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目的:探讨经皮冠状动脉介入治疗确认细节(PCI)患者血清组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)、胱抑素C(Cysvaccine-preventable infectionC)水平与支架内再狭窄(ISR)发生的关系。方法:我院接受PCI治疗，随访1年的97例冠心病患者，根据ISR发生情况被分为发生ISR组(31例)与未发生ISR组(66例)。比较两组一般资料及HDAC3、CysCselleck化学水平，并分析血清HDAC3、CysC水平与冠心病患者PCI后发生ISR的关系。结果:PCI后随访1年，97例患者中31例发生ISR,占比31.96%。与未发生ISR组比较，发生ISR组规律服用抗血小板药物比例及血清CysC水平显著降低，血清CRP及HDAC3水平显著升高，P均<0.01;二元Logistic回归分析显示，C反应蛋白(CRP)、HDAC3水平是冠心病患者PCI后ISR发生的独立危险因素(OR=2.037、23.560,P均<0.01),CysC水平是其独立保护因子(OR=0.005,P=0.036);ROC曲线显示，入院时血清CysC、HDAC3水平预测冠心病PCI患者ISR发生风险的曲线下面积(AUC)分别为0.728、0.801,预测价值较理想。结论:高HDAC3水平、低CysC水平提示冠心病PCI患者有发生ISR高风险，二者用于预测ISR发生有一定的价值。

酸枣仁,是鼠李科植物酸枣(Ziziphus jujuba Mill.var.spinosa(Bunge)Huex H.F.Chou)的干燥成熟种子,主要生长于我国华北、东北、黄河流域等地区,是一种分布广泛的药用资源。酸枣仁作为种子类中药材,富含约36%(干重)的蛋白质成分,然而目前国内外关于酸枣仁蛋白及其酶解产物的深入研究较少。为此本文在前期酸枣仁蛋白研究基础上,为拓展酸枣仁蛋白的生物活性、增加水溶性进而提高其被人体的吸收利用度,采用现代酶解工艺对酸枣仁蛋白进行酶解,并针对酸枣仁蛋白酶解产物开展系统深入的研究,以期为酸枣仁蛋白及其酶解产物的充分开发和利用提供实验依据。目的:对酸枣仁蛋白酶解产物进行制备工艺优化,通过多种现代研究方法分析其理化性质及功能特性,从细胞、动物层面对酸枣仁蛋白酶解产物的生物活性进行研究,为酸枣仁在功能性食品及保健食品的应用与发展奠定理论基础。方法:1.酸枣仁蛋白酶解工艺优化:以水解度(DH)、DPPH自由基清除能力为考察指标,对最适蛋白酶进行优选;以DH为考察指标,采用单因素实验、响应面设计实验,优化酸枣仁蛋白酶解工艺。2.酸枣仁蛋白酶解产物理化性质、功能特性研究:理化性质:采用SDS-PAGE、Tricine-SDS-PAGE电泳以及尺寸排阻色谱测定其分子量分布情况;分析其氨基酸组成;采用FTIR及CD光谱,研究酸枣仁蛋白酶解产物的二级结构;采用ANS荧光探针法测定相对荧光强度;采用差示热量扫描仪测定热稳定性。功能特性:测定酸枣仁蛋白酶解产物的溶解性、持水及持油性、乳化性、起泡性等,探究其在食品行业的加工特性。3.酸枣仁蛋白酶解产物抗氧化活性研究:采用体外自由基清除实验,测定酸枣仁蛋白酶解产物对DPPHZD1839使用方法自由基、ABTS~+自由基、超氧阴离子、羟基自由基的清除能力;采用Hep G2细胞实验,构建H_2O_2诱导的氧化损伤模型,测定对其细胞活力及相关氧化应激指标的影响,研究酸枣仁蛋白酶解产物对Hep G2细胞氧化应激的抑制作用;采用HPLC测定ZSSPHs对血管紧张素转化酶(ACE)的体外抑制能力。4.酸枣仁蛋白酶解产物抗疲劳活性研究:采用小鼠游泳实验,构建小鼠体力疲劳模型,测定酸枣仁蛋白酶解产物对小鼠力竭游泳时间、代谢产物积累、血清生化指标、组织生化指标以及氧化应激指标的影响;采用C2C12细胞实验,建立H_2O_2诱导的氧化应激模型,测定C2C12肌管活力及相关氧化应激指标,研究其对肌细胞中氧化应激的抑制作用,探究酸枣仁蛋白酶解产物的抗疲劳活性。结果:1.以DH为指标,比较了胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及碱性蛋白酶等酶解产物,确定碱性蛋白酶为最适蛋白酶,在此基础上,针对碱性蛋白酶酶解工艺,采用单因素实验结合响应面设计实验,确定了酸枣仁蛋白酶解产物的最佳制备工艺:底物浓度5%,酶底比2%,酶解时间3 h,酶解温度56℃,酶解p H为8.65,并对该工艺进行验证,表明该工艺稳定可行。2.分析了酸枣仁蛋白酶解产物的理化性质、功能特性,结果表明,酸枣仁蛋白酶解产物的分子量低于5000 Da;氨Biomolecules基酸组成合理,必需氨基酸含量为27.99%;空间二级结构主要为无规则卷曲结构;酶解后其相对荧光强度明显降低,表明其表面疏水性降低;最大热变性温度为119.29℃;功能特性结果表明,与酸枣仁蛋白相比,酸枣仁蛋白酶解产物的溶解性、持油性、乳化性、起泡性均明显提升,尤其是水溶性明显较酸枣仁蛋白优异,达到了遇水即溶的效果,显著提升了其食品加工特性。3.体外抗氧化实验结果表明,在自由基体外清除实验中,酸枣仁蛋白酶解产物对DPPH、ABTS~+自由基表现出极强的清除能力,最高分别可达94.60%、90.84%;对超氧阴离子、羟基自由基也具有一定的清除能力,最高分别可达44.77%、47.77%,均明显高于酸枣仁蛋白;在H_2O_2诱导的氧化应激Hep G2细胞实验中,酸枣仁蛋白酶解产物可促进Hep G2细胞增殖,增强H_2O_2诱导的Hep G2细胞的细胞活力,通过降低ROS、MDA积累,提高SOD、GSH-Px抗氧化酶活力,减轻氧化应激损伤;在ACE体外抑制能力实验中,ZSSPHs对ACE表现出较好的体外抑制能力,抑制率最高可达73.13%。4.抗疲劳活性实验结果表明,在小鼠抗疲劳实验中,酸枣仁蛋白酶解产物可提高小鼠力竭游泳时长,增强小鼠耐力;还可通过减少BUN、BLA等代谢PF-07321332试剂产物累积、减少CK、LDH外渗、增强糖原储备起到抗疲劳的作用;酸枣仁蛋白酶解产物能减少MDA的累积、增强CAT、SOD、GSH-Px等抗氧化酶活力,减轻氧化应激损伤,进而缓解疲劳;在H_2O_2诱导的C2C12细胞肌管活力实验中,酸枣仁蛋白酶解产物可增强H_2O_2诱导的C2C12肌管活力,降低肌细胞内ROS、MDA累积,增强SOD、GSH-Px抗氧化酶活性,减轻肌细胞中氧化应激损伤。结论:本研究采用单因素试验结合响应面设计实验,确定酸枣仁蛋白酶解产物的最佳制备工艺,对其理化性质、功能特性、生物活性进行深入研究。结果表明酸枣仁蛋白酶解产物与酸枣仁蛋白比较,其氨基酸组成及结构组成更趋合理,其良好的水溶性及较小的分子量,增强了人体的吸收利用度,所展现的良好热稳定性为其以后的食品加工提供了较大的空间特性;抗氧化及抗疲劳实验表明,酸枣仁蛋白酶解产物可通过多种生化途径,发挥优良的抗氧化及抗疲劳生物活性。上述研究表明,酸枣仁蛋白酶解产物是一种潜在的氨基酸营养资源,在预防氧化应激疾病及缓解疲劳方面具有较好的应用前景。

目的：研究人参败毒散对脂多糖诱导的肺炎小鼠肺组织的影响及其与线粒体自噬蛋白表达的关系。方法：将24只ICR雄性小鼠随机分为4组，假手术组、肺炎对照组、人参败毒散组和自噬抑制剂组。均于术后6h取肺组织进行炎症因子分析、肺泡灌洗液炎性细胞分析以及自噬相关蛋白LC3及P62水平变化分析。结果：与肺炎对照组相比，人参败毒散组的IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白及mRNA水平明显下降，具有统计学意义（P<0.01）。与人参败毒散组相比，自噬抑制剂组中IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白及mRNA水平明显提高，具统计学意义（P<0.05更多）。经人参败毒散处理后，炎症细胞的数量减少；而经自噬抑制剂3-MA处理，炎症细胞数量均出现了不同程度的增加（P<0.05）。与假手术组相比，肺炎对照组肺组织medicinal cannabis内自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低；经人参败毒散干预后，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著升高（P<0.01）。同时使用p62追踪选择性自噬过程，结果显示10μg LPS处理小鼠6h后，P62蛋Compound 3分子量白水平呈升高趋势；与肺炎对照组相比，人参败毒散组P62蛋白水平显著下降。结论：人参败毒散可减轻肺炎小鼠的肺损伤，其作用机制可能与抑制炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α释放、影响线粒体自噬蛋白的表达有关。

糖尿病肾病作为糖尿病最常见的并发症之一，最终可进展成终末期肾病，严重影响患者生存质量。现代医学临床上主要通过诊治原发病以延缓肾功能进一步恶化或依靠透析治疗维持生命，临床治疗效率不高。传统中医药在治疗糖尿病及其并发症方面有着不可替代的优势，近年来，越来越多研究发现中药黄芪在糖尿病肾病的预防和治疗方面具有一定的临Mediator of paramutation1 (MOP1)床价值，黄芪作为补气代表药，具有补益脾肾、益气活血等功效，其有效成分可通过双向调节血糖、减轻胰岛素抵抗、调节糖脂代谢、抑制氧化应激损伤、抑制炎症反应等多靶点、多通路、多途径发挥对肾脏的保护作用。本文通过对糖尿病肾病中西医GDC-0973半抑制浓度的病因病机、黄芪主要活性成分及药理作用、黄芪的应用等进行阐述，旨在探讨黄芪治疗糖尿病肾病的作用机制及研究进展，以资临床应用黄芪治疗糖尿病肾病MLN8237体外借鉴和参考。

目的 建立阿托西班的临床合理用药评价标准，为临床合理使用阿托西班提供参考。方法 以醋酸阿托西班注射液说明书、相关指南为依据，由合理用药评价小组制定合理用药评价标准，包括5个一级指标、8个二级指标。采用层次分析（AHP）法计算二级指标的权重系数，利用逼近理想值排序（TOPSIS）法对广州医科大学附属第三医院（以下简称“本院”）190例妊娠期妇女使用醋酸阿托西班注射液的情况进行回顾性评价，根据相对接近度将optimal immunological recovery评价结果分为用药合理、用药基本合理、用药不合理3个层次。结果 190例妊娠期妇女中，49selleck NMR例（25.8%）为阿托西班用药合理，39例（20.5%）为用药基本合理，102例（53.7%）为用药不合理；AHPTOPSIS法所得评价结果与临床实际情况相符。用药不合理的主要问题为超适应证用药、用法用量不合理、超疗程用药及未进行适宜的经济性考量。结论 通过AHP-TOPSIS法建立了阿托西班临AMG510 IC50床应用的合理性评价标准，该法所得评价结果可量化、科学可信。该药在本院的不合理使用现象较为普遍，临床应用时应加强管理。

目的 观察弓形虫感染对小鼠和人子宫自然杀伤细胞(uterine natural killer cells,uNK cells)比例、数量、分化和功能的影响，探讨uNK细胞在弓形虫感染致早孕流产中的作用。方法 妊娠第6.5天给予孕鼠腹腔注射弓形虫速殖子，建立孕早期弓形虫感染致流产小鼠模型，妊娠第9.5天分离小鼠子宫淋巴细胞。取人正常妊娠孕早期流产新鲜蜕膜组织，分离人子宫淋巴细胞，与弓形虫RH株速殖子体外共培养48 h(弓形虫与子宫淋巴细胞比例分别为0.5∶1、1∶1、2∶1)。采用流式细胞术检测小鼠u NK细胞表型(CD122、NK1.1、DX5)、人u NK细胞表型(CD3、CD56、CD11b、CD27)及胞内细胞因子γ-干扰素(interferon-γ，IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)表达水平。磁珠分选小鼠和人uNK细胞，以小鼠YAC-1或人K562细胞作为靶细胞、以小鼠或人uNK细胞作为效应细胞，采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法检测效应细胞/靶细胞比例分别为1∶1、5∶1、10∶1、20∶1时uNK细胞的杀伤功能。结果 妊娠第9.5天，弓形虫感染组小鼠流产率较对照组显著上升(83.02%vs.3.51%；χ~2=71.359,P<0.001)。与对照组比较，弓形虫感染组小鼠uNK细胞绝对数量显著降低[(4 547±1 610)个/只vs.(8 978±3 339)个/只；U=2.000,P<0.05]、细胞表面NK1.1表达水平显著下降[(74.53±8.37)%vs.(93.00±1.11)%;Puromycin体内实验剂量U=0.000,P<0.05]、NK1.1~-DX5~-细胞比例显著上升[(20.10±8.03)%vs.(5.04±0.68)%;U=0.000,P<0.05]、NK1.1~+DX5~+细胞比例显著Ras抑制剂下降[(21.70±12.48)%vs.(45.75±2.26)%;U=0.000,P<0.05]、IFN-γ表达水平显著升高[(16.74±1.36)%vs.(8.13±1.90)%;U=0.000,P<0.05]，但TNF-α表达水平无显著改变[(67.98±9.20)%vs.(52.93±10.42)%;U=2.000,P>0.05]。弓形虫感染组小鼠uNK细胞表现出较强杀伤能力，且杀伤作用随着效应细胞/靶细胞比例升高逐渐增强；效应细胞/靶细胞比例为1∶1、5∶1、10∶1、20∶1时，感染组uNK细胞对YAC-1细胞的杀伤活性分别为2.30%、4.32%、8.12%和12.65%，对照组分别为1.21%、1.63%、2.51%和3.22%。将人子宫淋巴细胞与弓形虫RH株速殖子共培养48 h后，弓形虫感染组人uNK细胞在子宫淋巴细胞中所占比例较对照组显著降低[弓形虫2∶1组vs.对照组：(6.61±1.75)%vs.(17.48±4.81)%;F=7.307,P<0.01]、绝对数量显著减少[弓形虫2∶1组vs.对照组：(12 104±5 726)个/孔vs.(65 285±21 810)个/孔；H=11.540,P<0.01]。弓形虫感染组uNK细胞中，CD56~(bright)CD16~-调节型NK细胞亚群比例较对照组减少(弓形虫2∶1组vs.对照组：(25.25±5.90)%vs.(36.03±4.51)%;F=3.213,P>0.05]、CD56~(dim)CD16~+杀伤型NK细胞亚群比例增加[弓形虫2∶1组vs.对照组：(11.15±2.15)%vs.(7.09±2.24)%,F=2.992,Pproperty of traditional Chinese medicine>0.05]，两者比值显著降低[弓形虫2∶1组vs.对照组：(2.37±0.92)vs.(5.58±2.39);H=8.228,P<0.05];CD11b~+CD27~-细胞比例显著上升[弓形虫2∶1组vs.对照组：(30.28±6.91)%vs.(17.48±4.67)%;H=6.556,P<0.05],IFN-γ[弓形虫2∶1组vs.对照组：(14.13±1.28)%vs.(15.19±1.64)%;F=1.639,P>0.05]、TNF-α表达水平无显著改变[弓形虫2∶1组vs.对照组：(54.76±10.02)%vs.(50.33±3.67)%;F=0.415,P>0.05]。弓形虫感染组人uNK细胞具有较强杀伤能力，且杀伤作用随着效应细胞/靶细胞比例升高逐渐增强；效应细胞/靶细胞比例为1∶1、5∶1、10∶1、20∶1时，感染组uNK细胞对K562细胞的杀伤活性分别为11.90%、28.11%、49.91%和73.35%，对照组分别为11.21%、21.63%、33.51%和48.22%。结论 弓形虫感染对小鼠和人u NK细胞分化和分泌功能产生了不同影响，但均可引起小鼠和人uNK细胞绝对数量减少、杀伤功能增强。

为了对一种新型副猪嗜血杆菌病（又称猪革拉瑟氏病，Gl?sser’s disease）四价灭活疫苗的研发提供技术储备，本研究利用筛选的4株副猪嗜血杆菌（HPS）（血清4、5、7和13型，编号分别为AT-2、SX-1P、HF-1P和HQ-2）作为疫苗菌株，经甲醛灭活后，配比ISA 201 VG双向油乳佐剂，制成灭活前活菌分别为1.0×10~9cfu/mL、2.0×10Pexidartinib抑制剂~9cfu/mL、4.0×10~9cfu/mL的四价灭活苗，依次命名为V-1、V-2和V-3。以豚鼠为实验动物模型，将V-1、V-2和V-3与商品化疫苗（血清4、5型Hselleckchem CL 318952PS，灭活前活菌浓度各为4.0×10~9cfu/mL）分别免疫（依次为I组～IV组，空白对照组注射等量生理盐水）并进行免疫效果评价：通过间接ELISA测定各组豚鼠血清中IgG抗体水平；通过血清杀菌试验（SBT）测定各组豚鼠血清功能性抗体吞噬活性toxicohypoxic encephalopathy；通过噻唑蓝溴化四唑溶液（MTT）法测定豚鼠脾淋巴细胞的增殖指数；通过双抗夹心ELISA测定各组豚鼠细胞因子（IL-10、IL-4、TNF-β、IFN-γ、MCP-1）含量；对免疫豚鼠腹腔攻毒后检测各组疫苗的保护率；采用平板计数法测定各组豚鼠组织荷菌数以评估攻毒菌株在其中的定植数量；制作攻毒后各组豚鼠的肺、肝、脾和肾脏病理组织切片并观察。结果显示，在整个免疫周期，空白对照组各项检测指标始终无明显变化。I～IV组豚鼠血清IgG抗体效价均为1:12 800；与空白对照组相比，I～IV组均能诱导豚鼠血清功能性抗体水平持续升高且无显著差异（P>0.05），表明各疫苗均具有较强的杀菌效果；I～IV组均能刺激豚鼠血清相关细胞因子水平（IL-4、IL-10、INF-γ、TNF-β、MCP-1）持续上升且无显著差异（P>0.05）。腹腔攻毒后，I～IV组总体保护率分别为85%、100%、100%和60%;I～III组豚鼠各脏器（肺、肝、肾、脾）细菌定植量均显著降低且显著低于免疫组IV(P<0.05），且该3组豚鼠各脏器病理变化均较免疫组IV轻微。上述结果表明，V-1、V-2和V-3免疫豚鼠后均能产生良好的体液免疫和细胞免疫反应，其中V-2和V-3能够100%抵抗致死剂量HPS血清4、5、7和13型的攻毒。本研究首次证明V-2和V-3可作为HPS病四价（血清4、5、7和13型）灭活苗的候选疫苗，为HPS病的疫苗研制奠定了基础。

目的 观察在大黄灵仙方的调控下干细胞生长因子(scf)、酪氨酸激酶受体(c-kit)的表达水平，探讨其影响胆囊动力学改变的可能机制，为大黄灵仙方预防胆石症的发生及复发提供理论依据。方法 将45只SPF级健康雄性豚鼠随机分为正常组、模型组、中药组，其中正常组予正常饲料喂养，模型组、中药组予高脂致石饲料喂养，喂养8周后分别从各组中随机抽取5只豚鼠，肉眼观察下结石形成超过4只，则判断为模型建立成功。造模成功后中药组予大黄灵仙方灌胃，模型组予等体积生理盐水灌胃，连续灌胃给药8周后取豚鼠胆囊组织,HE染色观察观察胆囊组织的病理学改变,Western blot测定胆囊组织中TNFα的表达水平，免CB-839使用方法疫组化测定胆囊平滑肌组织中scf、c-kit的蛋白表达水平。符合正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD多重比较法。结果 HE染色显示模型组胆囊更多组织炎症明显，中药组胆囊组织内炎症程度较模型组明显减轻。Western blot结果表明在模型组中，胆Autoimmune kidney disease囊组织中TNFα的表达水平最高，中药组次之，正常组最低(P值均<0.05);免疫组化结果表明豚鼠胆囊平滑肌组织中scf、c-kit蛋白在正常组、中药组中的表达水平显著高于模型组(P值均<0.05)。结论 大黄灵仙方能增强胆囊动力功能，其作用机制可能与上调胆囊Cajal间质细胞中的scf、c-kit信号通路有关。

乳腺癌具有高转移率。使用小动物活体成像技术对乳腺癌的生长及转移情况实时监测定量分析可以帮助了解疾病机制及进行药物研究。二维成像对immunoaffinity clean-up光学信号的定位与定量是相对的。随着计算机技术的进步，可以实现对采集的图像进行三维重建，精准量化光学信号，获得空间分布的三维信息。IVIS Spectrum小动物活体光学三维成像系统同时具有高灵敏的生物发光、荧光、切伦科夫辐射二维成像及三维扫描重建功能，是小动物活体光学成像的顶级系统。本文对人乳腺癌细胞（MDA-MB-231）进行慢病毒感染，在体外稳定表达荧光素酶后，选取重度联合免疫缺陷（SCID）小鼠进行原位乳腺癌https://www.selleck.cn/products/gsk-j4-hcl.html模型的建立，通过IVIS Spectrum小动物活体光学三维成像系统对小鼠进行生物发光二维成像，无创观测肿瘤的生长及转移情况。本文的创新点是利用selleck抑制剂生物发光成像断层扫描技术对小鼠模型进行定量三维成像，使用系统自带的算法直接进行三维重建，同时结合鲸鱼优化算法（WOA）优化后的三维卷积的深度编码器-解码器的网络模型进行重建。通过CT图像验证两者的重建效果，得到肿瘤的深度信息，实现对乳腺癌的精准定量分析。

近年来，癌症的发病率逐渐上升，且呈年轻化发展趋势，以其获悉更多难治性和高致死率的特征成为危害人类生命健康的主要原因。姜科姜黄属植物温郁金是一味具有潜在应用价值的抗癌中药，因其用药历史悠久，祛除瘀血佳，安全性高，在癌症的治疗中引起了广泛关注且发挥了至关重要的作用。随着现代分子生物技术与中药学的交叉渗透，温郁金的多种抗肿瘤有效成分被分离鉴定，其中挥发油（榄香烯、呋喃二烯、姜黄烯醇、吉马酮、二萜类化合物C、姜黄醇）和姜黄素类等有效成分，主要通过抑制癌细胞增殖、诱导凋亡、逆转多药耐药、抑制血管生成、增强放化疗敏感性和增强机体免疫功能等途径发挥抗肿瘤作用。目前，温郁金被批准为国家二类非细胞毒性抗肿瘤药物，在临床上已经被开发为榄香烯注射液biopolymer extraction及榄香烯口服乳剂等抗癌制剂广泛应用于Crizotinib采购不同肿瘤的治疗中，发挥增效减毒的作用。现在，笔者就温郁金的本草考证、抗肿瘤有效成分和相关机制做一最新综述，旨在为癌症的临床治疗和抗癌中药的开发提供借鉴。