Jak信号通路

目的 探讨尿微量白蛋白/肌酐比值（UACR）、趋化因子样受体1(CMKLR1)、血清25-羟胆骨化醇[25(OH)VD]与糖尿病视网膜病变（DR）发生及病变程度的关系。方法 选择2019年5月至2020年1月邢台市第五医院160例2型糖尿病（T2DM）伴DR病人、80例无DR的T2DM病人及50例健康体检人群作为研究对象，其中DR病人根据病变程度分为非增生期98例与增生期62例。所有研究对象均采用ELISA法（酶联免疫吸附法）检测CMKLR1、25(OH)VD水平，采用免疫比浊法及肌酐酶法计算UACR值，分析其与DR发生及病变程度的相关性；并采用ROC曲线分析其价值。结果 三组T2DM病人病程比较差异有统计学意义（P<0.05）,Spearman相关系数为3.97(P<0.001)。四组研究对象空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、UACR、CMKLR1及25(OH)VD比较差异有统计学意义（P<0.05）。两两比较：增生期组FPG(7.65±1.87)mmol/L、HbA1c(9.86±1.43)%、TG(2.41±0.32)mmol/L、LDL-C(3.42±0.51)mmol/L、UACR(345.55±40.65)mg/g及CMKLR1(69.63±6.54)μg/L均高于对照组（4.31±1.19）mmol/L、（4.53±0.95）%、（1.59±0.53）mmol/L、（1Epigenetics抑制剂.73±0.61）mmol/L、（9.33±3.38）mg/g、（69.63±6.54）μg/L及T2DM非DR组（6.26±1.85）mmol/L、（6.47±1.66）%、（1.79±0.47）mmol/L、（2.44±0.66）mmol/L、（25.96±6.73）mg/g、（44.11±6.51）μg/L(P<0.05),HbA1c、UACR及CMKLR1均高于非增生期组（P<0.0Liproxstatin-1生产商5），而25(OH)VD低于对照组、T2DM非DR组及非增生期组（P<0.05）；非增生期组FPG、HbA1c、TG、LDL-C、UACR及CMKLR1均高于对照组（P<0.05）,FPG、HbA1c、TG、LDL-C、UACR高于T2DM非DR组（P<0.05），而25(OH)VD低于对照组（P<0.05）;T2DM非DR组FPG、HbA1c、LDL-C、UACR、CMKLR1均高于对照组（P<0.05）,25(OH)VD低于对照组（P<0.05）。logistic回归分析：病程长、HbA1c高、UACR高、CMKLR1高及25(OH)VD低是DR发生的危险因素（P<0.05）；病程长、UACR高、CMKLR1高及25(OH)VD低是增生期DR发生的危险因素（P<0.05）。UACR、CMKLR1及25(OH)VD预测DR的AUC面积分别为0.77、0.70、0.76；病程、UACR、CMKLR1及25(OH)VD预测增生期DR的AUC面积分别为0.77、0.72、0.73、0.74。结论 immune modulating activity糖尿病病程、UACR、CMKLR1、25(OH)VD与DR发生及病变程度密切相关，且对DR发生及病变程度具有较好的预测价值。

目的 分析本地糖尿病患者应用口服降糖药物后药物不良反应的发生情况，探讨口服降糖药物应用的合理性。方法 选取2019年3月至2020年3月榆林市第二医院收治的112例糖尿病患者为研究对象，通过追踪观察患者降糖药物的应用情况及不良反应的发生率、患者用药IDN-6556浓度依从性，分析糖尿病患者用药方案和用药行为的合理性。结果 112例糖尿病患者中用药方案以双药联合方案为主71例，占63.39%(71/112)，单药方案41例，占36.61%(41/112)；双药联合方案不良反应发生率为22.54%，明显PLX-4720供应商低于单药方案的41.46%，差异有统计学意义(P<0.05)；用药方案不合理原因中以药物疾病-异常状态相互作用、药物的经济性为主，分别占47.37%、31.58%；用药依从性好43例，依从性中等38例，依从性差31例，用药依从性不佳者占比61.61%；用药依从性差的原因中以忘记用药、不良反应和症状不明显占比较高，分别为20.29%、31.88%、18.84%。结论 口服降糖药单药方案和联合用药并存于临床，以双药方案Medicare savings program为主流趋势，有较好的疗效和安全性，然而在治疗过程中存在用药方案和用药行为的不合理性，应健全疾病管理体系和规范患者的用药行为，以确保合理用药。

目的:探讨妊娠期高血压疾病相关影响因素及其对母婴结局的影响。方法:选取某院妇产科妊娠期产妇100例为研究对象，其中50例妊娠期高血压疾病产妇设为观察组，50例无妊娠期高血压疾病产妇设为对照组。采用自制调查表对2组产妇妊娠结局进行现状调查，并采用多因素回归分析影响妊娠期高血压疾病母婴结局的危险因素。结果:对照组剖宫产、胎盘早剥及产后出血发生率selleck均显著低于观察组(P<0.05);对照组新生儿窒息率、胎儿窘迫率及围生儿死亡率均显著低于观察组(P<0.05);单因素分析结果显示，年龄、孕次、产次、有无高血压家族史、负性情绪及孕前体www.selleck.cn/products/VX-765质量均为影响妊娠期高血压产妇母婴结局的相关因素(P<0.05);多因素回归分析结果显示，年龄>27岁、孕次≥2次、有高血压家族Medical sciences史、有负性情绪及体质量≥28 kg/m~2均为影响妊娠期高血压产妇母婴结局的独立危险因素(P<0.05)。结论:影响妊娠期高血压疾病产妇母婴结局的因素较多，临床重视和关注妊娠期高血压疾病相关危险因素，采取针对性措施缓解妊娠期高血压疾病症状，改善母婴结局。

胰蛋白酶(Trypsin,EC 3.4.21.4)是一种广泛存在于自然界中的丝氨酸蛋白水解酶,能够特异性的水解精氨酸或者赖氨酸的羧基末端,通过参与酶消化级联反应激活其他蛋白酶原,属肽链内切酶。灰色链霉菌胰蛋白酶(Strptomyces griseus trypsin,SGT)是一种细菌来源的胰蛋白酶,因为其三级结构和催化机制与牛(猪)源胰蛋白酶有较高的相似度,且本实验室前期已经实现了SGT成熟酶在毕赤酵母GS115中的可溶表达,故被认为是有望通过基因工程相关策略使其成为目前商品化胰蛋白酶的替代品。本论文围绕SGT的底物特异性改造以及提高SGT在毕赤酵母中的分泌水平进行研究,主要研究内容如下:(1)SGT的表达优化。首先基于Pichia pastoris GS115在甲醇诱导条件下的分泌组学数据改造α信号肽pre区,选取了七个高分泌水平的蛋白酶:FLO10、SCW11、GAS1、MSB2、DAN4、PHO5和EXG1,并对其pre-sequences进行预测,加上本实验室前期验证过的两条pre-sequences(SP1和SP4),将α信号肽的pre-sequence置换为上述蛋白酶信号肽的pre-sequences,筛选结果显示FLO10效果最好,酶活由37.8 U·m L~(-1)提高至59.8U·m L~(-1);随后又通过截短α信号肽pro区第57-70位氨基酸,以及C端融合HL28短肽,酶活进一步提高至62.9 U·m L~(-1);最后通过共表达信号肽加工蛋白Kex2和Ste13,进一步提高了SGT分泌效率,摇瓶酶活达到68 U·m L~(-1),酶活水平相较野生型α信号肽提高了1.8倍。(2)共进化策略提高SGT底物特异性及催化效率。选取60条不同来源的胰SCH772984半抑制浓度蛋白酶序列进行比对,分析各个位置的氨基酸进行出现频次,选择SCo-infection risk assessmentGT序列中潜在的“热点”,将其定点突变为出现频次大于40的氨基酸。其中单点突变体A45S、V177I和E180M的酶活分别提高至75.3 U·m L~(-1)、74.8 U·m L~(-1)和77.2 U·m L~(-1);突变体T190S将底物催化比例(R/K)由4.1提高至7.5。接着我们对T190位点进行了饱和突变筛选和分子对接,饱和突变结果表明T190S为效果最好的突变体;分子对接结果显示S189与底物的作用力增强,S190与底物的作用力变弱,从而使得侧链较长的精氨酸底物更容易和突变体蛋白结合,造成了T190S对精氨酸底物的偏好性增加。(3)基于共进化策略迭代改造SGT及放大培养。我们对上述性能优良的单点突变体进行组合迭代突变,其中组合突变体A45S/V177I/E180M酶活提高最为明显,达到98 U·m L~(-1)。引入T190S的组合突变体酶活均得到不同程度的下降,但是底物催化比例(R/K)均得到一定程度上的提高。其中组合突变体V177I/E180M/T190S底物催化比例最高为4.6,是对照菌株的1.1倍。同时我们还对组合突变体的比酶活和底物动力学相关参数进行了表征,整体比酶活的变化趋势基本与酰胺酶酶活变化趋势一致;组合突变体A45S/V177I/E180M催化效率最高,k_(cat)/K_m为1.21×106 s~(-1)·m M~(-1),是对照菌株的13.7倍;底物催化比例(R/K)最高的组合突变体V177I/E180M/T190S比酶活为1698 U·mg~(-1),其K_m值有所增加,即与底物的亲和力下降,但底物催化效率升高,整体催化能力略高于对照菌株FLO10。在对组合突变体A4selleck化学5S/V177I/E180M的结构分析中,我们发现其催化三联体中H57和D102之间的距离由7.0(?)缩短至6.4(?),加快其催化过程中质子传递的速率,可能是性能提高的原因之一;在分析其Ca~(2+)结合相互作用力时,V177I和E180M这两个单点突变的引入,加强了该突变体与Ca~(2+)的结合作用力,可能是性能提高的原因之二。最后我们在3-L罐水平上对这两株组合突变株进行分批补料发酵,其中组合突变体V177I/E180M/T190胞外酰胺酶酶活最终达到460 U·m L~(-1);另一株组合突变体A45S/V177I/E180M胞外酰胺酶酶活进一步提升至2506 U·m L~(-1),为目前报道最高水平。综上的研究为SGT的工业化生产和胰岛素的制备奠定了良好的基础。

目的 研究十一方药酒（以下简称“SYF”）对木瓜蛋白酶诱导的兔膝骨关节炎（KOA）的保护作用及机制。方法 将35只兔随机分为空白组、模型组、阳性组（双氯芬酸二乙胺乳胶剂200 mg/kg）、SYF高剂量组（386 mg/kg）、SYF低剂量组（97 mg/kg），每组7只（均为雄性4只、雌性3只）。除空白组外，其余各组兔于第1、4、7天从右后肢膝关节腔注入木瓜蛋白酶混合液（含2%木瓜蛋白酶与0.03 mol/L L-半胱氨酸）0.5 m L复制KOA模型，空白组注射等体积生理盐水。从第15天开始于各组兔右后肢膝关节涂抹药物，每天给药2次，连续20 d，同时在第0、8、14、35天，Rapamycin纯度用游标卡尺测量兔右后肢膝关节直径计算其肿胀度。实验结束后，采用酶联免疫吸附测定法检测滑膜组织白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)的水平；制作滑膜组织苏木精-伊红（HE）染色切片，观测病理学形态变化；采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测滑膜组织Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/细胞核因子（NF-кB）信号通路中TLR4、MyD88、NF-кB p65 mRNA相对表达水平；采用Western blot法检测滑膜组织TLR4、MyD88、NF-кB p65、磷酸化NF-кB p65(p-NF-кB p65)蛋白相对表达水平。结果 与空白组比较，模型组兔膝NN2211价格关节肿胀度升高，滑膜组织病理性损伤严重，滑膜组织中IL-1β、TNF-α、PGE2水平均显著升高（P<0.05）,TLR4、MyD88、NF-кB p65 mRNA和TLR4、MyD88、p-NF-кB p65蛋白相对表达水平均显著升高（P<0.05）。与模型组比较，各给药组兔右后肢膝关节肿胀度与滑膜组织病理损伤程度均有显著改善，滑膜组织中IL-1β、TNF-α、PGE2水平均显著降低（P<0.05）,TLR4、MyD88、NF-кB p65medical subspecialties mRNA相对表达水平和TLR4、MyD88(SYF低剂量组除外)、p-NF-кB p65蛋白相对表达水平均显著降低（P<0.05）。结论 SYF对木瓜蛋白酶诱导的兔KOA有保护作用，其作用机制与降低炎症因子IL-1β、TNF-α、PGE2水平及下调TLR4/MyD88/NF-кB信号通路相关。

目的：挖掘毛德西教授治疗眩晕（高血压病）的新处方。方法：根据“K-聚类分析”和跟师学习，使用WPS软件录入数据，分析用药频数、四气、五味CP-690550半抑制浓度、归经及功效，使用SPSS 26.0软件的“聚类分析”功能得出新处方。结果：筛选出355首处方，涉及234味中药，用药总频数为4 624；用药频数大于50的有桑叶、杜仲https://www.selleck.cn/products/AZD1152-HQPA.html叶、天麻、荷叶、绞股蓝、罗布麻叶、银杏叶、赤芍、丹参等，以上药物四气统计结果为寒性药945次，平性microbe-mediated mineralization药808次，温性药436次等；五味统计结果为苦味药1 963次，甘味药1 427次，辛味药637次等；归经统计结果为肝经1 848次，肺经855次，心经818次，脾经795次，胃经760次，肾经329次等；功效统计结果为平肝息风药489次，活血化瘀药394次，补气药370次，发散风热药359次等；高频用药“K-聚类分析”得出两组药物，第1组：桑叶、杜仲叶、天麻、荷叶、绞股蓝、罗布麻叶、银杏叶、赤芍、丹参；第2组：白术、茯苓、半夏、黄连、葛根、麦冬、蔓荆子、牛膝、石菖蒲、决明子、茺蔚子、郁金、甘草、钩藤。结论：毛德西教授治疗眩晕（高血压病）用药四气以寒性和平性为主；用药五味以苦、甘、辛为主；用药归经以肝经、肺经、心经、脾经、胃经为主；用药功效以平肝息风，活血化瘀为主，其次是发散风热，补气化痰。

目的 探究急性脑梗死(ACI)患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、脂蛋白a[LP(a)]水平的表达及其与病情程度的关系。方法 收集2019年1月至bioorthogonal catalysis2021年1月洛阳市中医院收治的82例ACI患者的临床资料，根据NIHSS量表对ACI病情严重程度进行划分，将患者分为轻度组(NIHSS为2～4分)及中重度组(NIHSS> 5分)。比较两组ACI患者的一般资料、血清Hcy、LP(a)水平，采用Logistic多因素回归分析影响ACI患者病情程度的因素，采用Pearson系数分析血清Hcy、LP(a)水平与NIHSS评分的相关性。结果 82例患者中轻度ACI患者29例，中度ACI患者34例，重度19例，将中度及重度纳为一组，即中重度组，即轻Panobinostat浓度度组29例、中重度组53例。两组ACI患者的性别，年龄，送诊时间，吸烟史，饮酒史，高血压史，血清TC、TG水平比较，差异无统计学意义(P> 0.05)；中重度组糖尿病史人数占比，血清CRP、Hcy及LP(a)水平均高于轻度组，差异有统计学意义(P <0.05)；经Logistic多因素回归分析，糖尿病史，血清CRP、Hcy及LP(a)水平是ACI患者病情程度的独立危险因素，(OR=3.367,95%CI为1.725～8.925;OR=3.575,95%CI为1.808～9.355;OR=4.545,95寻找更多%CI为1.998～10.339;OR=3.575,95%CI为1.572～8.133)，差异有统计学意义(P <0.05)；经Pearson分析结果显示，Hcy、LP(a)水平与NIHSS的呈正相关，差异有统计学意义(P <0.05)。结论 血清Hcy、LP(a)水平与NIHSS评分密切相关，是ACI患者病情程度的独立危险因素。

目的 评价小鼠巨噬细胞焦亡时肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)与caspase-11的关系。方法 采用随机数字表法将小鼠J774A.1巨噬细胞分4组(n＝6)：非特异性siRNA(Scr-siRNA)组(S组)、Scr-siRNA＋LPS/ATP组(S＋LPS/ATP组)、TIPE2-siRNA组(T组)和TIPE2-siRNA＋LPS/ATP组(T＋LPS/ATP组)。各组分别加入相应的siRNA和Lipofectamine2000转染试剂,转染24～48 h,然后S＋LPS/ATP组和T＋LPS/ATP组加入LPS 1.0 μg/ml,孵育5 h后再加入ATP 5.0 mmol/L孵育1 h。收集细胞,采用Western blot法检测TIPE2、caspase-11、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和caspase-1表达；收集上清液,测定LDH和MPO活性,采用ELISA法检测IL-1β和IL-18浓度。结果 与S组比较,S＋LPS/ATP组细胞TIPE2表达下调,caspase-11、NLRP3和caspase-1的表达上调,上清液LDH和MPO活性、IL-1β和IL-18浓度升高(P0.05)。与T组比较,T＋LPS/ATP组细胞TIPE2表达下调,caspase-11、NLRP3和ca确认细节spase-1表达上调,上清液中LDH和MPO活性Adavosertib配制、IL-1β和IL-18浓度升高(P0.05)。与S＋LPS/ATP组比较,T＋LPS/ATP组细胞TIPE2表达下调,caspase-11、NLRP3和caspase-1表达上调,上清液LDH和MPO活性、IL-1β和IL-18浓度升高(P0.05)。结论 TIPE2可通过下调caspase-11表达,抑制小鼠巨噬细Pulmonary Cell Biology胞焦亡。

目的：评估西格列汀联合二甲双胍对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者颈动脉硬化的临床治疗效果。方法：选取徐州市肿瘤医院内分泌科住院的240例T2DM合并NAFLD患者按照随机数字表法分为medical writing对照组和观察组，每组120例，对照组接受二甲双胍+糖尿www.selleck.cn/products/XL184病饮食、运动治疗；观察组接受二甲双胍+西格列汀+糖尿病饮食、运动治疗，两组患者疗程均为24 w。检测两组患者的血糖、血脂、颈动脉硬化斑块指标及血浆炎性因子的差异并进行比较。结果：治疗24 w后，观察组的体重、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)及三酰甘油(TG)水平均明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。治疗24 w后，观察组的颈动脉内膜中层厚度(IMT)、斑块面积、Crouse积分及等级积分均低于对照Smoothened Agonist化学结构组，差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前相比，治疗后对照组血浆超敏C-反应蛋白(hs-CRP)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)降低，观察组hs-CRP、TNF-α及正五聚蛋白(PTX3)水平均明显降低，差异有统计学意义(P<0.05);治疗24 w后，观察组hs-CRP、TNF-α及PTX3水平均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：T2DM合并NAFLD患者给予西格列汀联合二甲双胍治疗可有效降低血糖，调节血脂，减轻炎症性反应，减少颈动脉IMT,缩小颈动脉硬化斑块。

目的 探讨影响妊娠期发生甲状腺功能减退症的危险因素，为临床制定针对性预防及干预措施提供科学依据。方法 选取2Infectious Agents018年8月到2021年8月泗水县人民医院收治的1selleck Wnt-C59 080例妊娠期孕妇的资料，进行回顾性研究。按照是否发生甲状腺功能减退症分为未发生甲状腺功能减退症组(990例)、发生甲状腺功能减退症组(90例)。对两组患者一般资料进行单因素分析，并对其中差异有统计学意义的因素进行多因素Logistic分析，筛选出影响妊娠期孕妇发生甲状腺功能减退症的独立危险因素。结果 1 080例妊娠期孕妇中，发生甲状腺功能减退症90例，未发生甲状腺功能减退症990例。单因素结果显示：发生甲状腺功能减退症组孕妇中年龄≥30岁、妊娠次数≥2次、产次≥3次、文化程度高中及以下、有自然流产史、有妊娠期高血压疾病、有糖尿病、生育间隔≥48个月、TPO-Ab阳性、低碘摄入量及有甲状腺家族疾病史的孕妇占比均高于未发生甲状腺功能减退症组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素结果显示：年龄≥30岁、妊娠次数≥2次、产次≥3次、文化程度高中及以下、有自然流产史、有妊娠期高血压疾病、有糖尿病、生育间隔≥48个月、低碘摄入量、有甲状腺家族疾病史均为影响妊娠期孕妇发生甲状腺功能减退症的危险因素，差异均有统计学意义(OR=4.391、1.573、1.621、2.570、1.902、1.570、1.763、1.623、1.730、8.660，均P<0.05)。结论 年龄≥30岁、妊娠次数≥2次、产次≥3次、文化程度高中及以下、有自然流产史、有妊娠期高血压疾病、有糖尿病、生育间隔BYL719体内实验剂量≥48个月、低碘摄入量、有甲状腺家族疾病史均为影响妊娠期孕妇发生甲状腺功能减退症的危险因素，临床可通过采取孕检或相应的针对性手段干预，从而有效降低孕妇在妊娠期发生甲状腺功能减退症的概率。