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燕子花(Iris laPathologic downstagingevigata)是鸢尾属中极其耐寒的种类,是东北地区园林绿化中非常重要的水生花卉。自然界中的燕子花花色多为蓝色,因其花色不够丰富,园林应用中希望在燕子花花色育种上有所突破,满足人们对花色多样性的需求。随着基因工程在花色育种中的应用,给燕子花的花色育种提供了新思路,花色呈色、变异机理的研究对于基因工程育种的开展非常必要。课题组于野外发现燕子花的白花变种,但其花色发生变异的机理尚不清楚,白花燕子花(I.laevigata var.alba)的发现为解析燕子花花色变异机理研究提供了非常好的材料。本研究以燕子花(IB)及白花燕子花(IW)的花被片为材料,基于代谢组学分析,从花色变异的物质基础着手,结合转录组和蛋白质组分析,获得花色调控关键基因并进行调控功能验证,深入解析了燕子花花色变异机制。主要研究成果如下:(1)应用广泛靶向代谢组学分析得出花青素是IB呈色的物质基础。IW中也含有花青素,但IB中花青素的种类和含量显著高于IW,尤其是飞燕草色素。IW中以原花青素合成为主,使得花青素合成受阻,是IW花色形成的重要原因。(2)利用三代转录组测序构建了2个Pac Bio Iso Seq文库,去冗余后共得到835,813个转录本。以三代全长转录本为参考,进行二代转录组测序,得到IB和IW的差异表达基因(DEGs)15930个。对DEGs进行GO和KEGG富集分析,筛选到花青素合成相关的23个结构基因和9个转录因子。转录组和代谢组联合分析鉴定到参与花色变异的11个DEGs,包括Il CHS、Il CHI-1、Il CHI-2、Il F3H、Il ANS、Il ANR、Il MYB3、Il MYB4、Il MYB5、Ilb HLH2和Ilb HLH3。(3)利用i TRAQ技术,在IB和IW中共鉴定到1723个差异表达蛋白(DEPs),对DEPs进行GO和KEGG富集分析,筛选到参与花青素合成的7个结构基因和3个转录因子。转录组和蛋白质组联合分析鉴定到参与花色变异的6个DEGs,包括Il CHI-1、Il CHI-2、Il ANR、Il MYB4、Il MYB5和Ilb HLH3。多组学联合分析得出Il ANR是IW产生白花变异的关键结构基因,Il MYB4、Il MYB5和Ilb HLH3是调控燕子花产生花色变异的关键转录因子。(4)从燕子花中克隆了4个参与花色变异的关键基因Il MYB4(OQ243217)、Il MYB5(OQ243218)、Ilb HLH3(OQ243219)和Il ANR(OQ433948),构建植物过表达载体并通过叶盘法遗传转化烟草,获得了T_3代纯合转基因过表达株系(OE-Il MYB4、OE-Il MYB5、OE-Ilb HLH3、OE-Il ANR)。与野生型(WT)相比,OE-Il MYB4、OE-Il ANR使得烟草花冠颜色变浅,Il MYB4是通过上调ANR基因的表达实现的花色改变;OE-Il MYB5和OE-Ilb HLH3通过上调HY5和UFGT基因的表达使得转基因烟草花冠的着色期提前、颜色加深。此外发现Il MYB4还参与叶形、叶色、雌蕊发育、叶腋处的分枝等性状调控。(5)RT-q PCR检测了Il MYB4、Il MYB5、Ilb HLH3在IB和IW在花被片未着色(S1)、开始着色(S2)、完成着色(S3)及完全盛开(S4)4个不同时期和不同组织部位的表达模式,发现Baf-A1价格Il MYB4、Il MYB5、Ilb HLH3均在花中优势表达,在IB的S1-S4时期中Ilb HLH3表达量最高,其次是Il MYB5;在IW的S1-S3时期,Ilb HLH3表达量最高,其次是Il MYB4,在S4时期,Ilb HLH3和Il MYB5相对表达量下降,且均低于Il MYB4。Il MYB4、Il MYB5和Ilb HLH3蛋白均作用于细胞核,酵母双杂交和双分子荧光互补实验发现Il MYB4、Il MYB5都与Ilb HLH3蛋白互作。(6)FPNI-PCR克隆得到Il ANR基因的启动子序列1520bp,其中不仅包含了高等植物启动子元件,还含有一些与植物的生长发育相关的其它作用元件及MYB结合位点。酵母单杂交实验表明Il MYB4可以结合Il ANR的启动子P1处的位点来调控Il ANR的表达,通过双荧光素酶实验得出Il MYB4与Ilb HLH3互作可以促进Il ANR的转录表达,致使白花燕子花中类黄酮生Pevonedistat NMR物合成途径以表儿茶素等原花青素类物质合成为主,花青素合成受阻。

目的:观察腰背肌功能锻炼联合中药熨烫对腰椎退行性脊柱炎的临床有效性,以期为临床上治疗腰椎退行性脊柱炎推行一种简单有效的治疗方案提供参考。方法:选取从2021年12月到2022年12月,在我院就诊或者住院的80例腰椎退行性脊柱炎患者为研究对象。随机分为两组,实验组采用腰背肌功能锻炼联合中药熨烫,对照组采用中药熨烫治疗。连续治疗7天为1个疗程,连续观察2个疗程进行评估,分别在治疗前,治疗第1个及第2个疗程后,统计2组的视觉模拟评分法(VAS)、日本骨科协会下腰椎功能(JOA)评分标准、指地距离(Finger-to-Floor Distdrug-medical deviceance)FFD、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分。采用统计学软件SPSS25.0进行数据统计分析。结果:(1)视觉疼痛评分法(VAS)比较:治疗前两组患者的评分比较P>0.05,无统计学意义。治疗1个疗程、治疗2个疗程后实验组与对照组进行组内比较结果显示P<0.05,有显著性差异;治疗1疗程后实验组与对照组进行进行组内比较P>0.05,无显著性差异,治疗第2疗程后P<0.05,有显著性差异。(2)日本骨科协会下腰椎功能(JOA)评分:治疗前两组患者的评分比较P>0.05,无统计学意义。治疗1个疗程、治疗2个疗程后实验组与对照组进行组内比较结果显示P<0.05,有显著性差异;实验组与对照组在治疗1疗程后进行进行组内比较P>0.05,无显著性差异,治疗第2疗程后P<0.05,有显著性差异。(3)指地距离(FFD)评分:治疗前两组患者的评分比较P>0.05,无统计学意义。治疗1个疗程、治疗2个疗程后实验组与对照组进行组内比较结果显示P<0.05,有显著性差异;实验组与对照组治疗1疗程后进行进行组内比较P>0.05,无显著性差异,治selleck BIBW2992疗第2疗程后两组统计学比较P<0.05,有显著性差异。(4)Oswestry功能障碍指数(ODI)评分:两组患者治疗前的评分比较P>0.05,无统计学意义。治疗1个MC3小鼠疗程、治疗2个疗程后实验组与对照组进行组内比较结果显示P<0.05,有显著性差异;实验组与对照组治疗1疗程后进行进行组内比较P>0.05,无显著性差异,治疗第2疗程后两组统计学比较P<0.05,存在显著性差异。结论:腰背肌功能锻炼联合中药熨烫在治疗LDS上具有协同的作用,能显著的改善LDS患者的疼痛,同时在缓解腰部的症状,改善腰部的活动功能以及生活质量的提高上具有显著的疗效。

目的:运用UPLC-MS/MS技术分析小红参的化学成分,结合网络药理学和分子对接技术初步分析小红参治疗痛经的多途径、多靶点、多成分微观机制。方法:通过实验分析小红参的化学成分,再采用网络药理学搜集与痛经相关作用的作用靶点,交集作用靶点富集分析得Pexidartinib半抑制浓度到药物和疾病共有靶点,最后对核心靶点进行GO和KEGG分析,建立“中药-活性成分-活性靶点-通路”网络图,最终选取活性强度前10的化合物作为配体与筛选后的疾病靶点基因进行分子对接。结果:共分析出小红参中含有51个化合物,其中包括25个醌类、12个三萜类、3个有机酸类、3个苯丙素类、7个环肽类和1个酯类化合物;富集分析得到与痛经相关作用的133个潜在作用靶点,交集作用靶点得到KEGG通路165条(P<0.05)。“化合物-靶点-通路”网络共涉及20条KEGG通路,分子对接验证筛选出的10个核心化合biomechanical analysis物(α-亚麻酸、对苯二甲酸二丁酯、齐墩果酸、茜草乔木酮B、茜草乔木酮D、茜草BIBW2992 molecular weight乔木酮E、rubianol-A、rubianol-B、RA-I、RA-V)与6的关键靶点(MAPK1、ESR1、BCL2、ESR2、MMP2、PIK3CA)的结合力。结论:该研究初步表明,彝族药小红参通过多成分、多靶点、多途径发挥对痛经的治疗作用,阐明小红参治疗痛经的质量标志物,体现了中药治疗疾病的整体性特点,为小红参物质基础及关键质量属性研究提供理论依据。

目的观察自体微结膜瓣移植联合羊膜移植术治疗复发性翼状胬肉术后的眼表恢复情况、复发率、眼表及干眼相关症状等并发症情况。方法非随机对照试验。入选40例(43眼)复发性翼状胬肉患者,其中试验组20例(21眼)接受自体微结膜瓣移植(2.0mm×3.0mm)联合羊膜移植术,对照组20例(22眼)接受常规自体结膜瓣移植术(结膜瓣面积等于翼状胬肉切除后暴露的巩膜面积)。所有患者检测并记录视力、眼压、翼状胬肉大小、角膜上皮修复时间、结膜增生等级、Schirmer test I和眼表症状评分(干燥感、异物感、烧灼感、疼痛感)。数据采用SPSS 2Indian traditional medicine5.0软GW-572016件进行分析。结果自体微结膜瓣移植联合羊膜移植术和常规的自体结膜移植术治疗复发性翼状胬肉于术后6个月随访时,均无复发,术后6个月两组间结膜增生等级无购买GSKJ4统计学差异(P>0.05)。角膜上皮均在术后3～5天愈合,组间无差异(P>0.05)。所有患者术后视力稍有改善,眼压平稳,组间无差异(P>0.05)。术后3d、7d试验组患者异物感高于对照组(p<0.05),此后,两组间异物感无统计学差异(P>0.05)。术后3d、7d、14d、1m、3m时,两组间干燥感无差异(P>0.05),而在术后6个月时,对照组干燥感评分高于试验组(P<0.05)。Schirmer Test I、烧灼感和疼痛感在各个时间点均无组间差异性(P>0.05)。在观察期间没有其他严重并发症。结论自体微结膜瓣移植联合羊膜移植术相对于常规的结膜移植术复发率无差异性,但眼表损伤相对较小,对于结膜缺乏或合并干眼症、房角关闭风险等有结膜保留需求的复发性翼状胬肉患者,可作为手术优选方案。

目的 探讨调冲汤加减联合低分子肝素钙治疗肾虚血瘀型复发性流产合并抗磷脂综合征的临床效果及安全性观察。方法 选取我院收治的肾虚血瘀型复发性流产合并抗磷脂综合征患者150例，随机分为对照LY2157299分子式组(单纯接受低分子肝素钙治diABZI STING agonist价格疗)和研究组(调冲汤加减联合低分子肝素钙治疗),各75例。治疗7周后，比较两组治疗效果、中医证候积分及抗磷脂抗体转阴率。结果 治疗后，研究组患者孕早期、孕晚期的保胎成功率均高于对照组，再流产率明显低于对照组(P<0.05);治疗前，两组中医证候积分比较无明显差异(P>0.05),治疗后，研究组治疗后中医European Medical Information Framework证候积分水平低于对照组(P<0.05);研究组抗磷脂抗体总转阴率明显高于对照组(P<0.05)。结论 调冲汤加减联合低分子肝素钙治疗肾虚血瘀型复发性流产合并抗磷脂综合征的临床效果显著，促进抗磷脂抗体的转阴的同时提升保胎效果，临床治疗的安全性和有效性较高。

本研究通过搜集临床应用碳青霉烯类药物引起药物性血小板异常Fer-1不良反应的文献,分析碳青霉烯类药物引起SCH727965核磁药物性血小板异chlorophyll biosynthesis常病例及其临床特点,为碳青霉烯类药物临床安全用药提供参考。通过检索PubMed、Medline数据库、中国学术期刊全文数据库(CNKI)和维普中文科技期刊数据库,搜集碳青霉烯类药物亚胺培南和美罗培南致血小板异常的不良反应个例报道,并对患者基础情况(如性别和年龄)以及基础疾病、合并用药以及预后情况进行统计分析。共搜集到临床应用3例使用亚胺培南和17例使用美罗培南后发生了血小板异常的不良反应病例报道。统计发现20例不良反应中碳青霉烯类药物导致血小板升高的11例,导致血小板降低的9例。20例患者在停药后4–18天内转归,不良反应类型均为严重药品不良反应。碳青霉烯药物引起血小板异常的不良反应报道较少,但后果较严重,临床应用应特别注意碳青霉烯类药物血液方面的不良反应,早期及时监测并及时给予对症处理。

目的:调查山东省东营市2022年食品风险微生物污染现状。方法:在东营市各县区超市、零售店、农贸市场、网购、批发市场、餐馆、集体食堂、快餐店、小吃店和街头摊点等场所进行随机抽样,对所抽样的食品进行微生物检测,包括沙门氏菌、单核细胞增生李斯特https://www.selleck.cn/products/Nafamostat-mesylate.html氏菌、副溶血性弧菌、蜡样芽孢杆菌、铜绿假单胞菌和克罗诺杆菌。结果:2022年共采集12类食品,270份样本,总检出率为9.3%。其中,沙门菌3株、单核细胞增生李斯特氏菌3株、副溶血性弧菌3株、蜡样芽孢杆菌8株、铜绿假单胞菌2株和克罗诺杆菌6株。生禽肉、即食生制动物性水产品(海产品和淡水产品)、即食烘焙麦片、饮用水、外卖配送餐和学生午餐中的致病菌检出率分别为20.0%、15.0%、15.9HIV (human immunodeficiency virus)%、10.0%、18.8%和13.3%。结论:东营市食品存在不同程度的污染,生禽肉、即食生制动物性水产品(海产品和淡水产品)、即食烘焙麦片、直饮水、外卖配送餐和学生午餐具有较高的检出率,主要为沙门氏此网站菌、单核细胞增生李斯特氏菌、副溶血性弧菌、蜡样芽孢杆菌、铜绿假单胞菌和克罗诺杆菌等病原体的污染。为了保证东营市食品安全,应当加强食品监管,保证食品的安全性。

双孢蘑菇是世界范围内栽培规模最大及生产量最大的一种食药用菌。已有大量研究证实,多糖是双孢蘑菇主要的功能活性成分之一,具有显著的健康功效,如免疫调节活性、抗氧化活性、抗肿瘤作用、降血糖作用及肝保护作用等。通常,食用菌多糖的免疫调节活性与其结构特征密切相关。然而,关于双孢蘑菇多糖的结构特征与其免疫活性之间的潜在构效关系尚不完全清楚,极大限制双孢蘑菇多糖在功能性食品和医药领域的应用,值得进一步探讨。因此,为揭示双孢蘑菇免疫调节活性多糖的结构特征及其潜在免疫活性构效关系,促进双孢蘑菇多糖在相关领域的应用。本研究首先优化了双孢蘑菇多糖的提取条件;随后,建立双孢蘑菇多糖的快速分离技术,并对其理化性质进行分析;最后,采用体内外模型评价双孢蘑菇多糖的免疫调节活性,以探讨双孢蘑菇多糖潜在免疫活性构效关系。本研究主要结果如下:1.双孢蘑菇多糖的提取条件优化采用单因素和响应面实验优化热水提取双孢蘑菇多糖的提取条件。首先,通过单因素实验确定影响双孢蘑菇多糖提取率主要因素的最优水平。随后,根据单因素实验结果,进行响应面实验设计优化,并充分考虑实际操作条件,得到热水提取双孢蘑菇多糖的最佳提取条件为:液料比30 m L/g,提取温度86℃,提取时间117 min。在此最佳提取条件下,双孢蘑菇多糖的实际提取率为4.96%±0.08%,非常接近模型预测值5.02%。2.双孢蘑菇多糖的快速分离和理化性质分析采用分级醇沉联合膜分离技术分离得到两个双孢蘑菇多糖均一组分,并对其理化性质进行分析。研究结果表明,当采用乙醇终浓度为38%(v/v)时可获得均一组分1(ABP-1),当乙醇终浓度为68%(v/v)并结合分子截留量为100 k Da的超滤膜可获得均一组分2(ABP-2),实现双孢蘑菇粗多糖(ABP)中两个多糖组分的有效分离。ABP-1的得率为3.67%,高于ABP-2(0.211%),表明ABP-1是ABP的主要成分。ABP-1和ABP-2的总多糖含量分别为91.32%和88.16%,显著高于ABP(77.99%)。此外,ABP-1和ABP-2的分子量分别为8.95×10~6 Da和1.73×10~4 Da,与ABP中的组分1和组分2对应。这些结果表明,分级醇沉联合膜分离技术可有效分离双孢蘑菇粗多糖。随后,进一步通过单糖组成、红外光谱和核磁共振光谱分析ABP及其分离均一组分(ABP-1和ABP-2)的结构特征。结果表明,ABP主要含有α-(1→4)-D-Glcp、α-(1→6)-D-Glcp、β-(1→6)-D-Glcp、β-(1→4)-D-Glcp和α-(1→6)-D-Galp等糖残基。ABP-1是一种α-(1→4)-D-葡聚糖,主要含有α-(1→4)-D-Glcp和α-(1→6)-D-Glcp等糖残基。ABP-2是一种葡半MK-1775使用方法乳聚糖,主要含有α-(1→6)-D-Glcp、β-(1→4)-D-Glcp、β-(1→6)-D-Glcp和α-(1→6)-D-Galp等糖残基。结果表明,从双孢蘑菇粗多糖中分离得到的ABP-1和ABP-2的结构特征存在明显差异。3.双孢蘑菇多糖的体内外免疫调节活性评价首先,采用RAW 264.7巨噬细胞模型评价ABP及其分离均一组分(ABP-1和ABP-2)的体外免疫调节作用。随后,进一步采用环磷酰胺(CTX)诱导的免疫低下小鼠模型,评价ABP及其分离均一组分体内免疫调节作用。研究结果表明,ABP及其分离均一组分均具有良好的体内外免疫增强活性。细胞实验表明,ABP及其分离均一组分在所有测试浓度下均对RAW 264.7巨噬细胞没有毒性且可刺激其释放免疫分子,但ABP-1和ABP-2在体外显示出比ABP更强的免疫增强活性,即促进一氧化氮(NO)、白细胞介素6(IL-6)和抗肿瘤坏死因子α(TNF-α)的释放,且ABP-Epigenetics抑制剂2效果最佳。动物实验表明,ABP及其分离均一组分对CTX引起小鼠的免疫器官损伤具有保护作用,均可增加脾脏和胸腺指数,而ABP-2增强效果最佳,且ABP-2对胸腺指数增加有显著效果。同时,ABP及其分离均一组分也能有效改善脾脏组织病理变化。此外,ABP及其分离均一组分能改善CTX诱导的小鼠血清中NO、IL-6和TNF-α含量的降低,但ABP处理的效果显著低于ABP-1和ABP-2,且ABP-1和ABP-Infectivity in incubation period2处理的效果差异无统计学意义。体内外研究结果均表明,与ABP相比,ABP-1和ABP-2具有更强的免疫增强活性,且ABP-2的免疫增强活性稍高于ABP-1,但无显著统计学差异。ABP-1和ABP-2的免疫增强活性显著高于ABP,这可能是由于分离后多糖的纯度提高和分子量降低。而ABP-1和ABP-2之间的这种活性差异可能是由于二者结构特征的不同,即单糖组成、分支度和糖苷键。具体表现为:ABP-1是一种α-(1→4)-D-葡聚糖,主要由葡萄糖组成且具有线性的α-(1→4)-Glcp骨架以及较低的分支度;ABP-2是一种葡半乳聚糖,由摩尔比约为1:1的葡萄糖和半乳糖组成且具有低分子量。研究结果表明,尽管ABP-1和ABP-2结构差异明显,但均具有显著的免疫增强活性。此外,ABP-1为ABP的主要组分,推测ABP-1为双孢蘑菇多糖免疫调节活性的主要贡献成分。研究结果有利于了解双孢蘑菇多糖的潜在免疫活性构效关系,为基于双孢蘑菇多糖的免疫增强功能性食品和药品开发提供科学理论依据和技术支撑。

【目的】CalS家族在调控植物胼胝质合成方面具有重要作用，鉴定芍药CalS家族成员，并进行生物信息学和表达模式分析，为芍药属远缘杂交不亲和研究提供依据。【方法】通过荧光显微镜观察自交、杂交柱头内花粉管生长过程及花粉萌发情况；测定柱头所含胼胝质、内源脱落酸含量（ABA）以及β-1,3-葡聚糖酶活性；分段克隆8个PlCalS并进行序列分析；使用Expasy、MEME、TBtools、MEGA 7.0等软件和在线工具预测PlCalS家族成员蛋白质基本理化性质、保守基序并构建系统发育进化树；利用qRT-PCR技术检测8个PlCalS在自交24 h、杂交24 h、杂交36 h的相对表达水平；对CalS5进行多序列比对并构建系统进化树，分析PlCalS5响应不同浓度ABA处理的表达特征。【结果】花粉管荧光显微观察发现杂交柱头内发生较为严重的胼胝质堵塞从而影响花粉管的正常生长及花粉的萌发。测定柱头内胼胝质含量发现多数时期自交柱头均低于同时期杂交柱头的含量，柱头内β-1,3-葡聚糖酶活性、ABA含量变化均具有一定的规律性。通过对结构域的完整性分析鉴定芍药PlCalS基因家族成员，后经同源性比对分析命名8个CalS，均含有15个保守基序且在PlCalS基因家族中的分布类似。多物种系统进化关系表明，CalS家族可分为3个分支，PlCalS家族仅分布在2个分支，其中PlCalS5与牡丹、拟南芥和番茄的CalS5亲缘关系较近。生物信息学分析结果表明8个家族成员编码1 745—1 951个氨基酸，原子总数为28 583—31 870个，等电点为7.99—9.13。对转录组FPKM值的分析表明，PlCalS家族成员在相同时期杂交处理中有较高表达，相同处理情况下在杂交36 h时高表达；荧光定量PCR表明，8个基因的相对表达量在自交24 h时均低于杂交24 h和杂交36 h。经两个浓度的ABA处理，发现PlCalS5对高Pidnarulex IC50浓度的ABA更为敏感。【结论】芍药CalS家族有8个cancer medicine基因成员且具有较高的保守性，8个家族成员对芍药胼胝质的生成起重要调控作用；大部分时期PlCalS在杂交柱头的表达量高于自交柱头，可能参与胼JNJ-42756493供应商胝质异常沉积的过程；芍药杂交柱头异源花粉的刺激可能会增强某个ABA合成途径，ABA可能通过正调控胼胝质基因诱导胼胝质的积累，从而抑制花粉的萌发与花粉管的伸长，影响授粉亲和性。

背景：自体富血小板血浆的临床应用受患者本身以及血小板数量和活性的限制。由采供血机构制备的浓缩血小板，来源广泛，可程序化、标准化制备，其临床应用日益广泛。目的：综述白膜法制备浓缩血小板治疗慢性难愈性创面的影响因素。方法：应用计算机检索2000年1月至2023年4月PubMed数据库、中国知网、万方医学网与血小板相关的文章，中更多文检索词为“异体血小板，白膜法，皮肤溃疡，难愈性创面”，英文检索词为“allogeneic plateleimmunoaffinity clean-upts(concentrate),buffy-coat method,skin ulcer,refractory wounds”。筛选标题和摘要，查阅全文，最后纳入符合主题标准的文献有51篇。结果与结论：(1)采供血机构供应的浓缩血小板对糖尿病足创面、压疮、下肢静脉溃疡等慢性难愈性创面具有一定的效果，主要体IACS-10759说明书现在缩小溃疡面积、缩短伤口愈合时间，特别是在浓缩血小板使用的前2周，促愈合效果显著；(2)制备浓缩血小板的原料保存条件(全血过夜/白膜过夜、振荡/静置时间)、离心条件(离心参数、装罐方式)以及血袋的结构等会影响浓缩血小板的浓度，间接影响异体浓缩血小板的疗效；(3)异体浓缩血小板对慢性难愈性创面治疗的研究也存在一些问题，现有证据样本量较小，结果缺乏一定说服力，浓缩血小板促进不同创面愈合的最佳制备参数、最佳剂量以及治疗方案未知，还需要更多随机、多中心临床试验进行验证。