目的:胃癌是全球高发恶性肿瘤之一,在中国胃癌新发病率及致死率均位居恶性肿瘤第三位,严重危害人类身体健康。热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)是调控细胞生命的不可或缺的关键蛋白,同时也参与多种肿瘤发生、发作的调控。DNAJ热休克蛋白40家族成员A1(DNAJ heat shock protein 40 family member AFoodborne infection1,DNAJA1)是课题组前期筛选出的与肿瘤发生、进展紧密相关的基因,但其在不同肿瘤中扮演着不同角色。本课题组前期利用公共生物数据库分析发现DNAJA1在胃癌中可能表达上调,但其在胃癌中的具体表达情况及机制并不明确。本研究拟检测DNAJA1在胃癌石蜡组织中的表达情况并分析其与临床病理特征的相关关系,初步探讨DNAJA1对胃癌细胞生物学行为的影响。为DNAJ点击此处A1成为新的胃癌分子生物标记奠定基础,为胃癌的诊断、预后评估以及药物治疗提供新的研究靶点。方法:1.利用免疫组化检测胃癌组织、癌旁正常胃黏膜、淋巴结转移病灶中DNAJA1的表达水平,并且通过统计学方法分析其与临床病理特征的相关关系。2.利用Real-time PCR及Western blot分别检测4株人胃癌细胞株中DNAJA1表达水平。3.采用小干扰RNA和慢病毒质粒分别瞬时转染构建DNAJA1干扰胃癌细胞株和DNAJA1过表达胃癌细胞株。4.通过MTT、平板克隆形成实验、Transwell和划痕实验研究DNAJA1对胃癌细胞生物学行为的影响。结果:1.免疫组化检测结果表明,与癌旁正常的胃黏膜相比,胃癌组织和淋巴结转移病灶中DNAJA1的表达水平显著上调。但将胃癌原发病灶与淋巴结转移病灶相比较分析,发现两者中DNAJA1表达差异无统计学意义。此外,胃癌组织中DNAJA1的高表达与淋巴结转移、p53突变、HER-2状态、浸润深度及WHO分型(P<0.05)具有相关性,而与年龄、性别、分化程度无相关关系(P>0.05)。高表达DNAJA1组的患者比低表达DNAJA1组的患者5年生存率明显降低(P<0.05)。2.DNAJA1促进胃癌细胞的增殖、侵袭能力。根据DNAJA1在4株胃癌细胞中的内源性表达情况,选择HGC-27细胞株过表达DNAJA1,AGS细胞株干扰DNAJA1。MTT实验和平板克隆形成实验结果表明过表达DNAJA1促进胃癌细胞的体外增殖能力(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果表明过表达DNAJA1促进胃癌细胞的体外侵袭能力(P<0.05)。划痕实验结果表明过表达DNAJA1促进胃癌细胞的体外迁获悉更多移能力(P<0.05)。结论:1.DNAJA1在胃癌和淋巴结转移灶中的表达明显高于正常胃黏膜组织。2.DNAJA1高表达与胃癌淋巴结转移、p53状态、HER-2状态、浸润深度及WHO分型相关。3.高表达DNAJA1与胃癌患者不良预后有关。4.过表达DNAJA1促进胃癌细胞的增殖、侵袭以及迁移能力。