Jak信号通路

营养/能量水平对动物的生长发育、生产性能的发挥以及疾病的发生与健康的恢复具有重要的影响。以往的研究已表明MC5R参与动物的营养/能量代谢,尤其是脂代谢方面。然而,MC5R如何参与动物的营养/能量代谢,目前尚不十分清楚。动物过量饲喂和禁食/再饲喂模型常用于营养/能量代谢相关的研究。本研究首先检测MC5R在鹅机体不同组织的表达情况,然后在上述两种模型中检测鹅胸肌、肝脏中MC5R的Oncologic safety表达水平,并利用营养/能量代谢相关因子(葡萄糖、油酸和甲状腺素)处理鹅原代胸肌细胞和肝细胞以及检测这些细胞中MC5R的表达量,接着在鹅原代胸肌细胞中过表达MC5R,通过转录组测序分析揭示MC5R的下游基因与通路,最后在活体和细VX-765胞模型中筛选可能受到MC5R调控的基因。主要的研究结果如下:(1)MC5R在鹅能量代谢相关组织中的mRNA表达情况。数据表明,MC5R在鹅脂肪组织中的表达量最高,其次是皮肤,肝脏和肌肉组织(胸肌、腿肌)组织中的表达水平也较高,而在肠道和心脏中的表达则较低。(2)过量饲喂模型和禁食/再饲喂模型中营养/能量水平对肌肉和肝脏中MC5R表达量的影响。在过量饲喂研究模型中,过量饲喂能够显著抑制肝脏中MC5R的mRNA和蛋白质的表达,而胸肌中MC5R的表达与对照组相比,没有显著差异;在禁食/再饲喂研究模型中,禁食可以显著诱导胸肌和肝脏中MC5R的mRNA表达,而再饲喂可以显著抑制这种诱导。这表明,MC5R在肌肉和肝脏组织中的表达受到营养/能量水平变化的影响。(3)营养/能量代谢相关因子对鹅胸肌细胞和肝细胞中MC5R表达的调控。50 mM和100 mM葡萄糖能显著诱导胸肌细胞和肝细胞中MC5R的表达;0.25 mM的油酸可显著诱导胸肌细胞和肝细胞中MC5R的表达;0.1 μM和0.3 μM甲状腺素能显著抑制胸肌细胞和肝细胞中MC5R的表达。这表明胸肌细胞和肝细胞中MC5R的表达受多种营养/能量代谢相关因子的影响。(4)胸肌细胞中过表达MC5R所影响的差异表达基因与信号通路。在鹅原代胸肌细胞中过表达MC5R基因后进行转录组测序分析,结果表明在对照组和过表达细胞组间存在4106个差异表达基因。其中,有1897个基因在过表达组中表达上调,2209个基因表达下调。差异表达基因富集的GO term和KEGG通路主要与营养/能量代谢和免疫/炎症反应有关。(5)鹅活体模型和细胞模型中肌细胞与肝细胞MC5R表达量与部分下游基因表达的关联。通过测定MC5R下游与糖脂代谢和炎症反应等相关差异表达基因的表达水平,数据表明肌细胞中PLA2G4A、PTGS2、TRAF2、IL6和PLPP4等基因以及肝细胞中ACSL1、PSPH、HMGCS1、CPT1A、PACSIN2、IGFBP3、NMRK1、GYS2、ECI2、NDRG1、CDK9、FBXO25、SLC25A25、USP25和AHCY等基因在鹅活体和细胞模型中的表达可能主要受MC5R的调控。综上所述,在活体水平,鹅肌肉和肝脏中MC5R的表达受营养/能量水平变化的调控;在细胞水平,鹅肌细胞和肝细胞中MC5R的表达受营养/能量代谢相关因子(葡萄糖、油酸、甲状腺素)的调控,但活体中的变化并不能归因于这些因子的变化,提示存在其他未查明的营养/能量代谢相关因子对MC5R的表达有显著的调控作用。MC5R可通过多种通路特别是糖脂代谢、免疫/炎症相关通路介导鹅肝细胞和肌细胞对营养/能量水平变化的响应。这些发现为了解MC5R新的生物学功能,阐述营养/能量水平调节动物生长、生产性能和健康状况的分子机购买Ferrostatin-1制奠定了良好的基础。

目的 探讨引流管不同拔除时期对甲状腺癌(TC)患者术后康复情况的影响。方法 MG132生产商以2019年1月至2021年1月中国人民解放军联勤保障部队第910医院收治的120例行手术治疗的TC患者为研究对象，采用随机数字表法将其分为2组。2组均给予常规护理+快速康复外科护理，对照组60例患者在此基础上行常规拔管，即术后连续2 d的2All-in-one bioassay4 h引流量在10 mL以内时予以拔管；观察组60例患者则行早期拔管，即术后连续2 d的24 h引流量在40 mL以内时予以拔管。比较2组患者的术后恢复情况、甲状腺功能、疼痛程度、睡眠质量、癌症疲乏情况及并发症发生情况。结果 观察组的住院时间较对照组短，首次下床时间和进食时间均较对照组早，术后3 d引流口愈合率较对照组高，并发症总发生率较对照组低(P均<0.05)。拔管24 h和48 h后，2组的三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素、游离三碘甲状腺原氨酸和甲状腺素水平均较术前更低，且观察组的上述甲状腺功能指标水平均比同期对照组更高，差异均有统计学意义(P均<0.05)。术后4周，2组的视觉模拟评分法评分均比拔管24 h后更低，癌症疲乏量表和匹兹堡睡眠质量指数评分均比术前更低，且观察组的上述量表评分均比同期对照组更低，差异均有Talazoparib统计学意义(P均<0.05)。结论 在快速康复外科护理下行早期拔管不仅可缩短TC患者的住院时间和康复时间，还有助于改善其甲状腺功能和睡眠质量，减轻其疼痛及癌症疲乏感，减少并发症的发生。

瘀血阻络证是类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的临床核心证候之一,但其证候生物内涵尚不明确,同时也缺乏符合病证特点的病证结合动物模型。本研究PLX3397分子量旨在筛选RA瘀血阻络证的候选生物标志基因集,揭示其证候生物内涵,同时在此基础上对病证结合动物模型的制备方法从病、证、症特点进行探索和评价。本研究经中国中医科学院广安门医院(批准号:2019-073-KY-01)和天津中医药大学第一附属医院(批准号:TYLL2021 [K]字018)伦理委员会批准,研究对象知情同意。动物福利和实验过程均遵循中国中医科学院实验动物伦理委员会的规定RP56976(批准号:IBTCMCACMS21-2207-01)。临床收集RA瘀血阻络证(3例)、非瘀血阻络证(7种证型, 3例/证型)及健康志愿者(4例)的全血样本,开展转录组测序、KEGG分Library Construction析、基因集富集分析(gene set enrichment analysis, GSEA)和加权基因共表达网络分析(weighted correlation network analysis, WGCNA),共筛选到126个枢纽基因,其功能注释结果显著富集于“免疫-炎症”相关通路和脂质代谢调节(鞘磷脂、醚脂质代谢和类固醇生物合成)相关通路。对枢纽基因集与中医主次症、西医表型症状和病理环节相关的靶标基因集做症状映射分析结果显示,关节刺痛、关节形态异常、瘀斑和血液循环异常是RA瘀血阻络证的代表性病证特点。病证结合动物模型实验结果表明,相比单纯胶原诱导(collagen-induced arthritis, CIA)模型组, CIA联合盐酸肾上腺素(adrenaline hydrochloride, Adr) 3模型组大鼠加剧了血液流变性、凝血功能、血小板功能和内皮功能的异常变化,提示该种瘀血阻络证RA大鼠可能处于“血瘀”状态。本研究结果有助于推进RA瘀血阻络证的证候客观化研究,并为建立反映临床特点的病证结合动物模型提供新思路。

目的：基于蛋白多糖降解探讨加味四妙方对单钠尿酸盐（MSU）诱导的大鼠痛风性关节炎（GA的作用及其作用机制。方法：将6只SD大鼠随机分为空白组和模型组，每组3只，模型组向关节腔内注射0.1 mL MSU溶液（100 mg/mL）建立GA模型，对照组注射等体积生理盐水。24 h后对两组大鼠的滑膜组织进行转录组测序，筛选出差异表达基因。体外培养家兔膝关节软骨细胞，甲苯胺蓝染色、RT-PCR法检测不同代数软骨细胞中蛋白多糖（PGs）的表达。采用Western blot与qRT-PCR法检测不同浓度MSU(200、500、1 000μmol/L)处理后MMP-3的蛋白及mRNA表达STM2457溶解度。将33只SD大鼠随机分为空白组、模型组、给药组，每组11只。膝关节注射0.1 mL MSU溶液（100 mg/mL）制备大鼠痛风性关节炎模型，免疫组化检测滑膜组织中MMP-3的表达，番红固绿染色法检测大鼠关节软骨细胞蛋白多糖的表达。结果：MMP-3是显著上调的差异表达基因，与Jak/STAT信号通路、TGF-β信号通路、趋化因子信号通路、IL-17信号通路等密切相关。体外验证发现，与空白组比较，经250、500、1 000μmol/L MSU刺激24 h后，MMP-3蛋Bio-3D printer白表达水平明显升高（P <0.05）；与空白组比较，MMP-3 mRNA表达水平经250μmol/L MSU刺激后明显升高（P <0.01），经500、1 000μmol/L MSU刺激后其表达显著升高（P <0.001）。与空白组比较，经250、500μmol/L MSU刺激后，各组软骨细胞蛋白多糖表达均显著降低（P <0.05）；与250μmol/L MSU组比较，10%和20%加味四妙方含药血清（MSM）组均能有效逆转Alisertib供应商上述结果（P <0.001）。与500μmol/L MSU组比较，20%MSM能够有效上调蛋白多糖的表达（P <0.05）。与空白组比较，模型组软骨细胞蛋白多糖mRNA表达显著降低（P <0.001）；与模型组相比，10%MSM与20%MSM均能有效增加其mRNA表达（P <0.001,P <0.05）。与空白组比较，模型组大鼠膝关节肿胀明显（P <0.05,P <0.01）；与模型组比较，各给药组能明显抑制其关节肿胀（P <0.05,P <0.01）。与空白组比较，模型组MMP-3表达增加且关节软骨表层蛋白多糖丢失；与模型组相比，各给药组对上述现象均有明显改善作用。结论：加味四妙方通过抑制MMP-3生成调控蛋白多糖降解从而治疗痛风性关节炎。

目的：分析寒热不同证候大肠癌发生过程中免疫特征的差异。方法：取50只Wistar雄性大鼠给予1，2-二甲肼（DMH）溶液造模，随机分为四组。正常对照组(大鼠给予正常饮食加10 mL/kg纯水)、模型对照组（大鼠按体质量皮下注射DMH，1次/w，共12 w）、寒证模型组（大鼠与模型对照组一样给予DMH，同时每天灌胃给予10 mL/kg冰水，3次/d，直至实验结束）、热证模型组（大鼠与模型对照组一样给予DMHMRTX849细胞培养，同时每天给予20%乙醇10 mL/kg，辣椒素2 mg/kg -9 mg/kg 灌胃，直到试验结束）。观察大鼠体征状况。于第 5、17、21 w分批取材，将部分肠组织HE染色。采用Western Blot蛋白质印迹和免疫组化法检测CD4、CD8 、PD-1、PD-L1、TIM-3和HMGB1的蛋白表达。结果：与模型对照组比较，寒证模型组血清SDH、LDH、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP和Na~(+)-k~(+)-ATP酶活力显著降低（P＜Dolutegravir供应商0.01），热证模型组SDH、LDH、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP和Na~(+)-k~(+)-ATP酶活力显著升高（P＜0.01），寒证模型和热证模型组大鼠结肠组织中的PD-1、PD-L1、TIM-3和HMGB1蛋白表达显著上调，CD4、CD8蛋白表达显著下调(P<0.05 或P <0.01)；与热证模型组相比，寒证模型组血清SDHenzyme-linked immunosorbent assay、LDH、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP和Na~(+)-k~(+)-ATP酶活力显著降低（P＜0.01），寒证模型组大鼠结肠组织中的PD-1、PD-L1、TIM-3和HMGB1蛋白表达明显上调，CD4、CD8蛋白表达水平明显下调(P<0.05 或P <0.01)。结论：寒热不同证候大肠癌发生过程的不同可能与T细胞相关分子的差异有关。

目的 目前克罗恩病（CD）的具体病理机制仍不清楚，肠道菌群在CD的发生与进展过程中发挥了重要的作用。我们旨在通过比较CD患者肠道正常和炎症粘膜微生物群的组成来阐明肠道微生物群如何影响CD患者的粘膜愈合。方法 使用“Crohn’s disease”作为关键词检索GEO与AE数据库并下载GSE162844与GSE198329数据集，使用R 4.2.3软件对两个数据集的微生物数据进行多样性分析和线Women in medicine性判别分析效应量以探讨不同肠道黏膜微生物的组成差异。结果 CD患者肠道炎症部位黏膜菌群ShannoPLX5622核磁n多样性指数和Simpson多样性指数较肠道正常部位有所下降，并且两个部位菌群组成有一定差异。在门水平上，变形菌门为肠道的主要优势菌群，软壁菌门在肠道炎症黏膜中的相对丰度升高（P<0.05）；在属水平上，假单胞菌属为肠道的主要优势菌群，中间原体属和支原体属在肠道黏膜炎症部位中的相对丰度明显升高（P<0.05）。LEfSe分析结果进一步揭示了海洋芽孢杆菌属、嗜胨菌科等在CD患者肠道黏膜正常部位中富集，而假单胞菌属、Candidatus Saccharibacteria等在炎症部位出现富集。结论 CD患者肠道黏膜炎症部位与正常部位菌群组成AZD2281不同。

目的 探讨能谱CT结合中期因子(MK)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、甲状腺球蛋白(Tg)对分化型甲状腺癌的诊断价值研究。方法 收集2019年7月-2021年10月我院收治并经病理证实为分化型甲状腺癌的患者63例(分化型甲状腺癌组),另选取同时期内病理证实的甲状腺腺瘤患者51例(甲状腺腺瘤组),选择47例于我院健康体检的志愿者作为对照组。所有受试者均行能谱CT检查,比较碘浓度、能谱曲线斜率。检测并观察三组血清MK、IGF-1、Tg水平的变化情况。采用PersonLY2835219说明书相关分析能谱CT数据与血清MK、IGF-1、Tg水平的相关性。采取接收者工作特征(ROC)曲线分析能谱CT碘浓度和能谱曲线斜率结合血清MK、IGF-1、Tg对分化型甲状腺癌的诊断价值。结果 分化型甲状腺癌组在平Cancer biomarker扫、动脉期和静脉期碘浓度均比甲状腺腺瘤组和对照组更低,甲状腺腺瘤组比对照组更低(P<0.05)。分化型甲状腺癌组能谱曲线呈‘低平型’,斜率为较小负值,对照组能谱曲线为下降型,斜率为负值;在静脉期、动脉期、平扫,分化型甲状腺癌组、甲状腺腺瘤组和对照组的能谱曲线斜率逐渐变小(P<0.05)。分化型甲状腺癌组血清MK、IGF-1、Tg水平明显高于甲状腺腺瘤和对照组,甲状腺腺瘤组血清MK、IGF-1、Tg水平高于对照组(P<0.05)。碘浓度在静脉期、动脉期、平扫与血清MK、IGF-1、Tg水平呈负相关,能谱曲线斜率在平扫、动脉期、静脉期与血清MK、IGF-1、Tg点击此处水平呈正相关(P<0.05)。能谱CT结合血清MK、IGF-1、Tg对分化型甲状腺癌的诊断价值优于单独应用能谱CT或血清MK、IGF-1、Tg,联合应用诊断效能较高。结论 能谱CT联合血清MK、IGF-1、Tg检测对于分化型甲状腺癌的诊断价值最优,可评估分化型甲状腺癌的生物学行为和恶性程度,为临床治疗及预后评估提供客观依据。

目的 探讨血清甲状腺球蛋白、甲状腺球蛋白抗体联合降钙素原检测对甲状腺癌患者的诊断价值。方法 选取2020年6月—2022年6月江苏省徐州沛县人民医院检验科收集的甲状腺良性结节患者（50例）和甲状腺癌患者（50例），分别划分为良性组和恶性组，同时随机选取同时间段的健康体检者50例作为对照组。对比3组甲状腺球蛋白、甲状腺球蛋白抗体、降钙素原水平，分析各项指标及联合检测的灵敏度、特异度与准确度toxicogenomics (TGx)。结果 对照组、良性组和恶性组的甲状腺球蛋白、甲状腺球蛋白抗体及降钙素原水平呈上升趋势，恶性组最高，对照组最低，3组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。联合检Ipatasertib半抑制浓度测的灵敏度、特异度与准确度分别为86.00%、92.00%、89.00%，均高于甲状腺球蛋白（48.00PUN30119细胞培养%、74.00%、61.00%）、甲状腺球蛋白抗体（66.00%、72.00%、69.00%）、降钙素原（50.00%、58.00%、54.00%）3项指标单一检测诊断效能，差异有统计学意义（χ2=19.861、15.177、31.692,P<0.05）。结论 血清甲状腺球蛋白、甲状腺球蛋白抗体联合降钙素原检测能够提升甲状腺癌患者的诊断效能，对提高临床诊断具有重要意义。

目的：分析超声引导下微波消融（MWA）治疗甲状腺良性结节（BTN）的体积缩小率（VRR）与随访时间的阈CB-839配制值效应。方法：回顾性分析parasitic co-infection2020年7月—2021年6月在我院接受超声引导下MWA治疗BTN的患者资料，以12月为随访终点，VRR≥50%为治疗有效并纳入本研究。使用广义相加模型分析VRR随时间的变化趋势，生成VRR-时间拟合曲线图，应用分段线性回归模型计算阈值。结果：185例患者共213个结节纳入本研究，VRegorafenib NMRRR-时间拟合曲线图显示MWA治疗后结节逐渐缩小，VRR逐渐增加。VRR与随访时间为非线性关系，分析两者阈值效应显示折点即阈值为2.7月；VRR在2.7月内增长速度最快，每个月增长25.7%(P<0.001)；在2.7月后仍继续增长，但速度趋于平缓，每个月增长0.8%(P=0.018)。结论：超声引导下MWA治疗BTN的VRR与随访时间是非线性关系，存在阈值效应。

目的 探讨飞龙掌血对大鼠动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的影响及其对心血管损伤的调节和改善作用。方法 采用高脂饲料联合维生素D3和L-甲硫氨酸建立AS大鼠模型。将大鼠随机分为正常组，模型对照组，飞龙掌血提取物低、中、高剂量组，阿托伐他汀组（阳性药）。于给药后第8周，对各组大鼠体质量、血脂水平、血清中的丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨GSK J4化学结构酶（AST）、脂质氧化（MDA）、钙离子（Ca~(2+)）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）、氧化低密度脂蛋白受体1(sLOX-1)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的含量、主动脉和肝脏的病理及脂质沉积进行检测来探讨飞龙掌血对AS大鼠的影响。结果 实验成功建立了大鼠动脉粥样硬化模型，飞龙掌血提取物能一定程度降低AS大鼠的体质量，降低AS大鼠血清中的血脂水平，降低AST、ALT、MDA、Ca~(2+)、ox-LDL、sLOX-1和MCP-1的含量，能改善血管动脉壁的结构R428细胞培养紊乱、纹理不清和肝RNA Immunoprecipitation (RIP)细胞脂肪变性情况，减轻大鼠主动脉和肝脏组织中脂质沉积。结论 飞龙掌血提取物可通过调节血脂水平和脂质代谢紊乱、抗脂质过氧化、抑制血管钙化和调控oxLDL/LOX-1信号通路多个途径改善动脉粥样硬化大鼠的病理状况，对心脑血管疾病有一定的防治作用，为进一步探讨飞龙掌血抗动脉粥样硬化作用机制研究奠定了基础。