目的 观察miR-221-3p、血管生成抑制蛋白-1(VASH-1)在黑色素瘤组织及黑色素瘤细胞系A375中的表达，探讨miR-221-3p、VASH-1在黑色素瘤细胞侵袭、迁移中的作用。方法 2019年1月—2021年9月新疆医科大学第一附属医院行手术治疗黑色素瘤患者21例，取手术切除的癌组织及癌旁组织。取对数生长期人黑色素瘤A375细胞及正常人表皮黑色素MC细胞。采用实时荧光定量PCR法检测癌组织、癌旁组织及A375、MC细胞miR-221-3p、VASH-1 mRNA相对表达量。取对数生长期A375细胞分为阴性对照组(转染siRNA-NC)、转染组(转染miR-221-3p siRNA),采用CCK-8法检测转染后培养12、24、48、72 h时细胞增殖率；采用TranswellPD-0332991 NMR小室实验检测转染24 h时迁移细胞数和侵袭细胞数；采用流式细胞术检测转染48 h时细胞周期；采用Western blot法检测转染48 h时VASH-1、GRB2、ERK1+2、VEGF-D、VEGF-α蛋白相对表达量。采用荧光素酶报告基因实验验证miR-221-3p与VASH-1的靶向关系。结果 (1)癌组织miR-221-3p、VASH-1 mRNA(2.469±0.161、3.909±1.124)相对表达量均高于癌旁组织(1.399±0.169、2.950±1.117)(t=21.024,P<0.001;t=2.776,P=0.008)。A375细胞miR-221-3p、VASH-1 mRNA(1.514±0.088、2.306±0.404)相对表达量均高于MC细胞(0.804±0.032、0.559±0.13adjunctive medication usage0)(t=13.188,P<0.001;t=7.131,P=0.002)。(2)2组转染后培养12、24、48、72 h时细胞增殖率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)转染24 h,转染组迁移细胞数[(319.515±15.325)个]和侵袭细胞数[(19.995±11.346)个]均少于阴性对照组[(494.155±13.126)、(114.005±11.266)个](t=14.991,P<0.001;t=10.184,P<0.001)。(4)转染48 h,转染组G_1期、S期、G_2期细胞比率与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(5)转染48 h,转染组VASH-1(0.426±0.029)、GRB2(0.519±0.020)、ERK1+2(0.755±0.061)、VEGF-D(0.544±0.028)PF-6463922说明书、VEGF-α(0.315±0.012)蛋白相对表达量均低于阴性对照组(0.982±0.006、1.056±0.042、0.998±0.035、1.008±0.013、0.946±0.018)(P<0.05)。(6)miR-221-3p siRNA+VASH-1 WT组荧光素酶活性(0.507±0.006)低于miR-NC+VASH-1 WT组(1.062±0.040)(t=23.990,P<0.001),miR-221-3p siRNA+VASH-1 MUT组荧光素酶活性(1.082±0.048)与miR-NC+VASH-1 MUT组(1.019±0.019)比较差异无统计学意义(t=2.140,P=0.099)。miR-221-3p靶向VASH-1。结论 黑色素瘤miR-221-3p和VASH-1表达升高，下调miR-221-3p可沉默VASH-1及VEGF信号通路GRB2、VEGF-D、VEGF-α、ERK1+2蛋白表达，抑制黑色素瘤A375细胞的侵袭和迁移能力。