目的 建立同时测定全血中他克莫司(FK506)和西罗莫司(SRL)浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法，检测使用四联免疫抑制方案的肾移植患者体内两种药物的浓度。方法 50 μL全血样品用甲醇-乙腈(90∶10)沉淀蛋白，上清液用纯水(1∶1)稀释后进样分析。色谱柱为Kinetex C18(3 mm×100 mm，2.6 μm)，流动相为0.1%甲酸-水(含10 mmol·L~(-1)乙酸铵)和0.1%甲酸-甲醇，梯度洗脱，流速0.55 mL·min~(-1)，进样量5 μL，分析时间5 min。采用电喷雾离子源，正离子多反应监测模式扫描，用于定量分析的离子对分别为：m/z 821.2→768.6(FK506)、m/z 936.4→409.3(SRL)。结果 FK506和SRL在Elexacaftor浓度1～40 ng·mL~(-Exogenous microbiota1)与峰面积线性Crizotinib临床试验关系良好(r均>0.99)，准确度在92.60%～114.41%，精密度RSD均≤15%，提取回收率为71.48%～94.88%，基质效应为72.36%～102.80%，稳定性均符合方法学要求。应用本方法测定37例接受四联免疫抑制方案的肾移植患者的血药浓度，FK506血药谷浓度(5.57±3.07)ng·mL~(-1)，SRL血药谷浓度(4.41±2.36)ng·mL~(-1)。结论 本方法同时测定人全血中FK506和SRL浓度，操作简单快捷，准确度和灵敏度高，稳定性良好，可用于肾移植患者的临床血药浓度监测。