Author: admin

目的 探讨不同浓度阿托品对大鼠巩膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法 取出生24 h的健康雄性SD大鼠眼巩膜组织(均为右眼)进行原代培养。取细胞进行分组：对照组(正常巩膜成纤维细胞),0.1 g·L~(-1)、1.0 g·L~(-1)及5.0 g·确认细节L~(-1)阿托品处理组(正常巩膜成纤维细胞分别加入三种不同浓度阿托品溶液),每组5只大鼠原代培养细胞。加药后24 h, CCK-8法检测各组巩膜成纤维细胞活力，流式细胞仪检测各组巩膜成纤维细胞凋亡率，WeGSK1349572 MWstern blot法检测各组巩膜成纤维细胞光蛋白聚糖、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-14和MMP抑制剂(TIMP)-2蛋白表达情况。结果 CCK-8实验结果显示：与对照组相比，0.1 g·L~(-1)、1.0 g·L~(-1)及5.0 g·L~(-1)阿托品处理组细胞活力均增高，其中以1.0 g·L~(-1)阿托品处理组增高最nature as medicine显著，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。流式细胞仪检测结果表明：阿托品处理组各组的巩膜成纤维细胞凋亡率与对照组相比，差异均无统计学意义(均为P>0.05)。与对照组相比，阿托品处理组巩膜成纤维细胞中光蛋白聚糖、TIMP-2蛋白相对表达量均升高，其中以5.0 g·L~(-1)阿托品处理组上升最明显(均为P<0.05);与对照组相比，阿托品处理组巩膜成纤维细胞中MMP-2、MMP-14蛋白相对表达量均降低，其中以5.0 g·L~(-1)阿托品处理组下降最明显(均为P<0.05)。结论 阿托品处理能增强体外培养大鼠巩膜成纤维细胞活力，这种效应的产生可能与光蛋白聚糖、MMPs、TIMPs等细胞因子有关。

由严重创伤及感染性疾病引起的骨缺失问题,是影响人们健康生活的一项重大难题。根据骨缺失尺寸的不同可分为小尺寸骨缺失问题与大段骨缺失问题。大段骨缺失问题相较于小尺寸骨缺失问题来说它的自愈合能力较差,目前传统的应对策略难以满足临床上的巨大需求。随着材料科学技术的不断发展进步,人工骨支架的概念被提出以用来应对多发的大段骨缺失问题。在众多的人工骨支架材料中,由天然高分子聚合物经交联形成的具有优异生物学性能及仿生结构特selleck抑制剂性的水凝胶材料是近年来研究的热点内容。水凝胶基人工骨支架的加工成型方式多种多样,但是它们都具有一定的局限性,3D打印技术的出现给人工骨支架的成型制备提供了另外Pevonedistat一种思路。然而3D打印的水凝胶基支架的打印精度较低和由材料本身导致的支架机性能与降解稳定性较差等问题,限制了3D打印水凝胶材料在骨组织修复领域的发展。对此,本研究提出以海藻酸钠基复合水凝胶的局限性为突破口,为了改善海藻酸钠本身的细胞黏附性差及降解速率不稳定的缺点,采用共混改性的方式按照一定的比例将海藻酸钠与壳聚糖(CS)、明胶(Gel)进行混合。同时为了增强支架的结构稳定性与力学性能从而使支架可以应用于大段骨缺损的trichohepatoenteric syndrome修复,在水凝胶中加入了30%、40%、50%(w/v)的生物陶瓷β-磷酸三钙(β-TCP),制备成生物墨水,采取酸性钙离子交联与戊二醛交联的双交联策略,制备出复合水凝胶,并对复合水凝胶的凝胶特性、微观形貌、红外光谱、亲水性以及溶胀特性进行检测分析。接下来使用3D打印技术并结合预交联的打印策略,稳定打印出了具有一定内外部结构的支架。首先对支架的表面形貌进行观察,同时分析了支架冻干前后的收缩率,力学性能,孔隙率,并对支架的体外降解及矿化能力进行评价。随后利用支架中水凝胶的溶胀特性进行载药,并对各组分支架进行了生物学评价,主要包括支架的细胞黏附性,细胞毒性及细胞增殖,碱性磷酸酶活性以及与成骨相关的基因表达的检测分析。得到以下结论:(1)交联策略的选择使得生物墨水具有优异的凝胶特性。红外光谱分析结果显示,经过交联后处理工艺后,材料的组分与结构稳定,没有新物质的生成。制备的水凝胶基复合生物墨水材料具有优异的亲水性,β-磷酸三钙的加入显著调节了支架的溶胀行为。(2)预交联策略的选择使得支架具有优异的成型能力,经3D打印成型的支架具有75%的孔隙率与最高52.225 MPa的压缩模量,符合松质骨的要求。同时支架表现出优异的体外矿化能力与降解特性,且发现β-磷酸三钙的加入显著提升了支架的力学性能,且有效维持了支架在降解过程中的形态稳定性与力学稳定性。(3)支架的生物学评价结果表明,所有的组分均无毒且细胞黏附性及细胞增殖效果优异,其中添加了β-磷酸三钙的组分表现出更加优异的性能。利用水凝胶溶胀特性负载了含EGCG的支架,其实验结果证明载药支架有效促进了细胞增殖,同时对碱性磷酸酶的活性及相关基因的表达具有一定的促进作用。

目的 研究盐霉素联合X射线照射对人食管癌ECA109及TE13细胞增殖及细胞周期的影响。方法 取对数Smoothened Agonist浓度生长期的ECA109及TE13细胞，将其分为对照组、不同浓度盐霉素组、6 Gy X射线照Medial sural artery perforator射组以及不同浓度盐霉素联合6 Gy X射线照射组。在干预后24、48 h后，采用CCK-8法检测各组细胞增殖率。然后取对数生长期的ECA109及TE13细胞，将其分为对照组、0.1μmol/L盐霉素组、0.5μmol/L盐霉素组、6 Gy X射线照射组和0.1μmol/L盐霉素联合6 Gy X射线照射组、0.5μmol/L盐霉素联合6 Gy X射线照射组，采用流式细胞术检测各组ECA109及TE13细胞的细胞周期。结果 0.1、0.25、0.5、1、2NSC125066核磁.5、5、10、50、100μmol/L盐霉素组干预24、48 h后ECA109细胞及TE13细胞增殖率低于对照组（P<0.05）;0.1、0.5μmol/L盐霉素联合6 Gy X射线照射组干预24、48 h后ECA109及TE13细胞增殖率均低于6 Gy X射线照射组（P<0.05）;0.1、0.5μmol/L盐霉素联合6 Gy X射线照射组ECA109细胞及TE13细胞G_0/G_1期细胞比例低于对照组、0.1μmol/L盐霉素组、0.5μmol/L盐霉素组及6 Gy X射线照射组，0.1、0.5μmol/L盐霉素联合6 Gy X射线照射组ECA109细胞及TE13细胞G_2/M期比例高于对照组、0.1μmol/L盐霉素组、0.5μmol/L盐霉素组及6 Gy X射线照射组（P<0.05）。结论 盐霉素对ECA109及TE13细胞均具有增殖抑制作用，且呈浓度和时间依赖性。盐霉素和X射线联合作用的抑制效果明显优于二者单独作用，其机制可能与盐霉素联合射线联合引起ECA109及TE13细胞G2/M期阻滞有关。

目的 探讨伴高血压及脑出血的常染色体显性遗传脑动脉病伴皮质下梗死和白质脑病(CADASIL)合并NOTCH3基因位点新突变的临床特点。方法 回顾性分析2021年8月就诊于山东大学齐鲁医院神经内科1例CADASIL患者的病例资料、家系情况及致病基因，并检索国内外PR-171采购相关文献进行探讨。结果 先证者以反selleck抑制剂复发生脑出血、进行性记忆力和计算力下降及认知功能障碍为主要临床表现，家系调查发现该家系4代10人中4人有轻重不等的CADASIL症状。先证者头颅MRI+MRA+SWI示右侧枕叶及邻近胼胝体亚急性血肿、脑内多发出血灶、脑白质高信号、左侧脑室增大，基因检测提示NOTCH3基因存在一处杂合变异(c.517dupAchr19:15302932p.T173Nfs*23)。结论 CADASIL不仅可表现为缺血性脑卒中，而且可合并高血压及脑出血。根据临床表现、影像学检查和基因检测结果，先证者符合CADASIL的诊Flow Cytometers断，该家系携带的NOTCH3基因的突变位点c.517dupAchr19:15302932p.T173Nfs*23可能为其家系发病的病因。

目的:血浆致动脉粥样硬化指数(atherogenic index of plasma,AIP)是血浆甘油三酯(triglyceride,TG)与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平之比(以mmselleckchem Adavosertibol/L表示)以10为底的对数转换值[lg(TG/HDL-C)],是一种可以综合反映机体脂质亚组分水平的新型血脂参数。有研究报道,AIP能反映类风湿性关节炎、白塞病患者炎症水平的变化。急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是由多种病因引起胰腺水肿、出血坏死为主要特征的炎性损伤疾病,常伴有脂质代谢genetic gain障碍,随着病情加重出现全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)和多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)。AIP与AP的炎症反应程度之间的关系鲜有报道,本研究旨在探讨AIP与AP全身炎症反应的相关性,为临床工作提供有价值的参考依据。方法:本研究回顾性分析2021年10月至2022年10月期间在江西省人民医院内科住院治疗79例急性胰腺炎患者。收集入选患者的一般资料,入院24小时内血常规、血生化、免疫(procalcitonin,PCT)等实验室指标。根据新日本急性胰腺炎严重度评分(new Japanese severity score,new JSS)分组:轻症组(JSS评分≤2分)和重症组(JSS评分≥3分)。采用独立样本t检验、Mann-Whitney U检验、χ~2检验进行组间差异比较分析。Spearman相关分析评估AIP、降钙素原与新JSS分级及其他潜在影响因素之间的相关性。选取与JSS分级相关的指标进行多因素Logistic回归分析。多因素线性回归分析探究AIP与PCT之间的相关性。所有数据使用SPSS 26.0进行统计学分析。结果:(1)与轻症急性胰腺炎组相比,重症急性胰腺炎组中白细胞计数(15.3±5.3 10~9/L)、AIP[0.9(0.2-1.3)]、血清肌酐[102.0(75.0-239.5)mg/d L]、降钙素原[5.9(1.3-6.6)ng/L]显著升高(均P<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇(0Nirogacestat作用.7±0.4mmol/L)、低密度脂蛋白胆固醇[1.7(1.1-2.6)mmol/L]显著降低(均P<0.05)。(2)Spearman相关分析结果显示,AIP与高血压病史(r=0.222,P=0.049)、甘油三酯(r=0.938,P<0.001)、总胆固醇(r=0.377,P<0.001)、PCT(r=0.265,P=0.038)、新JSS分级(r=0.253,P=0.025)呈正相关;与年龄(r=-0.530,P<0.001)、HDL-C(r=-0.813,P<0.001)、谷草转氨酶(r=-0.222,P=0.049)、谷丙转氨酶(r=-0.320,P=0.004)呈负相关。PCT与白细胞计数(r=0.378,P=0.002)、AIP(r=0.265,P=0.038)、谷丙转氨酶(r=0.077,P=0.038)、血清肌酐(r=0.262,P=0.040)呈正相关;与高密度脂蛋白胆固醇(r=-0.300,P=0.018)呈负相关。(3)在多因素Logistic回归分析中,经过对性别、年龄、BMI、吸烟饮酒情况、高血压病史、糖尿病史、低密度脂蛋白胆固醇、血小板计数、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、PCT校正后,结果显示:AIP值升高是AP患者发生SAP的危险因素[OR=2.493(95%CI:1.023,6.071),P=0.044]。(4)在多因素线性回归分析中,调整性别、年龄、BMI、吸烟饮酒史、高血压病史、糖尿病史、白细胞计数、谷丙转氨酶、血清肌酐后,结果显示:AIP值与PCT水平呈正相关[β=1.459(95%CI:0.299,2.619),P=0.014]。结论:(1)AIP值升高是急性胰腺炎人群发生重症的危险因素。(2)AIP值在急性胰腺炎人群中与PCT水平呈正相关,AIP能反映PCT水平,反映全身炎症反应水平。

研究背景中药复方干预疾病的过程具有“多途径、多成分、多靶点”的特征,在不同视角下对该过程的研究对于深入了解中药复方的作用机理具有重要意义。复杂和非线性的系统状态变化过程中可以表现出由一个状态向另一个状态过渡的临界点,在临界点附近复杂系统的状态会发生突然的转变。自上个世纪八十年代自组织临界性的概念提出以来,各领域学者对复杂系统在临界点的特性做了大量的研究。临界点反映出系统从微观到宏观,性质属性的质的突破,在这种临界态势下,系统具有最大的复杂性、演化性和创新性。不论是对于疾Berzosertib浓度病的发展进程还是对于疾病的治疗进程,分析这种非线性系统的临界突变对于揭示其复杂分子机制具有重要的价值。冠心病慢性稳定性心绞痛(SAP)是一种常见的致残性疾病,中医将其诊断为胸痹。在我国,丹红注射液(DHI)等中药复方被广泛应用于SAP的治疗,DHI治疗在缓解SAP临床症状以及改善远期终点事件等方面均具有一定的优势,然而,具体的相关分子作用机制仍不确切。研究目的本研究在动态网络生物标志物(DNB)方法基础上,引入生物分子网络的结构信息,以DHI治疗SAP的临床试验高通量基因表达数据为研究对象,构建可以识别中药复方干预疾病的小样本基因数据的疗效临界点的方法,并进一步阐明DHI治疗SAP的药理作用机制。研究方法本研究使用DHI治疗SAP的临床研究结果,以多中心临床试验中两个中心62例患者的转录组测序数据,使用WGCNA方法对各疗效组基因划分模块,通过统计学方法(肯德尔、斯皮尔曼相关性分析以及线性相关性分析)识别出可以表征模块网络结构的拓扑参数。接下来,我们通过理论与公式的推导,在DNB方法的基础上,构建了基于高通量基因表达数据与网络结构信息来识别疗效临界变化的新方法,Module Structure-DNB(MS-DNB)方法,该方法解决了临床试验数据小样本的问题。使用MS-DNB方法分析DHI治疗SAP的各疗效组基因表达数据,我们识别出不同疗效发生临界性变化的疗效组,并对临界疗效模块进行了GO功能富集分析和文献验证。最后我们使用一组小鼠弥漫性大细胞淋巴瘤(DLCL)的高通量数据对MS-DNB方法的准确性进行了初步的验证。研究结果1使用DHI干预SAP的试验组取得了显著的疗效,同时患者个体间疗效有一定的差异。依据心绞痛发作频率变化量(AF)评分,将试验组与对照组患者分为恶化、无效、好转、有效以及显效5个疗效组。2对各疗效组进行模块划分后,分析模块的结构参数,通过统计学方法筛选能够表征网络结构信息的参数,最终选择纳入网络密度和网络异质性两个指标。3通过理论与公式的推导,我们将网络密度和网络异质性引入MS-DNB方法,以识别中药复方治疗疾病的疗效临界点。该方法解决了 DNB方法难以分析小样本数据的困难,分析结果显示有效组是各组疗效变化的临界点,并且识别出一个由22个基因组成的临界疗效模块。4 通过对临界疗效模块的GO功能富集分析发现,共富集到28个GO功能条目,多数GO条目与冠心病心绞痛的病理机制高度相关,其single-molecule biophysics中有少量条目有文献验证与DHI相关。其中关联基因最多的条目为single-organism cellular process(GO:0044763)和biological regulation(GO:0065007)条目,各与13个临界疗效模块中的基因有关。5 通过对临界疗效模块的文献验证发现,MALAT1、KIR2DS2以及CXCL5各有9、2、6篇与冠心病心绞痛相关的文献报道。3个基因均与慢性炎症反应有关,提示热毒血瘀证可能是冠心病心selleck激酶抑制剂绞痛血瘀证的一个重要证型。6使用MS-DNB方法处理DLCL小鼠高通量基因表达谱数据集,结果表明,边缘案例期被识别为临界点,这个结果与DNB方法识别出的结果是一致的,且与动物实验结果相符。结论1.多中心临床试验主要疗效指标的结果显示,DHI治疗SAP有明确疗效,然而以AF分组的5个不同疗效组之间的疗效差异较为明显。2为了分析不同疗效组间疗效变化的临界性,我们提出了一种基于基因表达与生物网络结构识别系统变化临界点的方法,即MS-DNB方法,该方法通过加入网络结构信息,解决了对小样本数据难以识别临界点的问题。3使用MS-DNB方法分析DHI治疗SAP的基因表达数据,结果证实了有效组为疗效变化的临界点,并发现了一个由22个基因组成的临界疗效模块。4通过对临界疗效模块进行GO功能富集分析以及文献验证,我们发现了该模块与冠心病心绞痛慢性炎症与细胞自噬等机制相关,提示了慢性炎症反应在CAD等疾病中具有重要意义,热毒血瘀可能是形成血瘀证的重要机制,有进一步深入挖掘的价值。5 MS-DNB方法为探索中医多靶点药物治疗SAP等复杂疾病的动态疗效药理机制提供新的视角和思路。

目的 探讨胰腺癌患者纳米刀术后发生心肌损伤的危险因素，并建立预测风险模型的列线图。方法 回顾性分析2020年9月—2021年11月于郑州大学第五附属医院行纳米刀治疗的92例胰GSKJ4价格腺癌患者的临床资料，以术后3天内出现血清肌钙蛋白I>0.03 ng/mL作为心肌损伤的诊断标准，将患者分为心肌损伤组selleck NMR(n=51)和非心肌损伤组(n=41),收集所有患者的年龄、性别、BMI、美国麻醉师协会分级、吸烟史、酗酒史、术前合并症等基线资料。计量资料用组间比较采用MannAntibiotic-associated diarrhea-Whitney U检验。计数资料组间比较采用χ~2检验或Fisher检验。采用单因素和多因素Logistic回归分析筛选有统计学差异的变量，筛选出相关因素建立预测胰腺癌患者纳米刀术后发生心肌损伤风险的列线图。采用受试者工作特征曲线下面积(AUC)评估模型的区分能力和临床效用。结果 相较于非心肌损伤组，心肌损伤组消融时间更长(χ~2=7.410,P=0.006),探针数量更多(χ~2=6.130,P=0.047),术前合并高血压(χ~2=12.124,P<0.001)、慢性肾脏病(χ~2=12.829,P<0.001)者更多。单因素Logistic回归分析显示，肿瘤直径、消融时间、手术方式、探针数量、高血压史及慢性肾脏病史均与心肌损伤的发生有关(P值均<0.05);多因素Logistic回归分析显示，肿瘤直径[比值比(OR)=3.94,95%CI:1.09～14.18,P=0.036]、消融时间(OR=4.15,95%CI:1.30～13.27,P=0.016)、手术方式(OR=6.92,95%CI:1.92～25.07,P=0.003)及合并高血压史(OR=4.07,95%CI:1.12～14.77,P=0.034)是胰腺癌患者纳米刀术后发生心肌损伤的独立危险因素。AUC=0.859表明，列线图具有较好的区分能力和临床效用。结论 胰腺癌患者纳米刀术后心肌损伤发生率较高，术前合并高血压、肿瘤直径>4 cm、消融时间>1 h是心肌损伤发生的独立危险因素，手术方式(纳米刀+旁路吻合)能增加心肌损伤的风险，列线图对预测心肌损伤发生的风险有较好效果。

目的 探讨mi R-133a对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和转移的作用。方法 自2016年6月至2020年6月，选取北部战区总医院烧伤整形科收治的30例确诊为增生性瘢痕患者的增生性瘢痕组织样本及30例正常皮肤瘢痕组织的标本，通过实时荧光定量PCR检测mi R-133a的表达水平。然后，将购买的增生性瘢痕成纤维细胞分为3组，采用mi R-133a、miR-133a模拟物、miR-133a抑制物转染后，实时荧光定量PCR检测miR-133a表达情况，使用细胞计数试剂盒-8 (cell counting kPostmortem toxicologyit-8assay,CCK-8)检测miR-133a对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的调节作用。通过TranswelCompound 3价格l检测mi R-133a对增生性瘢痕成纤维细胞迁移和侵袭的调节作用。结果 miR-133a在增生性瘢痕组织中的表达显著低于正常瘢痕组织。成功构建过表达/低表达mi R-133a的增生性瘢痕成纤维细胞后，CCK-8和Transwell结果显示，mi R-133a上调能够抑制细胞的增殖、迁移和侵袭，mi R-133a下调促进增生性瘢痕成纤维细胞的增殖GDC-0068配制、迁移和侵袭。结论 mi R-133a在增生性瘢痕组织中表达下调，能够抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖和转移。

通过检测乳腺癌样本和正常组织样本中miR-222表达量，转染miR-222模拟物（mimics）和抑制物（inhibitors），用Optimal medical therapyCCK-8和Transwell检测miR-222对乳腺癌细胞增殖能力和迁移能力的影响．进一步预测miRNA-222的靶基因，构建其过表达载体和预测靶基因的荧光素酶报告载体．通过双荧光素酶检测系统鉴定靶基因，点突变实验验证与靶基因的结合位点．RT-PCR检测miRNA-222过表达或抑制后对靶基因表达的影响．分析CDKN1b和CDKN1c高、低表达水平与乳腺癌患者生存率的关系．结果表明与正常乳腺组织比较，肿瘤组织中miR-222表达显著上升（P<0.0001）,miR-222的表达与淋巴结转移呈正相关LY-188011体内．miR-222过表达后能促进乳腺癌细胞的增殖和迁移，反之则会抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移．双荧光素酶报告系统显示miRNA-222过表达能显著抑制CDKN1b和CDKN1c的荧光素酶活性，点突变实验证实miR-222通过“种子区”与CDKN1b、CDKN1c的靶位点GSK J4作用结合，从而负向调控CDKN1b和CDKN1c的表达．过表达miRNA-222后CDKN1b和CDKN1cmRNA的表达量显著降低（P<0.01）．相反，抑制miRNA-222表达后CDKN1b和CDKN1cmRNA的表达量上升（P<0.05）.CDKN1b和CDKN1c高表达患者的总体生存率显著高于低表达患者（P<0.05）．本研究表明miRNA-222通过负向调控CDKN1b和CDKN1c基因表达，进而影响乳腺癌细胞的增殖和迁移．

目的:分析Optogenetic stimulation乳腺癌组织环氧化酶-2(COX-2)蛋白、人表皮生长因子受体2(c-erbB-2)、突变型P53蛋白、血管内皮生长因子C(VEGF-C)蛋白表达及其与临床病理参数和预后的关系。方法:选取2017年3月至2019年5月到我院就诊103例乳腺癌患者的手术切除标本。免疫组化法测定患者入组时的COX-2、c-erbB-2、P53、VEGF-C蛋白阳性率；比较上述各指标水平与患者TNM分期、分化程度等病理参数的关系；随访患者术后3年生存资料，Kaplan-Meier分析COX-2、c-erbB-2、P53、VEGF-C蛋白水平对预后生存的影响。结果:患者TNM分期、分化程度与COX-2阳性相关(P<0.05);肿瘤直径≥3cm、淋巴结转移与c-erbB-2阳性相关(P<0.05);TNM分期、分化程度、淋巴结转移与P53阳性相关(P<0.0Torin 1体内实验剂量5);淋巴结转移与VEGF-C阳性相关(P<0.05)。103例患者随访3年，随访率为100%,截止至2022年5月死亡20例(19.42%),存活83例(80.58%);根据死亡情况将阳性患者分为存活亚组及死亡亚组，死亡亚组患者入组时的组化评分均明显高于存活亚组(P<0.05)。Log-rankχ~2检验显示随访3年P53、VEGF-C阳性及阴性的累积存活率比较差异更多有统计学意义(χ~2=14.000、5.206,P均<0.05);COX-2、c-erbB-2阳性及阴性患者的累积存活率比较差异无统计学意义(χ~2=1.761、2.830,P=0.184、0.093)。结论:乳腺癌组织中COX-2、c-erbB-2、P53、VEGF-C蛋白阳性率与TNM分期、淋巴结转移、分化程度等病理参数相关，在患者预后评估中具有一定指导意义。