研究目的:目前全球肝病selleck发病率呈现逐年增高的趋势,给患者和社会造成沉重的精神和经济负担。近年来研究发现肝病与铁死亡密切相关,在许多肝脏疾病的发生发展过程中都表现出脂质过氧化和铁离子增多、抗氧化体系抑制的铁死亡特征,筛选能抑制铁死亡的化合物有可能达到治疗肝脏疾病的目的。增强脂质过氧化或抑制抗氧化体系都可以导致细胞发生铁死亡。在构建铁死亡实验模型时,相比单一诱导因素,增强脂质过氧化同时抑制抗氧化体系的模型更符合肝脏疾病发生发展过程中的特点,以此为模型评估化合物对肝脏疾病的治疗潜能和作用机制将会更加准确和全面。黄酮类化合物广泛存在于多种植物以及水果中。有研究表明黄酮类化合物中的黄芩素(Baicalein,BA)能通过抑制铁死亡,在创伤后癫痫发作的疾病模型中起到保护神经的作用,因此BA具有抑制铁死亡治疗肝脏疾病的潜力。咖啡酸苯乙酯(Caffeic acid phenethyl ester,CAPE)具有抗炎抗氧化活性且能螯合铁离子,但是否能抑制肝细胞铁死亡,目前没有研究。因此构建增强脂质过氧化同时抑制抗氧化体系的肝细胞铁死亡模型,在此基础上考察CAPE、BA对铁死亡的抑制作用,评估CAPE、BA在肝脏疾病治疗中的应用前景。研究内容:将增强细胞脂质过氧化的叔丁基过氧化氢(Tert-butyl hydroperoxide,t-BHP)和抑制细胞内抗氧化剂谷胱甘肽合成的L-丁硫氨酸-亚砜亚胺(L-buthionine-sulfoximine,BSO)联合处理(BSO/t-BHP)L02肝脏细胞,构建铁死亡模型,通过检测细胞活力GDC-0068抑制剂、细胞形态、细胞膜完整性、氧化应激水平、Fe2+和谷胱甘肽含量等,考察CAPE和BA对肝细胞铁死亡的抑制作用。研究结果:(1)BSO/t-BHP诱导肝细胞铁死亡:相比BSImmunochemicalsO组和t-BHP组,BSO/t-BHP能明显加剧L02细胞受损,导致细胞活力下降、细胞膜完整性受损、氧化应激水平增高以及Fe~(2+)含量增加等,铁死亡抑制剂(去铁胺、Ferrostatin-1和Liproxstatin-1)能有效抑制BSO/t-BHP导致的细胞损伤。(2)CAPE和BA都能有效抑制BSO/t-BHP诱导的铁死亡:提高细胞活力、保护受损细胞膜、降低氧化应激水平和Fe~(2+)含量,但不能恢复BSO降低的谷胱甘肽水平。研究结论:CAPE和BA能通过降低铁过载,有效抑制BSO/t-BHP诱导的肝细胞铁死亡,具有治疗肝脏疾病的应用潜能。