Author: admin

牙周Liproxstatin-1试剂炎是人类最常见的口腔疾病之一,菌斑附着和牙石堆积等外源性刺激为其主要致病因素,但牙周炎发生与否和牙周组织损伤的程度及范围与机体的应答反应有密切关联。基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)参与了牙周组织的破坏和重塑,MMPs主要由结缔组织、促炎细胞和子宫胎盘细胞产生,家族内部成员在牙周炎症期间表达上调,并通过直接对牙周组织中细胞外基质蛋白进行降解,并对信号传导分子(细胞因子和趋化因子)进行加工,调节其生Alpelisib物学功能,间接造成炎症破坏,TIMPs作为MMPs的天然和内源性Ethnoveterinary medicine抑制剂,可以抑制MMPs酶原活化和MMPs活性,二者之间失衡可促进牙周病的进展。现就MMPs及其抑制物的基本生物学特征和在牙周炎发生发展中作用的研究现状进行总结,阐述其在牙周炎诊治中的应用价值,为进一步探索牙周炎的发病过程提供可靠的理论依据,同时为牙周炎的临床防治提供新的思路。

研究背景与目的:乳腺癌在女性肿瘤中发病率第一,病死率位居第二,三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)属于乳腺癌众多分型中难治的类型,TNBC因缺乏雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)和人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor2,Her2),所以对经典的内分泌治疗和Her2靶向药物治疗无效,一旦发生远处转移、化疗药耐药或抵抗,可供选择的治疗方案十分有限,中位生存期不足18个月,严重威胁患者生命。虽然近年来免疫检查点抑制剂的治疗,使得部分肿瘤患者从中获益,但根据多中心随机对照试验显示,TNBC患者对PD-1抗体的治疗效果难以令人满意,所以目前临床中TNBC仍以化疗和手术治疗为主。近年来,随着单细胞测序技术的开展及针对肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)的深入研究,人们逐渐发现TNBC难治除了与肿瘤细胞自身特性相关之外,还与TME中复杂细胞组分相互串扰有关。TNBC的TME细胞组分包括:肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)、癌症相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAFs)、内皮细胞和构成肿瘤脉管系统的周细胞、炎症细胞及骨髓衍生细胞等,其中TAMs和CAFs是TME的主要组成。TAMs通过刺激血管生成、释放促炎细胞因子、抑制细胞毒性T细胞反应及重塑细胞外基质(extracellular matrix,ECM)参与化疗抵抗和癌症的发展。CAFs在TME中可产生胶原,构建起物理屏障,保护肿瘤细胞免受药物杀伤。α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)是CAFs活化标志物之一,在乳腺癌中α-SMA阳性细胞在肿瘤基质区域的高表达,往往提示与预后不良相关。令人意外的是,在胰腺导管癌模型中,靶向α-SMA~+CAFs表现出免疫抑制性、肿瘤呈低分化性和小鼠生存期缩短。因此充分的了解肿瘤细胞和相关基质之间的双向通讯,才能有望提升肿瘤治疗敏感性和改善患者预后。骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是由SPP1基因编码的一种多功能磷酸糖蛋白,可由T细胞、B细胞、NK细胞、髓细胞、成骨细胞、骨细胞、上皮细胞和神经元等多种细胞产生,广泛参与人体生理与病理过程。OPN在多种癌症中均有过度表达,包括肺癌、前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌和肝癌。既往研究表明,OPN可通过与整合素和/或CD44受体结合后,具有维持肿瘤细胞干性、招募巨噬细胞浸润、重编程正常成纤维细胞向CAFs分化和促进肿瘤远处转移等作用。但在免疫系统健全的TNBC模型中,肿瘤细胞来源OPN对CAFs的调控,是否完全依赖于整合素或CD44?OPN除了与成纤维细胞的直接作用,是否还通过其他信号通路或介体参与CAFs的活化?靶向肿瘤细胞OPN是否能够缓解肿瘤基质纤维化程度,同时增加肿瘤对化疗药的敏感性?这些问题尚不十分清楚,还需进一步探索。因此本研究旨在通过构建敲除OPN的TNBC细胞株,探索肿瘤细胞来源OPN与肿瘤基质纤维化间的调控机制,并通过体内实验验证OPN与CAFs的串扰对化疗药抵抗的影响,从而为未来靶向肿瘤基质纤维化的新药开发或治疗方案提供策略支持。研究方法:1、根据肿瘤纤维化程度的差异,选取四种小鼠肿瘤细胞系进行转录组测序分析,结合Gene Expression Profiling Interactive Analysis(GEPIA)数据库中人类乳腺癌数据结果,明确OPN与肿瘤纤维化间的相关性。2、利用CRISPR-Cas9系统构建稳定敲除OPN的小鼠TNBC细胞系,并通过体外实验观察敲除OPN对4T1肿瘤细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。3、利用慢病毒构建稳定过表达OPN的小鼠黑色素细胞瘤B16-F0细胞株,并通过体外实验评价过表达OPN对B16-F0细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。4、建立小鼠4T1和B16-F0模型,通过流式细胞术及免疫组化染色检测,观察敲除或过表达肿瘤细胞OPN对TAMs比例和肿瘤基质纤维化的影响,同时分析荷瘤小鼠脾脏巨噬细胞及外周血中单核细胞比例。5、通过巨噬细胞耗竭动物模型,利用流式细胞术、实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹、免疫荧光及免疫组化染色等检测方法,探索肿瘤细胞来源OPN和TAMs对肿瘤基质纤维化的调控关系。6、利用流式分选仪分选出小鼠4T1-WT肿瘤中TAMs(CD45~+CD11b~+F4/80~+)和CAFs(CD45~-CD90.2~+),探索TAMs对CAFs活化及迁移的作用机制,并通过蛋白质免疫印迹实验进行验证,最后通过体外凋亡实验和体内实selleck抑制剂验观察4T1-WT及4T1-SPP1-KO肿瘤对多西他赛的敏感性。研究结果:1、在4种小鼠肿瘤中,4T1细胞OPN表达量最高且肿瘤基质纤维化程度最重,与人TNBC样本中OPN与CAFs生物标志物(ACTA2、S100A4和FAP)表达趋势吻合,证明可用4T1模型研究OPN与肿瘤基质纤维化间的关系。2、利用CRISPR-Cas9成功构建4T1-SPP1-KO细胞株,敲除OPN不影响4T1细胞体外增殖速度和总凋亡比例,但4T1-SPP1-KO细胞迁移能力较4T1-WT细胞减低。3、利用慢病毒构建稳定过表达OPN的B16-SPP1-OE细胞株,过表达OPN未增加B16-F0细胞的体外增殖、总凋亡比例及迁移能力。4、在4T1模型中,4T1-SPP1-KO相对4T1-WT肿瘤中TAMs比例明显减少,同时肿瘤基质纤维化程度得到显著缓解。在B16-F0模型中,B16-SPP1-OE较B16-EV肿瘤内TAMs比例增加,且肿瘤基质纤维化程度加重。5、利用Clodronate-Liposomes清除小鼠体内巨噬细胞后,可显著抑制4T1-WT体内肿瘤生长速度、降低TAMs比例,并缓解肿瘤基质纤维化程度,但体内巨噬细胞耗竭,并不能进一步减低4T1-SPP1-KO荷瘤小鼠肿瘤内TAMs比例及肿瘤基质纤维化程度,说明肿瘤细胞来源OPN是4T1肿瘤促进TAMs浸润的主要因素,且OPN对肿瘤基质纤维化的调控是通过TAMs介导的间接作用。6、通过迁移实验发现TAMs可通过CSpatiotemporal biomechanicsCL5-CCR5信号轴招募CAFs迁移,通过蛋白质免疫印迹明确TAMs通过TGF-β1/c-Rel信号刺激CAFs中α-SMA、成纤维细胞特异蛋白1(FSP1)和平足蛋白(PDPN)的表达上调;体外CAFs和肿瘤细胞共培养后对多西他赛诱导的凋亡存在抵抗,体内实验发现敲除肿瘤细胞OPN可提高4T1肿瘤对多西他赛的敏感性。研究结论:本研究通过构建4T1-SPP1-KO细胞株发现,敲除肿瘤细胞OPN可显著减慢肿瘤生长速度、降低TAMs比例及缓解肿瘤纤维化程度,并通过耗竭荷瘤小鼠巨噬细胞的体内实验证实,肿瘤细胞来源OPN是促进TAMs浸润的主要因素,TAMs可通过CCL5-CCR5信号轴招募CAFs迁移,同时TAMs在OPN的作用下通过TGF-β1/c-Rel信号通路刺激CAFs过表达α-SMA、FSP1和PTamoxifen试剂DPN,继而促进4T1肿瘤对多西他赛产生凋亡抵抗。综上,在TME中这些复杂的信号串扰共同造成TNBC病情进展。

目的https://www.selleck.cn/products/VX-765.html：探讨肝动脉化疗栓塞（TACE）联合门静脉支架及碘125粒子链序贯索拉非尼治疗肝细胞肝癌合并门静脉主干癌栓的临床疗效。方法：选取40例肝细胞肝癌伴门静脉主干癌栓患者，按随机数字表法分为观察组和对照组各20例，观察组予TACE序贯索拉非尼联合门静脉支架及碘125粒子链治疗，对照组予TACE联合门静脉支架及碘125粒子链治疗。对比观察组和对照组患者治疗前后血清PIVKA-II、AFP水平、近期疗效、36个月生存情况。结果：观察组治疗Puromycin价格后的总体有效率为90%，对照组为55%（P＜0.05）；治疗后两组血清PIVKA-II、AFP水平低于本组治疗前的水平，且观察组明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；观察组和对照组中位生存时间分别为20月和11月，观察组的生存结局优于对照组（P＜0.Vancomycin intermediate-resistance05）。结论：TACE序贯索拉非尼联合门静脉支架及碘125粒子链治疗肝细胞肝癌伴门静脉主干癌栓，可延长患者生存时间，具有良好的临床应用前景。

目的 探讨新型磷酸二酯酶5抑制剂CPD1对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteric obstruction, UUOIACS-10759纯度)诱导的肾纤维化小鼠肾脏组织结构损伤及间质纤维化的影响。方法 8周龄♂C57BL/6 J小鼠随机分为假手术组、模型组、CPD1治疗组，手术结扎模型组和治疗组小鼠左侧输尿管，假手术组仅分离输尿管而不结扎。造模2 h后，给予CPD1(5 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃治疗，持续7 d。通过组织病理学染色和Western blot,观察CPD1治疗对UUO小鼠患侧肾脏组织结构病变和纤维化标志蛋白：纤维连接蛋白(fibronectin, FN)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ)、肾损伤分子-1(kidney injury molecule 1,Kim-1)表达及分布的影响。结果 与假手术组相比，UUO组小鼠患侧肾组织中肾小管扩张，可见明显空泡变性，炎症浸润增加，FN、α-SMA、collagen-I及Kim-1蛋白的表达明显增加(PPlant-microorganism combined remediation<0.05);CPD1可明显改善UUO模型小鼠患侧肾脏的结构，降低胶原纤维蛋白的沉积，纤维化标志蛋白FN、α-SMA、collagen-I及Kim-1的表达均得到明显抑制(P<0.05)。结论 磷酸二酯酶5抑制剂CPD1通Vorinostat半抑制浓度过下调细胞外基质ECM的沉积，减少Kim-1介导的肾损伤，改善输尿管梗阻诱导的肾间质纤维化，其具体的作用机制还有待进一步研究。

目的:分析动态增强乳腺磁共振在乳腺疾病诊治中的应用价值。方法:选取张家港市第一人民医院Second generation glucose biosensor2020年5月—2022年7月期间诊断的45例乳腺疾病患者为研究对象,经过手术病理诊断证实乳腺癌25例,20例良性乳腺疾病,临床疾病诊疗阶段实施动态增强乳腺磁共振检查,将诊断结果和病理结果做比较,分析在乳腺疾病诊断过程中的应用价值。结果:45例乳腺疾病患者中经过病理检查结果显示:乳腺癌患者25例、良性乳腺疾病20例,动态增强乳腺磁共振检查结果显示:乳腺癌疾病患者27例、良性乳腺疾病18例,动态增强乳腺磁共振检查准确率ATM/ATR抑制剂为91.11%(41/45),特异度96.00%(24/25),灵敏度85.00%(17/20),Kappa=0.818,与病理结果高度一致。乳腺癌患者动态增强乳腺磁共振形态学征象四周血管增粗迂曲、同侧腋窝淋巴结肿大显著增强、病灶早期增强检出率高于良性乳腺疾病患者,差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌患者皮下脂肪间隙模糊征象检出率低于良性乳腺疾病患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在乳腺疾病诊治中应用MLN8237作用动态增强乳腺磁共振诊断,能够提升检查准确率、特异度、灵敏度,为临床实施手术治疗提供形态学诊断依据。

口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)是感染猪、牛、羊等偶蹄innate antiviral immunity动物的烈性病原，严重危害畜牧业的发展以及相关产品的对外贸易。FMDV包含七个血清型，其中A型FMDV抗原结构变异最大，因此解析A型FMDV保守抗原结构对广谱疫苗分子设计具有重要指导意义。据此，本文作者利用冷冻电镜技术解析了A型FMDV与中和性抗体P22C复合物的三维结构。发现P22C结合于A型FMDV颗粒的三重轴附近，接触面多数氨基酸位于衣壳蛋白VP2 B-C环，其次是E-F/H-I环以及VP3 B-B “结节”上不连续的少量氨基酸。其中，VP2的72、77与195位RAD001半抑制浓度氨基酸通过氢键与抗体相PR-171浓度互作用，可能是影响结合的关键位点。进一步的结合自由能分析支持该猜测，提示72位点是组成抗原表位的关键决定簇，而H77W和S195L突变则可进一步降低结合自由能从而提高与抗体的亲和力。结合自由能分析也说明了P22C具有较高的成熟度。研究结果揭示了A型FMDV的抗原结构信息，为FMDV疫苗分子设计提供了一个重要靶点。

肠道菌群与人体共同协作,菌群在帮助宿主对食物中的营养成分进行深入消化与利用的同时,也一同分享宿主为其提供的生存空间与营养物质,这是微生物与宿主之间形成的一种互利共生的特殊共存方式。这样的精妙结合,不仅使得微生物在人体中形成了固有的菌群结构,得到赖以生存的生物基位,也通过自身的功能代谢以及群体信号,为宿主在免疫、营养等方面提供所必需的调节与支撑。围绕药食同源天然植物的健康作用研究,目前大多着眼于对其功能组分的分离提取与活性评价。如植物多糖、多酚与黄酮等活性功能成分。然而在传统中医药中,植物多以全食态进行复配应用。目前在菌群水平研究中发现,对于影响人体健康水平的菌群模式并非固定且依赖于某一单菌种变化,微生物之间的Antibiotic urine concentration生态竞争与代谢调控均以群体的方式与宿主持续进行共进化。药食同源天然植物,对菌群的Decitabine调节作用主要还是依靠其全食态,这也从菌群这个微观生态环境的角度为传统中医学理论中对于中药食材即天然植物全食状态下的药效提供了重要佐证。因此,对于药食同源天然植物的开发与利用,应当结合www.selleck.cn/products/diabzi-sting-agonist-compound-3菌群整体的调控进行分析,并对其全食状态与活性功能组分有充分的认识与评价。

设计合成了一种四足针尖状铁钯纳米颗粒(简称TFPs),分别通过诱导乳腺癌细胞自噬和巨噬细胞释放促炎因子,实现在光声成像引导下的乳腺肿瘤细胞铁死亡协同免疫治疗.首先,该新型TFPs具有优异的光学吸收和较高的光热转换效率,是良好的光声成像造影剂.其次, TFPs具有过氧化物酶/谷胱甘肽氧化酶模拟酶性能,能原位催化肿瘤区过表达过氧化氢,产生羟基自由基,并同时下调胞内谷胱甘肽水平,协同诱导细胞铁死亡.此外,其独特的针状形态可以进一步确认细节触发肿瘤细胞自噬,加快铁蛋白降解,释放铁离子,进而增效铁genetic conditions死亡;同时,特殊的尖状结构能触发巨噬细胞释放促炎细胞因子,增效放大免疫效应,在与PD-L1检查点抑制剂联合使用后,取得最强的抗肿瘤效果.这项工作不仅开发了一种高效的铁死亡selleck诱导剂,也为在纳米尺度调控肿瘤细胞自噬/免疫功能提供了一种全新的策略.

目的 探讨二甲双胍(metformin, Met)能否通过ERK/p38 MAPK信号通路抑制白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的大鼠软骨细胞损伤。方法 胰酶消化法分离出原代大鼠软骨细胞，贴壁培养至第3代备用。以浓度为10 ng/ml IL-1β刺激软骨细胞构建软骨细胞损伤模型，并以软骨细胞活力下降及凋亡增加作为模型构建成功的Dorsomorphin分子量评判标准。用不同浓度的Met(0.01,0.1,1.0,10 mmol/L)分别对软骨细胞损伤模型进行干预，以CCK-8法筛选出Met的最适干预浓度，并以此浓度进行后续实验。取第3代软骨细胞按干预方式分为3组：control组(培养基作用24 h)、IL-1β组(IL-1β作用24 h)、IL-1β+Met组(先后用IL-1β和Met各作用24 h)。用流式细胞术检测细胞凋亡率，用Western blot检测细胞中IL-1β、COX-2、MMP-13、p-p38MAPK、p-ERK的蛋白表达。结果 与control组比较，IL-1β组软骨细胞活力降低(P<0.001)、凋亡增加(P<0.001),说明造https://www.selleck.cn/products/INCB18424.html模成功。1.0 mmol/L的Met对软骨细胞损伤模型的干预效果最佳，故以1.0 mmol/L为最适干预浓度。与IL-1β组比较，IL-1β+Met组软骨细胞活力增trichohepatoenteric syndrome高(P<0.01)、凋亡减少(P<0.05)。与control组比较，IL-1β组IL-1β、COX-2、MMP-13、p-p38MAPK和p-ERK蛋白表达增加(P<0.01);与IL-1β组比较，IL-1β+Met组IL-1β、COX-2、MMP-13、p-p38MAPK和p-ERK蛋白表达降低(P<0.05)。结论 二甲双胍(Met)可抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤，其机制可能与ERK/p38 MAPK信号通路下调有关。

目的:长链非编码RNA(LncRNAs)与心肌肥大的发生机制密切相关。N~6-甲基腺苷(m~6A)修饰是RNA修饰中丰度最高的类型,在心肌肥大的发生过程中起着重要作用。然而,LncRNA通过m~6A修饰在心肌肥大方面尚未见报道,有待阐明。研究方法:第一部分:1.采用血管紧张素2(AngⅡ)建立H9c2心肌肥大模型:通过RT-q PCR、Western blot检测相关基因表达水平。2.分别应用si MIAT和MIAT质粒转染H9c2、si Ythdf2和Ythdf2质粒转染H9c2:通过RT-q PCR,Western blot,细胞免疫荧光实验,来检测改变MIAT或Ythdf2表达水平对心肌肥大表型的影响。第二部分:1.通过生物信息学预测MIAT和Ythdf2是否存在相互作用,以及可能的结合位点。RIP-q PCR、RNA pull down检测MIAT是否与Ythdf2结合;Western blot检测MIAT是否可以调控Ythdf2的表达;2.通过生物信息学预测Ythdf2和CPT-1a是否存在相互作用;免疫共沉淀证明Yselleck化学thdf2和CPT-1a是否存在相互作用;通过荧光原位杂交和细胞免疫荧光观察MIAT、Ythdf2和CPT-1a的共定位。3.通过过表达(敲减)MIAT的同时敲减(过表达)Ythdf2等回复实验,探究MIAT对Ythdf2的调控关系:RT-q PCR,Western blot,细胞免疫荧光实验,检测其对表型的影响。利用放线菌素/RT-q PCR,计算CPT-1a m RNA寿命,测定CPT-1a m RNA稳定性。结果:第一部分:1.在AngⅡ的刺激下,H9c2细胞面积明显增大,ANP、BNP、β-MHC的m RNA和蛋白表达水平明显升高。MIAT和Ythdf2的表达水平显著增高。2.在AngⅡ诱导的心肌肥大细胞模型中敲减MIAT或Ythdf2,均能够抑制ANP、BNP与β-MHC的m RNA和蛋白表达,缩小细胞面积,提示敲减MIAT或Ythdf2能够抑制AngⅡ促心肌肥大的作用。相反,过表达MIAT或Ythdf2能够促进AngⅡ促心肌肥大的作用。第二部分:1.通过WGCNA分析发现MIAT和Y更多thdf2之间存在相互作用,RIsearch预测了具体的结合位点;RIP-q PCR和RNA pull down证实MIAT结合Ythdf2;Western blot发现MIAT可以正相关地调控Ythdf2的表达。2.通过WGCNA分析发现CPT-1a是Ythdf2可能调节的靶基因;免疫共沉淀证明Ythdf2和CPT-1a结合;荧光原位杂交和细胞免疫荧光观察MIAT、Ythdf2和CPT-1a共定位于细胞质。3Primary mediastinal B-cell lymphoma.双干预MIAT和Ythdf2,挽救了单干预MIAT对H9c2心肌细胞肥大的影响。证明MIAT可通过Ythdf2调控心肌肥大的表型和下游靶基因PPAR,CPT-1a的表达。结论:LncRNA MIAT、m~6A甲基化阅读蛋白Ythdf2参与AngⅡ诱导的心肌肥大。MIAT可以特异性结合Ythdf2,提高了m~6A修饰水平,降低其靶基因PPAR和CPT-1a m RNA稳定性和表达,从而促进心肌肥大。这些发现证实了LncRNA MIAT-Ythdf2-PPAR-CPT-1a调控途径在心肌肥大中的关键作用。