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目的：探讨褪黑素（MLT）是否能通过减轻随意皮瓣的铁死亡促进随意皮瓣存活。方法：将20只6～8周龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组和MLT组，观察术后3、7 d各组皮瓣存活情况及血流动力学。取皮瓣组织评估水肿情况，通过病理学染色、透射电子显微镜观察、免疫印迹等检测方法探讨MLT对随意皮瓣存活的作用及对铁死亡的调节作用。为探讨核红细胞因子2相关因子2(Nrf2)在MLT抑制随意皮瓣铁死亡中起MCC950体内实验剂量到的作用，使用Nrf2抑制剂ml385作为抑制剂，随机将45只6～8周龄的C57BL/6小鼠分为对照组、MLT组和MLT+ml385组，观察形态学变化并检测相关生化指标变化。结果：各组在术后第3、7天都出现远端皮瓣坏死。MLT组较对照组增加了皮瓣存活面积（P<0.05）及皮瓣血流灌注（P<0.05）。HE染色可见MLT组皮瓣内小血管含量多；Masson染色见真皮层纤维排列规整；免疫组织化Panobinostat小鼠学染色可见MLT组较对照组CD34阳性小血管增多（P<0.05），凋亡相关蛋白减少（P<0.05），抗氧化蛋白含量增加（P<0.05）。透射电镜可见皮瓣组织中铁死亡特征性改变。组织脂质过氧化物（LPO）检测、组织Fe含量检测、谷胱甘肽(GSH)水平以及Western blot结果表明，与对照组相比，MLT组GSH上调（P<0.05），组织Fe积累降低（P<0.05）,LPO减少（P<0.05）。联合使用ml385后，Western blot结果表明，与MLT组比，MLT+ml385组中Nrf2下调（P<0.05），抗氧化指标HO-1下调（P<0.05），抗脂质过氧化指标GPX4下调（P<0.05）,Fe结合蛋白轻链（FTL）下调（P<0.05）。结论：MLT治疗有利于小鼠随意皮瓣的存活；铁死亡是影响随意皮瓣存活的因素之一，抑制铁死亡能够促进随意皮瓣存活；MLT抑制铁死亡依赖于激活Nrf2提高抗氧化能力减轻脂质过氧化并genetic approaches促进Fe代谢。

目的探讨不同高浓度葡萄糖下铁死亡对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响以及CCM3基因在其中可能发挥的作用。方法结合体内外实验,以不同高浓度的葡萄糖体外MC3抑制剂培养卵巢癌A2780细胞24h,通过平板克隆、细胞划痕和transwell实验监测卵巢癌细胞的增殖和迁移能力变化;通过Calcein AM/PI双染试剂盒对A2780细胞进行双重染色检测卵巢癌细胞的死亡情况;采用JC-10检测卵巢癌细胞的线粒体膜电位变化;用组织铁试剂盒将高价铁转化成亚铁从而测定A2780卵巢癌细胞中的铁含量;用western blot评估GPX4、COX2和CCM3等蛋白给糖干预24h后表达水平的变化;通过裸鼠皮下成瘤实验评估A2780细胞肿瘤形成情况,同时给生成的肿瘤组织进行HE染色以评估荷瘤小鼠的血管生成能力。结果与正常受试者随机血糖临界上限(11.1mM)相比,体外高浓度葡萄糖处理24h后的卵巢癌细胞其增殖、迁移及侵袭能力均受到不同程度的抑制,并伴有细胞死亡、线粒体膜电位异常、细胞内的铁异常积累等现象。在western blot实验中,随着体外给糖浓度的升高,铁死亡关键调节因子GPX4的表达水平被下调,COX2的表达水平增加,同时与细胞凋亡相关的蛋白CCM3表达水平降低。当给予铁死亡诱导剂ML385时也出现相似结果,即GPX4表达水平下调,COX2表达水平上调,但CCM3的表达水平呈相反趋势。在裸鼠皮下成瘤实验中观察肿瘤生长情况和血管生成水平发现给糖组并未有显著性差异,这可能是由于小鼠的操作和个体差异;而ML385处理组随着干预浓度的升高,卵巢癌3-MA细胞的生长能力和血管生成水平由于引起细胞铁死亡而受到抑制。结论高浓度葡萄糖可能通过CCM3基因诱导卵巢癌A2780细胞发生铁死BIOPEP-UWM database亡,并以不同于ML385处理的方式最终导致细胞凋亡从而影响其增殖和迁移能力。

为了探索洋葱蜡粉缺失突变体的特征特性和形态学应用价值，选择20份无蜡粉材料进行田间表型特征观察及叶面蜡质成分分析，并对突变株进行AMG510纯度SSR引物筛选。结果表明，洋葱无蜡粉叶片呈亮绿色，有光泽，遗传分析发现叶片蜡粉受隐性基因控制；突变株表现为苗期长势相对弱，产量与品种特性相关；突变株叶片表现出无或少蓟马危害症状，不使用杀虫剂能够达正常洋葱使用杀虫剂抗葱蓟马的效果，并建立无蜡粉洋葱抗蓟马评价标准；叶表超微结构观察及蜡粉成分分析发现：突变体叶表面蜡粉Renewable biofuel严重缺失，有少量蜡粉，不足为人眼观察到，但在抽薹开花末期，花薹表面有一层淡淡光亮白色蜡粉。气相色谱分析叶表面蜡质主要成分均为酰胺、酚类、酮类、烃类、酯类，但无蜡粉叶片中16-三十一酮含量差异显著，由相对含量52.66%降至2.79%,导致叶表面无蜡粉现象；对MG132半抑制浓度19061单株自交分离的有蜡粉与无蜡粉植株进行SSR引物筛选，引物196和304可作为单株特异标记能够将19061有蜡粉与无蜡粉区分，但不能区分其他无蜡粉与有蜡粉材料。因此，洋葱无蜡粉突变体初步研究为洋葱形态学标记和杂交制种应用、抗葱蓟马研究奠定重要基础。

目的 探讨表观扩散系数(ADC)值对子宫内膜非典型增生及子宫内膜癌保留生育能力治疗疗效评估。方法 回https://www.selleck.cn/products/vx-661.html顾性搜集2015年1月至2021年12月保留生育能力治疗的子宫内膜非典型增生及子宫内膜癌患者资料，所有患者分别于治疗后3个月和6个月行MRI和宫腔镜复查，MRI早于宫腔镜。以宫腔镜病理结果为标准，重复测量方差分析法比较治疗前、治疗后3个月、治疗后6个RAD001抑制剂月病变及相应部位内膜ADC值。结果 子宫内膜癌患者5例，治疗前、治疗后3个月和治疗后6个月的肿瘤及治疗后相应部位内膜ADC值分别为Biomass management(0.8±0.06)×10~(-3)mm~2/s、(1.1±0.03)×10~(-3)mm~2/s、(1.2±0.08)×10~(-3)mm~2/s,三组间ADC值差异均有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜非典型增生患者5例，治疗前、治疗后3个月和治疗后6个月的内膜ADC值分别为(1.1±0.06)×10~(-3)mm~2/s、(1.1±0.01)×10~(-3)mm~2/s、(1.3±0.09)×10~(-3)mm~2/s,治疗后3个月和治疗后6个月较治疗前ADC值差异无统计学意义(P>0.05),但治疗后6个月较治疗后3个月ADC值差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ADC值可用于子宫内膜癌和子宫内膜非典型增生保留生育能力治疗疗效评估，在治疗后6个月评估更有意义。

目的 分析急性缺血性脑卒CHIR-99021抑制剂中患者血小板计数与白细胞计数、颈动脉狭窄及卒中严重程度的相关性。方法 回顾性分析2018年2月至2021年3月首都医科大学附属北京友谊医院连续收治的445例急性缺血性脑卒中患者的血生化和临床资料，血小板计数分为≥300×10~9/L组(增高组)和血小板计数正常组[(100～300)×10~9/L],比较两组患者实验室指标及颈动脉狭窄和卒中严重程度，采用Pearson法分析Cryptosporidium infection血小板计数与颈动脉狭窄、卒中发病时和第14天美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性。结果 增高组患者血白细胞计数和中性粒细胞绝对值分别为(8.06±1.80)×10~9/L、5.50±1.57,明显高于正常组[(7.01±2.24)×10~9/L、4STM2457使用方法.64±2.03],差异均有统计学意义(P<0.05)。增高组颈动脉重度狭窄及闭塞患者的比率为87.27%,明显高于正常组(39.49%),差异有统计学意义(P<0.05)。增高组患者卒中发病时和第14天的NIHSS评分分别为(12.98±4.17)、(9.98±3.37)分，均明显高于正常组[(3.43±1.71)、(2.98±1.36)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson分析可见，血小板计数与颈内动脉狭窄比例、卒中后入院时、卒中第14天的NIHSS评分均呈正相关性(r=0.547、0.455、0.407,P<0.05)。结论 急性缺血性脑卒中患者血小板计数高于正常者。血小板计数增高患者白细胞计数和中性粒细胞绝对值明显增高；血小板计数增高与急性缺血性脑卒中患者颈内动脉狭窄程度、卒中严重程度呈正相关。

目的 探讨宫腔镜在绝经后无症状子宫内膜增厚患者中的诊疗价值。方法 回顾性分析绝经后经阴道超声(TVS)检查提示子宫内膜增厚(内膜厚度≥5 mm)且无症状68例患者的临床资料,均实施宫腔镜检查和(或)宫腔镜下手术治疗。分析阴道超声检查、宫腔镜检查及病理诊断疾病类型,阴道超声检查影像改变情况及2例子宫内膜癌患者的检查结果。结果 68例患者病理诊断子宫内膜增生4例,子宫内膜息肉46例,黏膜下肌瘤10例,子宫内膜炎4例,子宫内膜癌2例,其他2例。阴道超声检查子宫内膜增生2例,子宫内膜息肉13例,黏膜下肌瘤1例,子宫内膜炎1例,子宫内膜癌1例,其他1例。宫腔镜检查子宫内膜增生4例,子宫内膜息肉38例,黏膜下肌瘤10例,子宫内膜炎4例,子宫内膜癌2例,其他1例。子宫内膜息肉阴道超声检查影像表现为单纯内膜增厚或合并宫Gefitinib-based PROTAC 3小鼠腔异常回声都占绝大多数,分别为52.2%、37.0%；子宫内膜癌均为50.0%。2例子宫内膜癌患者经宫腔镜检查诊断为子宫内膜癌,后均经手术后子宫切除标本病理诊断为子宫内膜腺癌,其中1例阴道超声提示内膜增厚6 mm, 1例阴道超声提示宫腔混合回声。结论 在绝经后无症状子宫内膜增厚患者中,最常见的子宫内膜病变为子宫内膜息肉,子宫内膜恶性肿瘤亦占一定比例,需引起临床高度重视。临床在进一步诊断Z-IETD-FMK时不能完全依靠B超检查评估子宫内膜厚度,要与临床因素及恶性病变的高危因素相结合,做出个体化判断,结合宫腔镜和组织病理学检查得到准确的诊断非常IGZO Thin-film transistor biosensor重要。

第一部分 热射病大鼠的心功能损伤及炎症反应与铁死亡作用的初步研究目的建立热射病大鼠动物模型,初步探究高温干预过程对大鼠心功能的影响及高温干预后恢复过程中炎性通路蛋白与铁死亡相关蛋白的变化趋势,并寻找出最佳时间点以初步探究热射病与铁死亡之间的联系。方法(1)18只雄性SD大鼠随机分为对照(Control)组与热射病(HS)组,Control组3只,HS组15只。肛温计检测大鼠核心体温;BL-420F生物机能实验系统检测大鼠HR及MAP。(2)将上述HS组大鼠按照不同恢复时长分为0h组,3h组,6h组,12h组及24h组,每组3只。ELISA检测大鼠c Tn I;Western blotting检测不同恢复时间点TLR4、NF-κB、p53、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平;超声检测心功能指标:SV、CO、LVPWd和LVPWs;BL-420F生物机能实验系统检测心脏血流动力学指标:LVSP、LVEDP、左+dp/dt_(max)及-dp/dt_(max);H&E染色检测大鼠心肌组织病理学形态结构。(3)24只SD大鼠随机分为Control组、铁死亡抑制剂(Liproxstatin-1)组、HS组与HS+Liproxstatin-1组,每组6只。建模前30 min,Liproxstatin-1组和HS+Liproxstatin-1组腹腔注射liproxstatin-1(10 mg/kg)。免疫荧光染色检测大鼠心肌组织中SLC7A11蛋白表达水平;Western blotting检测大鼠心肌组织中SLC7A11与GPX4表达水平。结果(1)直肠温度检测结果显示,与Control组比较,HS组大鼠高温干预60 min后体温上升速度明显加快,并在180 min时显著增加(P<0.01);BL-420F生物机能实验系统检测结果显示,在高温干预过程中,与Control比较,HS组大鼠高温干预120 min后心率上升速度明显加快,并在180 min时达到峰值(P<0.01);与Control比较,HS组大鼠高温干预60 min后MAP明显升高,在90 min时达到峰值并维持至120 min,120min后MAP显著降低(P<0.05)。(2)与Control组比较,HS组大鼠高温干预后恢复3h时,c TnⅠ含量开始增加,并在恢复12h时显著增加(P<0.01);Western blotting检测结果显示,与Control组比较,HS组在高温干预后恢复12h时大鼠心肌组织中TLR4、NF-κB及p53蛋白表达显著增加(P<0.01),SLC7A11与GPX4蛋白表达显著减少(P<0.01);超声检测结果显示,Control组大鼠SV、CO、LVPWd和LVPWs正常;与Control组比较HS组大鼠SV、CO明显降低(P<0.01),LVPWd与LVPWs明显增加(P<0.01);在高温干预后恢复12h,Control组大鼠血流动力学指标正常;与Control组相比,HS组大鼠LVSP显著下降(P<0.01),LVEDP明显增多(P<0.05),+LVdp/dt_(max)显著下降(P<0.05),-LVdp/dt_(max)明显升高(P<0.05);H&E染色结果显示,Control组心肌结构规整清晰,心肌细胞呈梭形,细胞核居中;与Control组相比,HS组见部分心肌排列紊乱、形态不规则或模糊不清,部分胞质深染肥大,细胞间质可见大量炎性细胞浸润。(3)免疫荧光染色结果显示,与Control组比较,HS组大鼠心肌组织中SLC7A11表达明显减少(P<0.01);与HS组比较,HS+Liproxstatin-1组SLC7A11表达明显PLX3397改善(P<0.01);Western blotting检测结果显示,与Control组比较,HS组大鼠心肌组织中SLC7A11、GPX4表达水平明显下降(P<0.05);与HS组比较,HS+Liproxstatin-1组大鼠SLC7A11、GPX4表达水平明显改善(P<0.05)。结论热射病大鼠核心体温明显增加、心率显著升高并伴有低血压;在高温干预后恢复12h时热射病大鼠心功能明显异常,心肌组织结构严重损伤,TLR4/NF-κB炎性信号通路蛋白高表达,p53/SLC7A11/GPX4铁死亡通路蛋白中,p53表达增加,SLC7A11和GPX4表达减少,据此,高温干预后恢复12h可作为本研究动物实验最佳研究时间点。第二部分 抑制TLR4对热射病大鼠心功能及炎症反应与铁死亡的影响目的通过抑制TLR4探究其在热射病大鼠心功能损伤及炎症反应与铁死亡的作用。方法将36只SD大鼠随机分为Control组、TAK-242组、HS组与HS+TAK-242组,每组9只。建模前30 min,TAK-242组和HS+TAK-242组腹腔注射TAK-242(3 mg/kg)。BL-420F生物机能实验系统检测心脏血流动力学指标:LVSP、LVEDP、+dp/dt_(max)及-dp/dt_(max);超声检测心功能指标:SV、CO、LVPWd及LVPWs;H&E染色检测大鼠心肌组织病理学形态结构;RT-q PCR和Western blotting检测TLR4、NF-κB、p53、SLC7A11和GPX4 mRNA及蛋白的表达水平;免疫荧光染色检测心肌组织中TLR4蛋白表达水平;免疫组织化学检测NF-κB、p53、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平;ELISA检测大鼠血清中c Tn I、TNF-α、IL-6和IL-1β含量;试剂盒检测大鼠血清中Fe~(2+)含量。结果Control组大鼠SV、CO、LVPWd和LVPWs正常;与Control组比较TAK-242组大鼠SV、CO、LVPWd和LVPWs无明显差异(P>0.05),HS组大鼠SV、CO明显降低(P<0.01),LVPWd与LVPWs明显增加(P<0.01);与HS组比较,HS+TAK-242组SV、CO增加,LVPWd和LVPWs降低(P<0.05)。Control组大鼠血流动力学指标正常;与Control组比较,TAK-242组大鼠血流动力学指标无明显差异(P>0.05),HS组大鼠LVSP(P<0.01)、+dp/dt_(max)(P<0.05)下降,LVEDP、-dp/dt_(max)增加(P<0.01);与HS组比较,HS+TAK-242组血流动力学指标改善,LVSP、+dp/dt_(max)升高,LVEDP、-dp/dt_(max)降低(P<0.05)。H&E染色结果显示,Control组心肌结构正常;与Control组相比,HS组见部分心肌排列紊乱,部分心肌细胞肥大、胞质深染,细胞间质可见大量炎症细胞浸润;HS+TAK-242组可见心肌细胞排列较HS组整齐,肥大的心肌细胞数量减少,细胞间质仍可见炎症细胞浸润,但较HS组减轻。与Control组比较,TAK-242组大鼠血清中c TnⅠ含量无明显变化(P>0.05),HS组c TnⅠ含量显著增加(P<0.01);与HS组相比,HS+TAK-242组c TnⅠ含量显著减少(P<0.05);RT-q PCR与Western blotting检测结果显示,与Control组比较,HS组大鼠心肌组织中TLR4、NF-κB和p53 mRNA及蛋白表达水平明显增高(P<0.01),SLC7A11、GPX4 mRNA及蛋白表达水平明显下降(P<0.01);与HS组比较,HS+TAK-242组TLR4、NF-κB和p53 mRNA及蛋白表达水平明显降低,SLC7A11和GPX4 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。免疫荧光染色检测结果显示,与Control组比较,TAK-242组大鼠心肌组织中TLR4表达无明显差异,HS组部分心肌组织中TLR4表达明显增高;与HS组比较,HS+TAK-242组心肌组织中TLR4表达明显降低。免疫组化结果显示,与Control组比较,TAK-242组大鼠心肌组织中NF-κB、p53、SLC7A11和GPX4表达无明显差异,HS组部分心肌组织中NF-κB、p53表达明显增高,SLC7A11和GPX4表达显著减少;与HS组比较,HS+TAK-242组心肌组织中NF-κB、p53表达明显降低,SLC7A11和GPX4表达显著增多。结论TLR4可作为探究热射病大鼠心功能结构保护机制的重要靶点之一,抑制TLR4可显著改善热射病大鼠心功能损伤和心肌组织结构损伤,其机制可能与TAK-242下调TLR4/NF-κB信号通介导的炎症反应及p53/SLC7A11/GPX4信号通路介导的铁死亡相关。第三部分抑制TLR4/NF-κB信号通路对H9C2大鼠心肌细胞炎症反应与铁死亡的影响目的探究高温干预对H9C2大鼠心肌细胞形态结构及活力影响,并明确TLR4/NF-κB信号通路在高温干预导致的心肌细胞炎症反应与铁死亡中的作用。方法(1)37℃组、41℃组、43℃组和45℃组。免疫荧光检测α-actinin标记的H9C2细胞的细胞形态结构;CCK-8检测不同温度时细胞活力。(2)Control组、2h组、3h组、4h组和5h组(高温干预时间)。免疫荧光检测α-actinin标记的H9C2细胞的细胞形态结构;CCK-8检测不同高温干预时长时的细胞活力。(3)Control组,0h组,3h组,6h组和12h组(高温干预后恢复的时间)。Western blotting检测H9C2细胞中TLR4的表达水平。(4)Control组,HS组(43℃高温干预2h后37℃恢复3h)。RT-q PCR和Western blotting检测H9C2细胞中TLR4、NF-κB、p53、SLC7A11和GPX4 mRNA及蛋白的表达水平;ELISA检测H9C2细胞中TNF-α、IL-6及IL-1β含量。(5)Control组、Liproxstatin-1组、HS组和HS+Liproxstatin-1组。Western blotting检测H9C2细胞中SLC7A11和GPX4的表达水平;试剂盒检测H9C2细胞中GSH和MDA含量。(6)Control组、Liproxstatin-1组、HS组、HS+Liproxstatin-1组和Erastin组。透射电镜检测H9C2细胞中线粒体的形态结构;试剂盒检测H9C2细胞中ROS和Fe~(2+)含量。(7)Control组、TAK-242组、HS组和HS+TAK-242组。RT-q PCR及Western blotting和免疫荧光检测H9C2细胞中TLR4、NF-κB、p53、SLC7A11和GPX4 mRNA及蛋白的表达水平;ELISA检测H9C2细胞中TNF-α、IL-6和IL-1β含量;试剂盒检测H9C2细胞GSH、MDA、ROS和Fe~(2+)含量;透射电镜检测H9C2细胞中线粒体形态结构。(8)Control组、PDTC组、HS组、HS+PDTC组和HS+TAK-242组。RT-q PCR检测TLR4、NF-κB、p53、SLC7A11和GPX4 mRNA表达水平;ELISA检测H9C2细胞中TNF-α、IL-6和IL-1β含量;试剂盒检测H9C2细胞GSH、MDA、ROS和Fe~(2+)含量。结果(1)Control组H9C2细胞呈长梭形;与Control组相比,41℃时,细胞骨架开始出现皱缩;43℃时,H9C2细胞逐渐呈不规则形;45℃时,H9C2细胞呈不规则球囊状。CCK-8结果显示,在一定时间内,随着干预温度的增加细胞活力逐渐降低,且在43℃和45℃时细胞活力显著降低(P<0.01)。(2)与Control组相比,在一定温度下,随着干预时间的增加,细胞形态逐渐开始变化,由长梭形逐渐变为不规则椭圆形,且细胞活力逐渐降低(P<0.01)。(3)与Control组相比,TLR4在高温干预后恢复3h时表达显著增高(P<0.01),在6h和12h时TLR4的高表达有所恢复(P<0.05)。RT-q PCR及Western blotting检测结果显示,与Control组相比,HS组TLR4、NF-κB和p53 mRNA及蛋白表达水平显著增加(P<0.01)。与Control组相比,HS组H9C2细胞中TNF-α、IL-6和IL-1β含量显著增加;(4)Western blotting检测结果显示,与Control组相比,HS组SLC7A11和GPX4表达显著增加减少;与Control组相比,Liproxstatin-1组SLC7A11和GPX4蛋白表达无显著性差异(P>0.05),HS组SLC7A11(P<0.01)和GPX4(P<0.05)蛋白表达显著减少;HS+Liproxstatin-1组与HS组相比SLC7A11和GPX4蛋白表达增加(P<0.05)。与Control组相比,Liproxstatin-1组GSH和MDA含量无显著性差异(P>0.05),HS组H9C2细胞中GSH含量明显减少(P<0.01),MDA含量显著增多(P<0.05);HS+Liproxstatin-1组与HS组相比,GSH含量增加(P<0.01)和MDA(P<0.05)含量减少。(5)与Control组相比,Liproxstatin-1组ROS和Fe~(2+)含量无显著性差异,HS组ROS和Fe~(2+)含量显著增多,Erastin组结果与HS组一致;HS+Liproxstatin-1组与HS组相比,ROS和Fe~(2+)含量减少。与Control组相比,Liproxstatin-1组线粒体无明显改变,HS组线粒体变小,线粒体膜密度增高,Erastin组线粒体的变化同HS组一致;HS+Liproxstatin-1组线粒体的形态结构较HS组得到改善。(6)与Control组相比,TAK-242组TLR4、NF-κB、p53、SLC7A11和GPX4 mRNA及蛋白表达无显著性差异(P>0.05),HS组TLR4、NF-κB和p53 mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.01),SLC7A11(P<0.05)和GPX4(P<0.01)mRNA及蛋白表达显著减少;与HS组相比,HS+TAK-242组TLR4(P<0.05)、NF-κB(P<0.05)和p53(P<0.01)mRNA及蛋白的表达减少,SLC7A11(P<0.05)和GPX4(P<0.01)的表达增加。与Control组相比,TAK-242组TNF-α、IL-6和IL-1β含量无显著性差异(P>0.05),HS组TNF-α、IL-6和IL-1β含量显著增加(P<0.001);与HS组相比,HS+TAK-242组TNF-α、IL-6和IL-1β含量明显减少(P<0.01)。与Control组相比,TAK-242组线粒体无明显改变,HS组线粒体变小,膜的密度增高;与HS组相比,HS+TAK-242组线粒体的形态结构较改善;与Control组相比,TAK-242组GSH、MDA、ROS和Fe~(2+)含量无显著性差异(P>0.05),HS组GSH含量明显减少(P<0.01),MDA、ROS和Fe~(2+)含量显著增多(P<0.01);HS+TAK-242组与HS组相比GSH(P<0.05)含量增加,MDA(P<0.01)、ROS和Fe~(2+)含量减少。(7)与Control组相比,PDTC组TLR4、NF-κB、p53、SLC7A11和GPX4 mRNA表达无显著性差异(P>0.05),HS组TLR4(P<0.05)、NF-κB(P<0.01)和p53(P<0.01)mRNA表达显著增加,SLC7A11和GPX4 mRNA表达显著减少(P<0.01);与HS组相比,与HS组相比,HS+PDTC组TLR4 mRNA表达无显著性差异,NF-κB和p53 mRNA表达减少,SLC7A11和GPX4mRNA表达增加(P<0.01),HS+TAK-242组TLR4(P<0.05)、NF-κB(P<0.01)和p53(P<0.01)mRNA表达水平减少,SLC7A11(P<0.05)和GPX4(P<0.05)mRNA表达水平增加;与Control组相比,PDTC组TNF-α、IL-6和IL-1β含量无显著性差异(P>0.05),HS组TNF-α、IL-6和IL-1β含量显著增加(P<0.001);与HS组相比,HS+PDTC组TNF-α、IL-6和IL-1β含量降低(P<0.01);HS+TAK-242组H9C2细胞对TNF-α、IL-6和IL-1β含量的影响与HS+PDTC组保持一致;与Control组相比,PDTC组GSH、MDA、ROS和Fe~(2+)含量无显著性差异(P>0.05),HS组GSH含量明显减少,MDA、ROS和Fe~(2+)含量显著增多(P<0.01);与chronic-infection interactionHS组相比,HS+PDTC组GSH含量增加,MDA、ROS和Fe~(2+)含量减少(P<0.01),HS+TAK-2selleck激酶抑制剂42组结果与HS+PDTC组保持一致(P<0.05)。结论高温干预可使大鼠心肌细胞形态异常且细胞活力下降;铁死亡抑制剂干预可改善高温干预导致的心肌细胞铁死亡;抑制TLR4/NF-κB信号通路可改善大鼠心肌细胞炎性环境及铁死亡,提示高温干预导致的心肌细胞损伤机制可能与TLR4/NF-κB炎性信号通路及p53/SLC7A11/GPX4铁死亡信号通路相关。

目的：探究妊娠期糖尿病(GDM)患者血清及胎盘组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)表达水平及与胰岛素抵抗关系。方法：以2022年1-12月本院收治的GDM产妇147例(GDM组)及健康产妇71例(对照组)为研究对象，检测两组血清及胎盘组织PI3K、P-AKT表达水平及血糖和胰岛素抵抗相关指标，分析血清及胎盘组织PI3K、P-AKT表达水平与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的相关性及对胰岛素抵抗发生的影响。graphene-based biosensors结果：GDM组血清PI3K(0.81±0.17pg/L)、P-AKT(0.64±0.15pg/L)水平及胎盘组织PI3K(1.09±0.23)、P-AKT(1.52±0.32)mRNA表达均高于对照组(0.34±0.06pg/L、0.30±0.07pg/L、0.54±0.10、0.67±0.13),Pear点击此处son相关分析显示，PI3K、P-AKT表达与HOMA-IR均呈正相关(均P<0.05)。logistic分析显示血清及胎盘组织PI3K、P-AKT表达异常升高是GDM患者出现胰岛素抵抗的危险CX-5461半抑制浓度因素(P<0.05)。结论：GDM患者血清及胎盘组织PI3K、P-AKT表达异常升高，且各指标异常升高是GDM患者出现胰岛素抵抗的危险因素。

目的:探究心肌细胞内不同水平的ROS与细胞死亡的关系,以及PGAM5在ROS诱导的不同细胞死亡中的作用及机制。方法:利用不同浓度的t-BHP干预H9c2不同时间,CCK8和流式细胞术检测细胞死亡率和细胞内ROS水平,建立H9c2细胞死亡模型。Seahorse X9细胞能量代谢仪检测H9c2细胞呼吸耗氧率、细胞外呼吸酸化率、实时ATP生成速率和检测线粒体呼吸功能相关指标。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡水平;Western-Blot方法检测cleaved-caspase 3、caspase 1、cleaved-caspase 1、cleaved-GSDMD、RIP1、RIP3、Keap1、PGAM5的表达;Elisa方法检测MLKL、p-MLKL、GPX4、Fe~(2+)、AIFM1和p-AIFM1的表达;q RT-PCR法检测PGAM5m RNA的表达;免疫荧光法检测PGAM5的定位。构建PGAM5 si RNA干扰质粒,转染H9c2细胞,并在H9c2细胞中验证PGAM5 m RNA和蛋白质的表达变化。抑制PGAM5表达后,利用Western-Blot和Elisa方法观察了对细胞死亡标志物以及p-Drp1-S637和p-Drp1-S616表达的影响,并采用JC-1方法检测了细胞线粒体膜电位水平的变化。采用单因素方差分析的方法进行各组间比较。结果:(1)t-BHP干预浓度为0、50、75、100、125、150μmol/L和干预时间为2h可诱导细胞内ROS呈梯度性升高和细胞存活率梯度性降低,成功构建细胞死亡模型。(2)t-BHP干预诱导细胞线粒体氧化磷酸化耗氧率和糖酵解耗氧率呈下降趋势,线粒体呼吸功能各项指标显著降低;(0-125)μmol/L t-BHP干预后,细胞通过线粒体氧化磷酸化生成ATP的实时速率的比例显著升高,通过糖酵解生成ATP的比例显著降低,150μmol/L t-BHP干预后,通过线粒体氧化磷酸化和糖酵解生成ATP的速率无明显变化。(3)t-BHP从50μmol/L开始诱导细胞凋亡率逐渐升高,从100μmol/L开始诱导cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 1、cleaved-GSDMD、Fe~(2+)、LC3 II/I表达升高,p-MLKL、GPX4表达降低;t-BHP从125μmol/L开始诱导Keap1、PGAM5表达升高,p-AIFM1表达降低。(4)t-BHP<100μmol/L时,PGAM5 m RNA和总PGAM5的表达显著降低,t-BHP≥100μmol/L时,PGAM5 m RNA、总PGAM5和剪切型PGAM5的表达显著升高。t-BHP诱导细胞内ROS水平的升高导致PGAM5从线粒体向细胞质易位,线粒体向核周聚集。(5)抑制H9c2细胞中PGAM5的表达,显著逆转了100μmol/L t-BHP干预组中cleaved-caspase 3、LGK-974 IC50cleaved-GSDMD、RIP1、RIP3、Fe~(2+)、LC3 II/I的表达升高,和p-MLKL的表达降低。以及150μmol/L t-BHP干预组中Keap1的表达降低,和p-AIFM1的表达升高。(6)t-BHP≥100μmol/L时,可诱导H9c2细胞中p-selleck合成Drp1-S637的表达逐渐升高。抑制PGAM5的表达后,导致p-Drp1-S616的表达显著降低,MMP的水平显著升高。结论:(1)t-BHP干预可诱导H9cInfected total joint prosthetics2细胞内ROS水平升高。H9c2细胞内低水平的ROS即可诱导细胞凋亡的发生,中等水平的ROS开始诱导细胞焦亡、自噬、铁死亡和坏死性凋亡,而诱导氧死亡需要高水平的ROS。(2)随着细胞内ROS水平的升高,PGAM5逐渐从线粒体向细胞质易位,PGAM5 m RNA和总PGAM5蛋白的表达呈先降低再升高的趋势,中等水平的ROS可以诱导剪切型PGAM5蛋白表达升高。(3)PGAM5参与调控细胞内ROS诱导的细胞凋亡、焦亡、铁死亡、自噬和坏死性凋亡和氧死亡。(4)PGAM5通过影响Drp1-S616的磷酸化介导线粒体裂变,进而导致细胞死亡。

氧化应激的研究对理解动物生活史与生境之间的关系具有重要意义，动物的氧化应激与其代谢密切相关。为研究生境及冬眠对蜥蜴氧化应激及代谢的影响，本实验以高海拔山地分布的秦岭滑蜥(Scincella tsinlingensis)为对照，检测了低海拔荒漠分布的密点麻蜥(Eremias multiocellata)肝脏在非冬眠状态(夏季活动期)抗氧化物酶和代谢酶的基础酶活及糖原含量，并比较了密点麻蜥肝脏在夏季活动期(7月)、冬眠期(12月)和出眠期(4月)这些酶的活力及糖原含量变化，同时用q-PCR法检测了编码肝糖原合成酶(GYS2)、肝型糖原磷酸化酶(PYGL)以及黄嘌呤脱氢酶(XDHPLX5622溶解度)基因的表达。结果表明：与秦岭滑蜥相比，密点麻蜥的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物mucosal immune酶(GPX)、过氧化氢酶(CAT)及柠檬酸合酶(CS)活力较低，丙二醛(MDA)含量较高，肝糖原含量没有显著差异；冬眠期和夏季活动期密点麻蜥肝脏的SOD、GPX和CAT活力显著低于出眠期，冬眠期CS活力显著高于其他时期，冬眠期和出眠期MDAPS-341细胞培养含量显著低于夏季活动期；冬眠期和夏季活动期糖原含量显著高于出眠期；冬眠期GYS2、PYGL和XDH基因表达显著低于夏季活动期和出眠期；生活于低海拔荒漠地区的密点麻蜥较生活于高海拔山地的秦岭滑蜥具有更低的氧化代谢依赖；密点麻蜥氧化应激抗性和代谢表现出了季节性适应，出眠期而非冬眠期表现出的较高氧化应激水平可能与出眠期代谢恢复有关。本实验结果拓展了对蜥蜴氧化应激适应的认识。