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目的 基于自噬/ROS/NLRP3炎症小体信号通路，探讨刺槐素(Acacetin)对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)损伤后的小胶质细胞保护作用机制。方法 培养小鼠小胶质细胞(BV2VX-661作用),分为正常对照组、OGD模型组和OGD+Acacetin组(10μmol)。缺氧6 h复氧24 h后采用4-甲基偶氮唑蓝(MTT)检测BV2细胞活性；乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞的死亡率；活性氧(ROS)试剂盒测定细胞内ROS水平；Western blot检测LC3-Ⅱ、LCBMS-907351体内实验剂量3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、beclin-1、NLRP3、caspase-1和IL-1β等蛋白的表达。结果 刺槐素能增加OGD/R损伤后小胶质细胞的存活率，减少LDH的释放，降低ROS的生Prebiotic amino acids成，增加LC3-Ⅱ和beclin-1蛋白的表达，进一步下调NLRP3、caspase-1和IL-1β的表达。结论 Acacetin能减轻OGD/R后小胶质细胞的损伤从而对脑缺血再灌注损伤发挥保护作用，其作用机制可能与抑制ROS的产生、激活自噬、抑制NLRP3炎症小体有关。

目的基于网络药理学探讨康艾注射液治疗乳腺癌的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和SwissTargetPrediction数据库获取康艾注射液中药活性成分及靶点,并利用UniProt数据库规范靶点基因名称;借助GeneCards、OMIM数据库筛选乳腺癌疾病靶点,通过STRING数据库及Cytoscape3.6.1软件构建蛋白相互作用网络。借助Metascape软件平台对交集Adezmapimod靶点进行GO功能与KEGG通路富集分析,并对有效活性成分及疾病靶点进行分子对接初步验证。结果共筛选出康艾注射液治疗乳腺癌的潜在活性成分21种,关键靶点5个,富集分析得到重要生物过程、细胞成分、分子功能各10项及20条相关通路。其中,康艾注射液主要通过参与膜筏、细胞外基质、转录因子复合体等生物反应,作用于肿瘤坏死因子、铂类药物耐药、MAPK、FOXO、JAK-STAT及雌激素信号通路等发挥抗癌作用。结论康艾注射液治疗乳腺癌的获悉更多关键活性成nonalcoholic steatohepatitis (NASH)分是氧化苦参碱、槲皮素、山柰酚,其作用机制主要与MAPK信号通路密切相关。

目的 观察冠心病(CHD)患者阿托伐他汀治疗后补体C3、补体C4及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平变化，分析影响患者预后不良的相关因素。方法 将100例CHD患者设为CHD组并随机分为阿托伐他汀组与对照组，另选取同期健康体检者100例为健康组。比较各组补体C3、补体C4、HDL-C、白细胞介素-6(IL-6)、CPre-operative antibiotics反应蛋白(CRP)水平，分析补体C3、补体C4、HDL-C诊断CHD的效能；采用多因素Logistic回归模型分析预后不良的影响因素。结果 CHD组补体C3、补体C4水平高于健康组，S63845 MWHDL-C水平低于健康组，差异均有统计学意义(P<0.05)寻找更多。补体C3、补体C4及HDL-C诊断CHD的敏感度均不低于80.00%,特异度均不低于75.00%,曲线下面积(AUC)均大于0.80。阿托伐他汀组总有效率为86.00%,高于对照组的68.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。阿托伐他汀组治疗后1个月(T_2)、治疗后2个月(T_3)的HDL-C高于对照组，IL-6、CRP低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。阿托伐他汀组预后不良发生率为20.00%(10/50),低于对照组的34.00%(17/50),差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示，阿托伐他汀组重度患者预后不良发生率更高，差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归模型分析显示，病情严重程度为重度是CHD患者阿托伐他汀治疗后预后不良的危险因素(P<0.001)。结论 CHD患者补体C3、补体C4水平异常升高，HDL-C水平异常降低；补体C3、补体C4及HDL-C在CHD诊断中均具有较高的敏感度、特异度；CHD患者应用阿托伐他汀治疗可提高疗效及HDL-C水平，降低炎性因子水平与预后不良的发生风险，而病情严重程度是CHD患者阿托伐他汀治疗后发生预后不良的独立影响因素。

为研究储藏温度、抑制剂种类及浓度对雪梨南酸枣复合果泥在储藏期褐变的影响，通过感官评价法确定复合果泥基础配方，设计单因素实验和正交试验，以褐变度、pH、总酚、Vc含量和色差为指标，分析储藏温度、不同种类和添加量的抑制剂对果泥色差的影Spine infection响。结果表明：雪梨南酸枣复合果Decitabine生产商泥基础配方为南酸枣泥∶雪梨泥∶苹果泥=4∶4∶2时，糖浆添加量为7%(白砂糖∶麦芽糖=2∶1)；4℃下储藏15d的果泥褐变度最低(2.57)，与常温储藏相比，下降了16.0%，总酚下降最少(7.88%)，pH受温度影响不显著(P>0.05)；在15℃下储藏15d，与未添加抑制剂相比，添加0.8%抗坏血酸的果泥褐变度(2.52)下降了14.1%，添加0.6%柠檬酸的果泥褐变度(2.67)下降了5.93%，抑制剂对pH和总酚的影响均不显著(P>0.05)。正交此网站实验得出最佳护色条件为：0.8%的抗坏血酸+0.4%的柠檬酸+4℃储藏。因此，储藏温度和抑制剂可以改善雪梨南酸枣复合果泥在储藏期的褐变。

环脂肽化合物是一类结构新颖的环状肽类,其两亲性的物化特性决定了其独特的生物活性,可作为抗生素、生物表面活性剂等。在生物防治、药物开发、环境修复和疾病治疗等方面广泛应用,具有迫切的市场需求和广阔的发展前景。环脂肽类天然产物主要由非核糖体肽合成途径合成,由于环脂肽合成复杂的代谢网络和medical humanities前体需求、专一且严格的合成途径、多种同系物的共存,制约着环脂肽合成的微生物开发和产品价值提升。本文主要介绍了来源于细菌界的环脂肽类物质的结构特性,非核糖体肽合成途径及AZD1152-HQPA体内非核糖体肽合成酶(non-ribosomal peptide synthetase,NRPS)的结构域特点,天然产物底盘菌株开发现状,通过基因工程、代谢工程方法进行同系物调控和生物合成策略,混菌对脂肽生物合成的影响,以及合成生物学在脂肽合成中的应用。随着合成生物技术的迅速发展和运用,环脂肽类天然产物的Tofacitinib微生物合成也有望实现”质”和”量”的提升,以及促进新型脂肽的开发。

循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)是由肿瘤组织脱落进入循环系统的肿瘤细胞,在肿瘤转移过程中扮演着重要的角色,是恶性肿瘤致死的主要根源。对患者血液中的CTCs的富集和分选在恶性肿瘤早期检测和预后监测方面都具有重要意义。目前,CTCs的分选主要分为基于物理性质的分选以及基于免疫亲和性的分选,它们各有优劣并可相互结合借鉴,成为综合性的分选方法。然而,在已有的各种液体活检方法中,在CTCs捕获纯度、大通量检测、实时监控/计数等方面还存在亟待解决的问题。基于此,本论文结合微流控芯片和免疫磁珠,引入上转换荧光和血管内支架捕获技术selleck PLX-4720,实现了高效率、高纯度的CTCs分选;在微流控芯片中实现了对CTCs的实时荧光计数和芯片内的灭活;在管状支架的设计中,实现了对CTCs的高速富集、高纯度捕获和原位灭活;在免疫磁珠中实现了对CTCs的高效分选、荧光计数和多色成像。具体结果如下:(1)针对捕获纯度的问题,提出了使用倒置结构微流控芯片结合多功能免疫磁珠的策略,通过磁场选择,减少其他血细胞与捕获表面的接触,提高了CTCs的捕获纯度;为了提高微流控芯片的捕获效率,设计了具有三维大孔仿生结构的捕获表面并修饰抗体,通过仿生特性与抗体特异性识别相结合,获得了高达95%的捕获效率;为了实时监控对CTCs的捕获过程,在微流控芯片中设计了单侧透明的微腔,并在与CTCs结合的免疫磁珠中集成了荧光分子;针对实时数量统计的问题,通过检测芯片捕获表面的稀土上转换荧光与免疫磁珠的荧光的比例,实现了在微流控芯片中对CTCs的实时荧光计数;针对上转换发光效率低的问题,设计了双层反蛋白石光子晶体(Inverse opal photonic crystal,IOPC)结构,通过光子晶体的带边效应,将捕获表面的上转换发光提高了32倍;在此基础上,在免疫磁珠中集成了光敏剂Ce6分子,与CTCs结合后在红光激发下引导光动力效应,在捕获表面上产生单线态氧,对捕获表面上捕获到的CTCs实现了原位灭活。(2)进一步开展了大流量样本中对CTCs检测的研究,设计了基于静电纺丝技术的无接缝管状纤维纺织物支架,其尺寸和内部螺纹结构均可调节,具有相对大的横截面积,最高以40 m L·h~(-1)的样品处理速度捕获CTCs,解决了CTCs富集策略中样本通量小的selleck问题;在捕获效率方面,设计了具有柔性纳米纤维结构的捕获表面并修饰抗体,通过仿生特性与抗体特异性相结合提升了捕获效率,在直径3 mm的螺纹管状支架中,单次富集得到了超过80%的捕获效率,并且实现对样本的循环处理,捕获效率高达98%;在提高对CTCs捕获纯度方面,设计了带有螺纹的支架内壁,通过其调控管内流体的流速分布,形成轴心和管壁处的压力差,增强了管内细胞的趋轴性,减少了其他细胞与捕获表面的接触概率,获得了超高的捕获纯度,达到98%;在这种管状支架的捕获体系中,用红光激发光动力效应,实现了对在大通量下捕获到的CTCs在支架内壁的原位灭活。(3)进一步设计了对CTCs特异性识别的免疫磁珠,在外源磁场下实现了对CTCs的固定和分选,并对CTCs的荧光计数和多色成像做出了探索;结合钙钛矿纳米晶(PerovskiteSARS-CoV2 virus infection nanocrystals,PNCs)作为荧光探针,在100-5000 CTCs·m L~(-1)的浓度区间下,免疫磁珠实现了对CTCs的荧光计数;使用聚甲基丙烯酸甲酯(Poly methyl methacrylate,PMMA)包覆PNCs和Fe_3O_4,不会对PNCs产生明显的猝灭,免疫磁珠可以良好的继承PNCs的荧光性能;并且通过包覆隔绝了PNCs与外界溶剂环境的接触,抑制了PNCs在水中的分解,保证了免疫磁珠荧光性质的稳定性;通过核壳结构设计,在增强免疫磁珠分散性和稳定性的同时,隔离了PNCs与CTCs的直接接触,解决了PNCs的生物毒性问题;PMMA的封装还抑制了不同卤素在晶格之间的交换,从而抑制了其导致的发光融合;免疫磁珠可以在同一体系中产生稳定的多色发射,在荧光显微镜下实现了多通道的多色成像。

目的 研究不同宫颈组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ULK1与Raptor、RictoD-Lin-MC3-DMA配制r蛋白表达水平，并探讨其意义。方法 选取宫颈癌组织95例、宫颈鳞状上皮高级别病变(HSIL)组织30例、宫颈鳞状上皮低级别病变(LSIL)组织30例和慢性宫颈炎组织30例。采用免疫组织化学方法检测各组宫颈组织中ULK1与Raptor、Rictor的表达情况，并分析该指标与宫颈癌临床病理参数的关系。结果 ULK1与Raptor、Rictor在不同宫颈组织中表达，差异有统计学意义(P<0.05)。ULPrebiotic amino acidsK1与Raptor、Rictor在宫颈癌组织中表达水平呈负相关(r=-0.640、-0.687,P<0.05)。ULK1、Raptor、Rictor表达与组织分化程度、FIGO分期、组织类型有关(P<0.05)。ULK1阴性表达患者的总生存率短于阳性表达患者，Raptor与Rictor阳性表达患者的总生存率短于阴性表达患者(P<0.05)。FIGO分期、组织类型、组织分化程度及ULK1、Raptor、Rictor阳性表达是宫颈癌患者预后影响因素(P<0.05),组织分化程度、淋巴结转移及Rictor是宫颈癌预后危险因素，ULK1是宫颈癌预后的独立保护因素(P<0.05)。结论 ULK1与Raptor、RiNSC 127716 NMRctor表达与不同宫颈病变的发生、发展及预后有关，有望成为宫颈病变进展和预后的有效预测指标。

为探究一款浆果草本饮料的护眼功效,采用视神经挤压伤模型小鼠,术前术后分别灌胃7 d,实验组灌胃饮料剂量为0.1、1、10、100 mg/kg,对照组灌胃磷酸3-Methyladenine临床试验盐缓冲溶液,利用视网膜平铺免疫荧光染色、视网膜蛋白免疫印迹检测和活性氧(ROS)荧光探针检测方法,测定灌胃14 d后小鼠视网膜节细胞的存活数目、视网膜蛋白表达情况和视网膜氧化应激水平。结果表明,该护眼功能饮料对视Essential medicine网膜神经节细胞(RGCs)存活量的影响是浓度依赖性的,4个剂量组中只有10 mg/kg剂量组RGCs存活量与对照组相比显著增加(P<0.05),提高了约8.25%;在此剂量下,视网膜的免疫炎症细胞小胶质细胞的激活和极化无明显变化;但视网膜内抗氧化应激相关蛋白锰超氧歧化酶(MnSOD)、血红素氧合酶1(HO-1)和核因子样蛋白(Nrf-2)有明显提升;同时实验组挤压伤眼与自身对照对侧眼的视网膜的ROS水平分别降低约25.62%与16.diABZI STING agonist采购95%。表明此护眼功能饮料可通过保持视网膜神经节细胞活性,增强视网膜的抗氧化能力及降低视网膜活性氧水平从而达到护目功效。

随着社会的不断发展,环境污染问题愈发突出,对人和动物的机体健康产生了不良影响。大量证据表明,环境污染物的不利影响是雌性生殖力下降的一个重要因素。三氯卡班(Triclocarban,TCC)作为一种广谱的抗菌制剂,被广泛使用于生产和生活中,并在环境中大量存在。人体不仅通过皮肤接触直接暴露于TCC,而且还通过饮食、呼吸等方式吸收TCC,导致其在人体中积累。由于TCC的安全性仍不完全清楚,对人类和动物健康存在的潜在影响尚未明确,这就迫切要求我们对TCC的生殖毒性进行评估。卵母细胞与早期胚胎的正常发育是人类和家畜发挥生殖力的保障,然而,卵子发生和植入前胚胎发育是一个十分敏感的过程,容易受到环境压力的不利影响。TCC对雌性动物卵母细胞减数分裂成熟和早期胚胎发育的影响仍不清楚,因此本实验利用小鼠卵母细胞和早期胚胎体外培养体系,用不同浓度TCC处理卵母细胞和早期胚胎,并运用免疫荧光、染色体爬片、细胞活染和转录组测序等方法来探究TCC对小鼠卵母细胞减数分裂成熟和早期胚胎发育的影响及相关机制。具体研究结果如下:1.TCC对小鼠卵母细胞减数分裂成熟的影响及相关机制研究(1)在卵母细胞体外成熟培养体系中,分别用不同浓度TCC处理卵母细胞14 h,观察第一极体排出(Polar body extrusion,PBE)情Similar biotherapeutic product况。结果显示,12E1 Activating抑制剂 μM TCC处理导致PBE率显著下降,将卵母细胞被阻滞在第一次减数分裂前中期(Pro-metaphase of Meiosis I,Pro-MI)和中期(metaphase of Meiosis I,MI)。(2)TCC扰乱减数分裂纺锤体形态和染色体排列,改变微管组织中心(Microtubule organizing center,MTOC)相关蛋白 Pericentrin 和 p-MAPK 的定位,影响动粒-微管连接(Kinetochore-microtubule attachment,K-MT),持续激活纺锤体组装检验点(Spindle assembly checkpoint,SAC)。同时,TCC影响卵母细胞减数分裂微丝骨架的动态变化。(3)己烯雌酚和雌二醇导致雌激素受体α(Estrogen receptor α,ERα)在卵母细胞纺锤体上异常聚集,但在TCC处理的卵母细胞中并没有观察到ERα异常聚集的现象。(4)TCC破坏小鼠卵母细胞线粒体分布模式,减少ATP水平,降低线粒体膜电位。TCC诱导卵母细胞氧化应激,导致卵母细胞氧化性DNA损伤,诱导卵母细胞早期凋亡。同时,TCC破坏了小鼠卵母细胞内质网(endoplasmic reticulum,ER)、高尔基体标、溶酶体的分布模式。(5)TCC改变组蛋白H3K27me2和H3K27me3修饰水平2.TCC对小鼠早期胚胎发育的影响及相关机制研究(1)在早期胚胎培养基中,分别用不同浓度TCC处理受精卵,观察早期胚胎发育情况。结果显示,TCC以剂量依赖的方式影响小鼠早期胚胎发育,6 μM TCC对早期胚胎的2细胞发育率没有影响,4细胞发育率显著降低,且无胚胎发育到囊胚。(2)对照组和TCC处理组2细胞胚胎转录组测序募集得到7600个差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs),其中 3157 个基因表达发生上调,4443个基因表达发生下调。GO分析和KEGG分析发现,富集的基因主要涉及线粒体、ER、高尔基体、细胞骨架、过氧化物酶体、RNA聚合酶、氧化还原、RNA合成、DNARP56976损伤、细胞凋亡等成分或过程。Venn分析显示,TCC影响合子基因组激活(Zygotic genome activation,ZGA)过程,抑制合子依赖性母源效应基因的降解。(3)TCC影响2细胞胚胎的表观遗传修饰。TCC处理之后,2细胞胚胎DNA甲基化水平显著上升,H3K27ac、H3K9ac和H3K27me3修饰水平显著降低,H3K4me3和H3K9me3修饰水平显著增加。(4)TCC诱导2细胞胚胎发生氧化应激和DNA损伤。综上所述,TCC破坏细胞骨架组装,导致K-MT连接异常,持续激活SAC,阻滞细胞周期,抑制PBE,最终影响卵母细胞减数分裂成熟。同时,TCC影响线粒体、ER、高尔基体和溶酶体功能,导致卵母细胞氧化应激、DNA损伤和早期凋亡,破坏卵母细胞表观遗传修饰状态。另外,TCC破坏早期胚胎基因表达,干扰ZGA和母源基因降解,改变早期胚胎的表观遗传修饰水平,诱导早期胚胎发生氧化应激和DNA损伤,最终导致早期胚胎发育障碍。

目的 探讨免疫性因素对常见血型意外抗体产生的影响。方法 回顾性分析2013年3月至20Empagliflozin溶解度22年2月上海市血液中心血型参比实验室检出的明确记录患者输血史和妊娠史的意外抗体案例。排除直抗阳性、自身抗体、药物抗体、冷自身抗体及新生儿患者，排除混合抗体，最终共有1 920例入组。统计产生抗体患者的输血史和妊娠史，将其分为有输血史及妊娠史组(A组，331例)、仅有输血史组(B组，231例)、仅有妊娠史组(C组，1 068例)、无输血无妊娠史组(D组，290例)。其中有输血史者分为多次输血组326例和单次输血组236例。分析免疫性因素对常见血型意外抗体产生的影响。结果 B组与C组数据在分布趋势上存在明显的不一致性。B组抗E、抗Ec、抗Ce抗体检出率高于D组，抗M、抗Lea抗体检出率低于D组，差异有统计学意义(P <0.05)。C组抗D、抗E抗体检出率高于D组，抗Mhexosamine biosynthetic pathway、抗Leb抗体检出率低于D组，差异均有统计学意义(P <0.05)。多次输血组抗Ce、抗Kidd、抗Ec抗体检出率高于单次输血组，抗DC、抗D抗体检出率低于单次输血组，差异有统计学意义(P <0.05)。不同特异性意外抗体在A组与B组分布差异无统计学意义(χ2=15.400,P=0.350)，而与C组比较差异有统计学意义(P <0.05)。结论 不同特异性抗体在输血患者、经产妇、无明显免疫史个体中的分布有显著Baf-A1分子式差异。妊娠对血型意外抗体的产生也有显著影响，而对于意外抗体检测及输血安全而言，既往输血史的免疫学意义远大于妊娠史。研究血型意外抗体产生、分布及变化的规律，有助于安全输血，以及疾病的诊断和治疗。