效。基于桦褐孔菌改善T2DM大鼠血糖血脂、减少蛋白尿的前期工作基础,本研究将进一步探讨桦褐孔菌经NOS-c GMP-PDE5信号通路改善T2DM大鼠足细胞损伤、减少蛋白尿的作用机制。其中对NOS三个亚型的研究,即内皮型(e NOS)、诱导型(i NOS)、神经型(n NOS),将使我们进一步了解不同亚型可能对c GMP水平发挥不同作用的特点。2方法:2.1 T2DM模型大鼠的建立及实验分组5周龄的SD雄性大鼠为实验对象。喂养普通食物的大鼠为正常对照(normal control,NOR)组;模型组(DN)采用高脂肪饮食(high-fat diet,HFD)喂养持续8周后一次性腹腔注射链脲佐菌素35 mg/kg,一周内,连续测量3次随机血糖(RBG),其结果均>16.7 mmol/L判定为T2DM造模成功,模型组继续喂养HFD。药物组在HFD基础上,bone biology分别使用50和100 mg/kg(DN+Ⅰ和DN+Ⅱ)的桦褐孔菌进行干预8周,实验总计17周。2.2桦褐孔菌对T2DM大鼠糖脂代谢紊乱的影响动物饲养结束后,对所有大鼠进行生化指标测定,其中包括:体重,肾脏重量,随机血糖,总胆固醇,甘油三酯,空腹胰岛素,空腹血糖。2.3桦褐孔菌对T2DM大鼠肾脏功能的改善作用(1)通过生化分析仪和试剂盒检测血肌酐,尿肌酐,24h-尿蛋白,尿素氮。(2)将大鼠肾脏组织进行切片,采用过碘酸希夫染色,光镜下观察各组大鼠切片肾小球、系膜等的形态变化,利用K-Viewer软件测量肾小球直径,Image-Pro plus软件测量肾小球系膜区和毛细血管簇面积,根据公式计算系膜基质相对面积。2.4桦褐孔菌对T2DM大鼠足细胞损伤的改善作用(1)通过电镜观察各组大鼠足细胞的形态、肾小球基底膜的平均厚度和肾小球基底膜的长度及基底膜上裂隙孔的数,通过RADIUS图像分析软件测量得到,根据公式计算足突宽度。(2)分别通过反转录-聚合酶链反应和免疫印迹法观察足细胞标志物Nephrin、WT-1的m RNA和蛋白表达,判断足细胞的损伤情况。2.5桦褐孔菌调节T2DM大鼠的糖脂代谢紊乱及肾脏足细胞损伤的机制研究(1)采用Elisa试剂盒检测大鼠第8周、13周、17周的血清c GMP的水平。(2)采用Elisa试剂盒检测第17周大鼠肾组织中c GMP的水平。(3)采用PCR和WB法检测各组大鼠肾脏的一氧化氮合酶的三种亚型:内皮型(e NOS)、诱导型(i NOS)、神经型(n NOS),和PDE5 m RNA和蛋白的表达水平。3结果:3.1桦褐孔菌改善T2DM大鼠的糖脂代谢紊乱(1)在第8、13和17周,DN组的体重明显高于NOR组(P<0.01)。第17周用药组的体重明显比DN组的体重减轻(P<0.05)。DN组的肾脏重量和肾脏系数明显高于NOR组(P<0.01),与DN组相比,DN+I组和DN+II组的肾脏重量和肾脏系数明显降低(P<0.01)。(2)第17周DN组的空腹血糖明显高于第8周DN组(P<0.001),DN+I组和DN+II组在的空腹血糖水平明显低于DN组(P<0.001)。第8、13和17周DN组的总胆固醇和甘油三酯均显著高于NOR组(P<0.05)。与第8周相比,第13周和17周DN组的总胆固醇和甘油三酯水平都显著增加(P<0.01)。与DN组相比,DN+I组在第13周和第17周的总胆固醇和甘油三酯水平较低,但仅在甘油三酯水平上可以看到显著差异(P<0.05),DN+II组在第13、17周的总胆固醇和甘油三酯水平明显下降(P<0.05)。(3)在第8周,DN组、DN+I组和DN+II组的空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数均明显高于NOR组(P<0.05)。在第17周,DN组的空腹胰岛素与NOR组相比明显下降(P=0.002)。在第17周,与DN组相比,空腹胰岛素水平仅在DN+II组明显增加(P<0.05)。在第17周,DN组的胰岛素抵抗指数明显高于第8周的DN组和第17周的NOR组(P<0.001)。与DN组相比,DN+I组和DN+II组的胰岛素抵抗指数明显下降(P<0.01)。3.2桦褐孔菌改善T2DM大鼠的肾脏功能(1)第17周,DN组血肌酐、尿素氮和24h-尿蛋白的水平均显著高于NOR组和第13周的DN组(P<0.05)。DN组的尿肌酐水平和计算得到的肌酐清除率明显低于NOR组(P<0.001和P=0.015)。与DN组相购买Galunisertib比,DN+I组和DN+II组的血肌酐、尿素氮、24h-尿蛋白和尿肌酐都有明显改善(P<0.05),肌酐清除率水平仅在DN+II组有明显改善(P=0.005)。(2)与NOR组相比,DN组的肾小球直径和系膜基质相对面积明显增加(P<0.001)。与DN组相比,桦褐孔菌干预8周后,DN+I组和DN+II组的上述肾脏病理改变均有明显的降低(P<0.05)。3.3桦褐孔菌改善T2DM大鼠的足细胞损伤(1)与NOR组相比,DN组的肾小球基底膜厚度和足突宽度明显增加(P<0.001)。与DN组相比,两个桦褐孔菌治疗组对改善以上病理变化有明显效果(P<0.001)。(2)PCR和WB结果显示,与NOR组相比,DN组的Nephrin、WT-1 m RNA和蛋白水平显著降低(P<0.01),桦褐孔菌干预8周后,与DN组相比,DN+I组和DN+II组的Nephrin、WT-1表达水平均显著升高(P<0.01)。3.4桦褐孔菌升高T2DM大鼠的肾脏组织和血清中的c GMP水平Elisa结果显示,第13周和第17周,DN组的血清c GMP水平显著低于NOR组(P<0.01),DN组的肾组织c GMP也有下降趋势,但无统计学差异。与DN组相比,DN+I组和DN+II组在第13周和第17周的血清c GMP水平明显增加(P<0.001),肾组织c GMP水平仅在DN+II组显著增加(P<0.05)。3.5桦褐孔菌升高T2DM大鼠肾脏组织e NOS、n NOS,降低i NOS和PDE5 m RNA和蛋白水平(1)PCR结果显示,与NOR组相比,DN组的e NOS m RNA明显下降(P<0.01),i NOS和PDE5 m RNA水平明显增加(P<0.01),n NOS m RNA水平无统计学差异。(2)WB结果显示,与NOR组相比,DN组的e NOS和n NOS蛋白表达水平无统计学差异,i NOS和PDE5蛋白表达水平明显上升(P<0.01)。与DN组相比,DN+I组和DN+II组中e NOS和n NOS表达水平均显著增加(P<0.05),i NOS表达显著下降(P<0.05),PDE5的表达水平仅在DN+II组有统计学差异(P<0.05)。4结论:(1)桦褐孔菌可改善HFD/STZ诱导的T2DM大鼠的高血糖、高血脂及胰岛素抵抗。(2)桦褐孔菌可改善T2DM大鼠的蛋白尿、GBM增厚及足细胞的足突融合,并增加足细胞特异性标志物Nephrin、WT-1的表达。(3)桦褐孔菌可增加T2DM大鼠血液及肾脏组织中的c GMP水平,并且这个作用与增加e NOS、n NOS,降低i NOS、PDE5表达相关。综上,我们认为,桦褐孔菌通可通过改善T2DM大鼠的糖脂代谢紊乱、增加c GMP水平,发挥保护T2DM大鼠的肾脏足细胞,从而降低蛋白尿的作用。

探Viral infection究见血清不同部位提取物对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导BV-2小胶质细胞神经炎症反应的作用及潜在机制。见血清药材粉碎Decitabine试剂，提取浓缩得醇提物，经萃取得石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水相萃取物，进一步利用D101大孔树脂柱色谱对乙酸乙酯萃取物进行分离得馏分①～⑥。实验分为对照组、模型组、见血清提取物单独处理组及LPS联合见血清提取物干预组。采用LPS诱导BV-2建立神经炎症细胞模型，Griess法检测细胞上清中一氧化氮（nitric oxide，NO）生成；MTT法检测细胞活力；ELISA法检测细胞上清中白细胞介素（interleukin，IL）-6和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的释放；RT-QPCR检测促炎细胞因子诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）、环加氧酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）、IL-6、IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平；Western blot检测iNOS、COX-2、核转录因子-κB p65（nuclear factor kappa-B p65，p65）、磷酸化-κB p65（p-p65）、细胞外调节蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）、c-jun N末端激酶（RepSox核磁c-jun N-terminal kinease，JNK）、磷酸化JNK（p-JNK）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen activated protein kinase，p38），磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38）蛋白表达；UHPLC-Q-Exactive Orbitrap技术结合文献比对解析活性部位化学成分。结果表明见血清不同部位提取物均可以显著降低LPS诱导BV-2中一氧化氮（nitric oxide，NO）的释放，其中乙酸乙酯萃取物抑制作用最显著且无细胞毒性，该部位馏分⑥还可以剂量依赖性降低iNOS、COX-2、IL-6、IL-1β和TNF-α的基因及蛋白表达水平，同时对LPS诱导BV-2中p-p65、p-ERK、p-p38和p-JNK蛋白表达具有显著抑制作用；质谱分析馏分⑥共鉴定到79种化合物，含12种已被证实具有抗炎活性的化合物。该研究通过体外实验证实了见血清提取物在治疗神经炎症方面具有显著效果，并揭示了其抗炎作用可能通过抑制NF-κB及MAPK信号通路实现。

L-精氨酸及其代谢产物NO、多胺、鸟氨酸、脯氨酸等在调节机体代谢、促进激素分泌、改善免疫功能、预防心血管疾病和内皮细胞功能紊乱、维持骨骼肌和大脑功能、修复损伤组织等多个方面发挥重要功能。由于其巨大的医药、食品价值,如何大规模生产L-精氨酸引起了国内外研究者广泛的关注。目前L-精氨酸的生产方式主要是微生物发酵法,该方法的关键在于选育一株产量高,稳定遗传的工程菌株。钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)是我国科研工作者从土壤中分离得到的,由于其不含内毒素、遗传背景清晰和培养成本低等特性,常作为底盘微生物用于构建精氨酸高产菌株。因此,本研究以C.crenatum为宿主菌株进行遗传改造,通过优化磷酸戊糖途径、TCA循环途径和NAD激酶基因的表达,以增强辅因子NADPH的供应,解除碳氮全局转录因子对碳氮源吸收途径的限制以及提高前体谷氨酸的供应等方法,构建一株L-精氨酸高产的C.crenatum工程菌株。(1)根据基因同源重组原理对C.crenatum进行定向代谢改造,采用向编码6Media degenerative changes-磷酸葡萄糖异构酶pgi的基因末端添加降解标签,替selleckchem换磷酸戊糖途径的首个基因zwf的RBS结合位点,向tkt操纵子插入强启动子P_(tac)MK-1775 IC50以及叠加组合改造等策略,调控了磷酸戊糖途径的碳通量,促进辅因子NADPH的再生,并探讨对精氨酸合成的影响。与出发菌株相比,发酵效果最佳的是tkt操纵子优化菌株CCM04,经120 h摇瓶发酵后的精氨酸产量达到了17.00 g/L,提高了10.9%。(2)为进一步强化L-精氨酸合成所需的辅因子NADPH供应,利用启动子工程分别在编码异柠檬酸脱氢酶icd基因上游插入P_(eftu)和NAD激酶ppnk基因上游插入P_(sod),提高其表达水平,其中ppnk过表达的工程菌CCM07经120 h发酵后,积累的精氨酸达到18.38 g/L,较对照菌株提高了11.6%。(3)为了有效提高发酵培养基中碳、氮源的吸收转化效率,强化精氨酸合成的代谢通量,分别对ramA、ramB以及amtR等一系列全局转录调控因子进行敲除。其中敲除ramB的菌株CCM09和敲除amtR的菌株CCM10的精氨酸产量分别达到了17.66 g/L和17.98 g/L。这表明通过解除全局调控因子的抑制作用,有助于减少不必要的前体物质生成,积累共同的中间产物,推动碳氮源进一步流向L-精氨酸的合成。(4)为提高前体谷氨酸的供应,对编码磷酸化酶pknG和pknB基因进行敲除,以解除OdhI对ODHC的活化作用,使α-酮戊二酸的代谢通量向L-精氨酸合成途径转移。结果发现,pknG敲除菌株CCM11摇瓶发酵产量为20.25 g/L,有效优化了胞内谷氨酸的供应,强化了L-精氨酸的合成。最后,将组合优化的重组菌株CCM13进行摇瓶发酵,其精氨酸产量较初始菌株CCM01提高了50.35%,有效优化了菌株的发酵性能,为工业化精氨酸的生产提供参考依据。

包装袋是广泛应用于人们日常生活的工业产品,较多类型的包装袋需要具有抗菌功能,以满足食品、药材等物品的特殊包装要求。然而现有技术中,塑料薄膜要么添加有一些有毒的有机抗菌剂,要么采用成本较高的抗菌材料来制取包装袋,要么就是力学性能较差,因此,我公司研发了抗菌食品包装薄膜,以低密度聚乙烯、高密度聚乙烯、马来酸酐接枝聚乙烯和热塑性sandwich type immunosensor聚氨酯弹性体等为主要原料,添加碳酸钙、复合抗菌剂等助剂制得,并通过添加氧化锌/壳聚糖复合抗菌剂,提高了产品的抗菌性能及其抗菌持久性。主要技术创新点：1、原料配方创新,采用低密度聚乙烯、高密度聚乙烯、马来酸酐接枝聚乙烯和热塑性聚氨酯弹性橡胶四者为主体材料共混形成薄膜,并添加碳酸钙和复合抗菌剂,使抗菌效力更加持久。复合抗菌剂为氧化锌和壳聚糖二者复合得到。2、制备工艺创新,按质量份将低密度聚乙烯10份、高密度聚乙烯45份、马来酸酐接枝聚乙烯8份、热塑性聚氨酯弹性橡胶18份、碳酸钙3份以及复合抗菌剂12份共同投入流延机的加料段,经过一般的流延膜加工过程,通过熔融挤出、流延成型、Lorlatinib作用裁切加工后,得到抗菌包装袋用薄膜。其中熔融挤出段温度控制在200℃。3、安全型储运装置创新,设计开发了复合材料的安全型储运装置包括加固底座、减震弹簧、装置主体、滑动轨道、储物抽屉、伸缩杆、连接块、防滑垫和旋转杆等组件,通过设置伸缩杆,可将连接块伸缩至合适位置,通过两个连接块将物品牢牢的固定住,避免在储运的途中因为颠簸对物品造成损坏,提高该装置的安全性;通过设置滑动轨道,可将储物抽屉滑动至合适位置,方便工作人员的使用,提高了该装置的实用性。抗菌食品包装薄膜研发项目于2021年6月开始正式研发,并于2021CL 318952试剂年11月完成样品认可,于2021年1月进行小批量试生产,于2022年2月进入批量生产,该项目的成功开发与应用,对国内包装行业的发展产生非常积极的影响,不仅大大提高了包装企业的包装效率和质量,提升其市场竞争能力,而且进一步促进国内包装印刷技术飞跃式的发展,同时也带动了该项目产品上下游的发展,因此,研究与开发该项目具有十分重要的意义。

目的 探讨人参皂苷Rg1(GRg1)调节核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应原件（ARE）信号通路对大鼠妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）的作用。方法 将雌性孕SD大鼠随机分为正常组（Normal组）、ICP模型组（Model组）、低剂量GRg1组（GRg1-L组，20 mg/kg GRg1）、高剂量GRg1组（GRg1-H组，40 mg/kg GRg1）、高剂量GRg1+Nrf2抑制剂全反式维甲酸（ATRA）组（GRg1-H+ATRA组，40 mg/kg GRg1+10 mg/kg ATRA），每组12只。采用苯甲DNA Purification酸雌二醇、黄体酮联合注射的方式建立大鼠ICP模型。给药结束后ELISA法检测大鼠血清SB431542 MW总胆红素（TBIL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）和总胆汁酸（TBA）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素（IFN-γ）和白细胞介素-1β(IL-1β)及肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平。HE染色观察大鼠肝切片的病理学变化。免疫印迹法检测大鼠肝组织Nrf2/ARE信号通路相关蛋白的表达。结果 与Normal组相比，Model组大鼠血清ALT、AST、TBIL、ALP、TBA水平均显著升高（P<0.05）,Normal组炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β和肝组织MDA水平[分别为（248.26±27.64selleckchem AG-221）pg/mL、（153.68±18.47）pg/mL、（189.53±23.21）pg/mL和（2.89±0.36）nmol/mg]均较Model组大鼠[分别为（53.47±8.69）pg/mL]、（24.72±2.94）pg/mL、（46.89±6.82）pg/mL和（1.05±0.14）nmol/mg]显著升高（P<0.05）,Normal组肝组织SOD水平和Nrf2、ARE蛋白表达水平[分别为（53.18±8.77）U/mg、0.34±0.03、0.40±0.04]均较Model组大鼠[分别为（128.95±16.34）U/mg、0.87±0.09、0.94±0.09]显著降低（P<0.05）；与Model组相比，GRg1-L组、GRg1-H组大鼠相关指标变化与上述相反（P<0.05）。Nrf2抑制剂减轻了GRg1对ICP大鼠的治疗作用。结论 GRg1可能通过激活Nrf2/ARE信号通路对大鼠ICP具有一定的治疗作用。

目的:本研究考察小檗碱(berberine,BBR)与神经退行性疾病相关重复序列非标准二级结构间的相互作用,并通过体外转录过程探究小檗碱对Hepatoprotective activities重复序列基因表达的调控作用,从基因层面解释小檗碱改善重复序列扩增相关神经退行性疾病的机制。同时由于小檗碱溶解度低、渗透性差,将其设计成新型制剂改善药物的生物利用度。该研究将为中药活性成分在神经退行性疾病中的机理研究提供新思路,为中药活性成分的多靶点治疗及靶向制剂研究提供新的方向。方法:(1)圆二色谱测定3组与神经退行性疾病相关重复序列的二级结构,并考察小檗碱对于重复序列的影响。(2)荧光光谱实验考察在不同离子和不同浓度小檗碱的条件下小檗碱与重复序列之间的相互作用。(3)凝胶电泳实验表征小檗碱对不同结构的影响。(4)通过加入不同的拥挤试剂改变溶液环境,利用荧光熔融曲线变化考察小檗碱与重复序列作用中起关键作用的环境因素。(5)设计转录模板序列,通过体外转录实验考察小檗碱对于致病性重复序列基因表达的调控作用;通过荧光、凝胶电泳等手段,考察小檗碱对于模板中重复序列二级结构的影响及对转录过程的调控作用。(6)通过溶剂挥发法制备小檗碱固体分散体,通过溶出度的测定来筛选制剂的最佳制备工艺,并对固体分散体进行物相表征。结果:(1)圆二色谱确定3组与神经退行性疾病相关的重复序列产生的G-四链体结构,i-motif以及发夹结构,并且小檗碱不改变序列的构型。(2)荧光检测结果表明,小檗碱与重复序列存在相互作用,其中小檗碱与可以形成G-四链体结构的G_4C_2序列作用最明显,且BBR浓度达到20μM时趋于饱和,荧光强度受离子种类和离子浓度的影响。(3)凝胶电泳实验证明小檗碱可以有效调控重复序列所产生的G-四链体,而对i-motif结构和发夹结构的调控作用不明显。(4)通过加入不同拥挤试剂改变溶液环境,根据T_m值RepSox变化考察环境对小檗碱与重复序列相互作用的影响,结果发现溶液粘度是小檗碱和G_4C_2序列相互作用的重要影响因素;(5)转录结果表明小檗碱的加入对模板中重复序列扩增产生的二级结构存在调控作用,药物的加入降低整体转录效率,减少了重复序列扩增产生的有毒RNA产生,从机理层面解释了小檗碱对神经退行selleck激酶抑制剂性疾病的改善作用。(6)通过溶剂挥发法制备小檗碱二元固体分散体,并优化其制备工艺,得到的最佳制备工艺为小檗碱与载体的比例为1:7,其中载体PEG6000与PVPK-30的比例为2:1。观察剂型与单体水溶性并进行物相表征,考察药物分散于载体中形成固体分散体,明显改善了溶解度。结论:(1)通过定性、定量的分析结果确定小檗碱与神经退行性疾病相关重复序列之间存在相互作用,其中小檗碱对G_4C_2的稳定作用最明显,溶液粘度是小檗碱和重复序列G_4C_2相互作用的关键影响因素。(2)小檗碱能够调控重复序列基因表达,减少了重复序列扩增产生的有毒RNA。(3)BBR制备为固体分散体后,药物溶解度相比于单体明显增加,扩大了小檗碱的应用范围。

目的:通过对赵纪生教授治疗慢性肾脏病3-5期(非透析)患者的临床有效病案进行分析及数据挖掘,探讨和总结赵纪生教授治疗慢性肾脏病3-5期(非透析)遣方用药规律和临证经验,以传承名老中医经验并指导临床。方法:收集2020年2月至2022年11月赵纪生教授诊治的慢性肾脏病3-5期(非透析)患者的门诊病案,将其整理于Excel表中,使用Microsoft Word 2selleckchem AZD1152-HQPA019、IBM SPSS Statistics 25.0和IBM SPSS Modeler18.0等,对所有满足入选条件的患者进行频数统计、关联规则和聚类分析,并对结果进行归纳和总结。结果:1.本次研究中,3b期患者最多,占比46.08%;5期患者占比仅为2%,且较快转入透析治疗。61岁-80岁年龄组占大多数,比例为37%。原发疾病以慢性肾小球肾炎居多,其次是糖尿病肾病、高血压性肾损害、IGA肾病。2.纳入的102例病案中,共有199味中药,涉及325条中药处方。使用频数多于20的药物有42味,前十味药物依次为大黄(92.00%)、山茱萸(84.31%)、黄芪(83.38%)、白花蛇舌草(74.77%)、川芎(72.92%)、淫羊藿(55.69%)、薏苡仁(52.31%)、土茯苓(46.46%)、茯苓(35.08%)、徐长卿(28.92%)。3.药类上以补虚药(24.04%)、清热药(19.29%)、利水渗SMRT PacBio湿药(11.06%)的使用频数最高。4.药性上以温性(49.60%)、寒性(34.55%)、平性(15.85%)为主。中药五味中以甘(32.67%)、苦(27.40%)、辛(19.34%)为主。药物归经以肝(20.25%)、脾(14.60%)、胃(13.92%)、肺(12.89%)、肾(11.05%)经为主。5.主要药对有车前子、萆薢,法半夏、黄连,柴胡、白芍,车前子、连翘,陈皮、法半夏,桂枝、车前子,地黄、仙鹤草,穿山龙、忍冬藤。6.聚类处方为:第一组:车前子、萆薢、连翘、桂枝、山香圆叶、川芎;第二组:补骨脂、红景天、熟地黄、土茯苓、蒲公英、煅牡蛎、大黄、巴戟天;第三组:柴胡、白芍、茯苓、麦冬、法半夏、黄连、陈皮、枳壳、党参、白术、天山雪莲;第四组:灯盏花、仙茅;第五组:四季青、玄参、山茱萸、薏苡仁、白花蛇舌草、鬼箭羽、淫羊藿、地黄、仙鹤草、穿山龙、忍冬藤、徐长卿、青风藤、黄芪、鸟不宿。7.二阶关联规则有:白花蛇舌草、薏苡仁;白花蛇舌草、徐长卿;山茱萸、徐长卿;川芎、桂枝;白花蛇舌草、补骨脂;白花蛇舌草、穿山龙;黄芪、穿山龙;白花蛇舌草、鬼箭羽;川芎、鬼箭羽。三阶关联规则有:白花蛇舌草、薏苡仁、山茱萸;白花蛇舌草、薏苡仁、大黄;白花蛇舌草、薏苡仁、黄芪;白花蛇舌草、薏苡仁、川芎;白花蛇舌草、薏苡仁、淫羊藿;白花蛇舌草、徐长卿、山茱萸;白花蛇舌草、土茯苓、淫羊藿;白花蛇舌草、徐长卿、黄芪;山茱萸、徐长卿、黄芪;白花蛇舌草、徐长卿、大黄;山茱萸、徐长卿、白花蛇舌草;白花蛇舌草、蒲公英、大黄;白花蛇舌草、蒲公英、黄芪;白花蛇舌草、补骨脂、大黄;川芎、桂枝、大黄;白花蛇舌草、穿山龙、黄芪;白花蛇舌草、穿山龙、山茱萸。结论:赵纪生教授认为慢性肾脏病3-5期(非透析)中医病机特点为本虚标实、虚实夹杂,源头在于肾虚;本虚主要责之于脾肾,标实多以风、湿、瘀、浊多种病因相兼为患。临床用药寒温并行、通调脏腑;治肾不忘匡扶脾胃;善用风药治疗慢性肾小球肾炎引起的慢性肾脏病。用药规律上,分清主客缓急,辨清病性虚实,把握“以补为基、泻中寓补、消补同施”的治疗原则,对疾https://www.selleck.cn/products/ch-223191.html病进行辨证论治;治法以益肾健脾为主,以活血化瘀、利水渗湿、祛风通络、泄浊排毒为要。

背景：血管新生是心血管疾病的主要干预靶点，骨形态发生蛋白2具有调控血管新生作用，但内皮细胞特异性骨形态发生蛋白2对血管新生的调控selleck LEE011作用不清楚。目的：探讨内皮细胞特异性骨形态发生蛋白2对血管新生的影响。方法：(1)生物信息学分析：通过PanglaoDB公共基因表达数据库单细胞转录组荟萃分析观察骨形态发生蛋白2细胞群表达丰度和定位。血管新生小鼠和内皮(心内膜)过表达骨形态发生蛋白2小鼠转录组测序数据集探索内皮细胞骨形态发生蛋白2对血管新生信号通路的调控作用。(2)体内实验验证：建立小鼠后肢缺血模型，对比模型小鼠患侧与健侧缺血后肢7,14和21 d血流灌注情况，免疫荧光和免疫组织化学染色评估小鼠骨形态发生蛋白2和CD31的表达定位情况。(3)体外实验验证：体外培养人脐静脉内皮细胞，分为对照组、缺氧组和骨形态发生蛋白2抑制剂(Noggin蛋白)干预组，培养24 h，观察各组内皮细胞血管新生情况。结果与结论：(1)内皮细胞是表达骨形态发生蛋白2的重要细胞亚群，在血管新生内皮细胞和骨形态发生蛋白2过表达内皮细胞转录组再分析均发现骨形态发生蛋白2表达明显升高，血管新生通路明显激活。(2)缺血7 d小鼠新生血管周围骨形态发生蛋白2阳性血管明显增加获悉更多(P <0.05)，缺血2周骨形态发生蛋白2阳性血管明显减少(P <0.001)。(3)体外培养人脐静脉内皮细胞，缺氧干预后，内皮细胞迁移能力和血管出芽明显增加，血管新生因子血管内皮生长因子和血小板衍生生长因子的表达明显升高，Noggin明显减少了Immunisation coverage缺氧诱导的内皮细胞血管新生(P <0.001)，并下调血管内皮生长因子和血小板衍生生长因子的表达(P <0.01)。(4)结果证实，内皮细胞特异性骨形态发生蛋白2具有调控血管新生作用，靶向性内皮细胞骨形态发生蛋白2可望改善血管新生。

目的 分析血清胱抑素C(cystatin C, Cys C)、视黄醇结合蛋白（retinol binding protein, RBP）与β2-微球蛋白（beta-2-microglobulin, β2-MG）在早期2型糖尿病肾病（diabetic nephropathy, DN）检验中的应用价值。方法 回顾性分析2020年1月—2022年1月期间联勤保障部队第970医院威海医疗区收治的72例早期2型DN患者的临床资料，将其作为研究组；回顾性分析同期本院收治的78例单纯2型糖尿病患者的临床资料，将其作为对照组。两组患者均接受Cys C、RBP、β2-MG及尿微量白蛋白（microalbuminCCRG 81045供应商uria, m Alb）检验。比较两组患者的Cys C、RBP、β2-MG及m Alb水平，比较Cys C、RBP、β2-MG单独检验与联合检验2型DN的敏感度、特异度，并分析Cys C、RBP、β2-MG与早期2型DN患者m Alb的相关性。结果 研究组Cys C(1.26±0.12)mg/L、RBP(88.38±12.16)mg/L、β2-MG(3.85±0.50)mg/L、m AlbAG-221化学结构(90.56±8.60)mg/24h均高于对照组的（0.35±0.10）mg/L、（50.50±10.Gel Doc Systems08）mg/L、（1.60±0.40）mg/L、（25.02±2.02）mg/24 h，差异有统计学意义（t=50.041,20.831,30.543,65.397,P<0.05）。Cys C、RBP、β2-MG联合检验2型DN的敏感度、特异度均高于单纯Cys C、RBP、β2-MG检验，差异有统计学意义（P<0.05）。Spearman相关性分析发现，早期2型DN患者Cys C、RBP、β2-MG水平与m Alb呈正相关性（r=0.685、0.558、0.608,P<0.05）。结论 Cys C、RBP、β2-MG在早期2型DN检验中具有临床应用意义，且联合检验的敏感度与特异度更高，为临床诊疗提供了重要的参考依据。

目的 基于线粒体乙酰化酶3(mitochondrial acetylase 3,Sirt3)-缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1-alpha, HIF1α)通路探讨毓麟珠改善自然衰老大鼠卵巢氧化应激的作用机制。方法 12只雌性SD老年大鼠，随机分为衰老未灌胃组与衰老灌胃组，每组6只，6只雌性正常育龄期SD大鼠作为Temple medicine空白对照组，衰老灌胃组予毓麟珠中剂量10.08 g/kg,衰老未灌胃组予等量生理盐水，空白对照组正常饲养，连续灌胃6周(休1天/周)。酶联免疫法测定大鼠血清激素雌二醇(estradiol, E_2)、促卵泡激素(follicle-stimulating hormone, FSH)、抗苗勒Dolutegravir溶解度管激素(anti-mullerian hormone, AMH)水平；苏木精-伊红(hematoxylin eosin stain, HE)染色观察卵巢形态学变化；化学发光法测定卵巢组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase, GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量；化学发光法测定卵母细胞线粒体ATP含量；蛋白免疫印记法检测卵巢组织Sirt3、HIF1α蛋白表达；实时荧光定量PCR检测卵巢组织Sirt3、HIF1α mRNA表达。结果 与衰老未灌胃组相比较，衰老灌胃组卵泡发育改善，表现为颗粒细胞层排列整齐、卵母细胞形态较规则；E_2、AMH水平升高，FSBE-β-CD配制SH水平降低(P<0.01);卵巢组织中SOD、GSH水平升高，MDA水平降低(P<0.01);ATP水平升高(P<0.05);Sirt3蛋白及基因表达均上调，HIF1α蛋白及基因表达均下调(P<0.05)。结论 毓麟珠通过调控Sirt3、HIF1α的蛋白及基因表达，改善卵巢组织抗氧化能力进而达到延缓卵巢衰老的目的。