Jak信号通路

背景:Hippo-Yes相关蛋白1(Hippo-Yes-associated protein 1,YAP1)通路在胃癌(gastric cancer,GC)的发生和转移中的重要性引起了相当多的研究和关注;然而,YAP1在胃癌中的调控网络尚不完全清楚。泛素-蛋白酶体体系是YAP1最重要的转录后调控途径之一,迄今为止,仅有少数去泛素化酶,如OTUB2、USP10和USP47被报道可通过去泛素化稳定YAP1蛋白参与肿瘤调控。然而,在胃癌中尚未有调控YAP1的去泛素化酶被报道。方法:通过生物信息学分析以及8×GTIIC荧光素酶报告基因系统、RT-q PCR和蛋白质免疫印迹等分子实验,鉴定泛素特异性肽酶49(Ubiquitin-specific peptidase49,USP49)为胃癌中YAP1蛋白的新去泛素化酶。通过CCK8细胞增殖、Transwell侵袭和迁移、克隆形成等体外细胞表型实验和化疗敏感性实验,以及细胞系来源的或患者来源的异种移植瘤裸鼠模型,阐明USP49在胃癌中的生物学功能。利用蛋白免疫共沉淀实验、GST-Pull down实验研究USP49与YAP1的相互作用。双荧光素酶报告基因和染色质共沉淀等实验探究YAP1/TEAD4对USP49基因启动子的调控作用。最后,我们收集了selleck Wnt-C59482名胃癌患者的组织样本和临床随访信息,通过进一步的免疫组化实验鉴定USP49蛋白与YAP1及其靶基因结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)和富半胱氨酸血管生成诱导物61(cysteine-rich angiogenic inducer 61,CYR61)蛋白在胃癌组织和邻近正常组织中的表达水平及其相关性。利用Kaplan-Meier plotter预后分析和COX比例风险模型研究USP49表达与胃癌患者预后相关性。结果:在这项研究中,USP49被鉴定为YAP1的一种新型去泛素化酶,下调USP49可抑制胃癌细胞的增殖、转移、耐药和腹膜转移。USP49的过度表达显示出相反的生物学效应。此外,USP49被YAP1/TEAD4复合物转录激活,从而与YAP1通路形成正反馈环路,促进胃癌细胞的恶性进展。最后,临床验证发现USP49在胃癌组织中高表达adult medulloblastoma,并与YAP1及其靶基因、CTGF和CYR61的表达呈正相关。Kaplan-Meier plotter生存分析和COX回归分析显示USP49高表达selleck产品与胃癌患者预后不良相关,是胃癌的一个独立预后因子。此外,USP49和YAP1均高表达的患者总体生存期更短。结论:本研究证明,USP49不仅可以通过直接结合并去泛素化YAP1蛋白促进YAP1/TEAD4复合物在胃癌细胞中的促癌活性,还能作为YAP1直接调控的新靶基因,形成USP49/YAP1正反馈环路,从而促进胃癌细胞恶性进展。因此,USP49/YAP1正反馈环的异常激活在胃癌的恶性进展中起着关键作用,本研究结果有望为胃癌提供新的预后指标和治疗靶点。

目的 编制女性乳腺癌患者淋巴水肿风险感知评估问卷并检验其信效度。方法 基于双过程模型，通过文献回顾、半结构式访谈、专家函询法和预调查形成问卷初稿，并对377GSK2118436作用例乳腺癌患者进行调查，检验其信效度。结果 形成的女性乳腺癌患者chronobiological changes淋巴水肿风险感知问卷共包括3个维度22个条目。全体一致性内容效度指数(S-CVI/UA)为0.864，各条目Emricasan说明书内容效度指数(I-CVI)为0.830～1.000。探索性因子分析提取了3个公因子，累积方差贡献率58.511%。测评问卷总的Cronbachs α系数为0.745，折半信度为0.885；各维度的Cronbachs α系数为0.870～0.893，折半信度为0.870～0.880。验证性因子分析结果显示，模型适配良好。结论 女性乳腺癌患者淋巴水肿风险感知评估问卷具有良好的信效度，可用于评估乳腺癌女性患者淋巴水肿的风险感知水平。

目的探讨miR-7抑制剂治疗MRL/lpr小鼠的疗效研究。方法选取30只MRL/lpr小鼠，随机分为miR-7抑制剂（miR-7antagomir）组（n=10），CTX组（n=10）和生理盐水（Saline）对照组（n=10）。MRL/lpr小鼠13周时开始治疗，以上药物分别连续给药5周。每周观察各组小鼠一般状况并称重，留取血清和尿液标本。通过ELISA法检测13-17周三组小鼠血清ANA、抗ds-DNA抗体和C3水平，并检测上述各周三组小鼠尿蛋白水平。利用FCM检测三组小鼠Tfh细胞比例变化。RT-PCR检测三组小鼠脾脏和淋巴结miR-7mRNA和PTENmRNA表达水平。通过HE、PAS、PASM等染色观察光镜下三组小鼠的肾脏病理情况。结果治疗5周后Cometabolic biodegradation，大体形态学方面：与Saline组相比，miR-7antagomir组和Fulvestrant体外CTX组小鼠一般状况良好，体重随周龄增加而增加。血清学方面：miR-7antagomir组和CTX组血清ANA和抗ds-DNA抗体较Saline组明显下降，而补体C3水平明显上升，但这两治疗组间上述指标均无统计学差异。细胞学方面：miGW4869核磁R-7antagomir组小鼠脾脏Tfh细胞比例明显低于Saline组。与Saline组比较，miR-7antagomir组小鼠脾B细胞miR-7mRNA表达水平下降，而PTENmRNA表达水平增加。此外，miR-7antagomir组和CTX组小鼠光镜下肾脏病理改变均较Saline组有所好转，但这两组间肾脏病理改变无明显差异。结论 miR-7可作为SLE的潜在治疗靶点，miR-7 antagomir能够显示出与经典免疫抑制剂CTX相近的治疗效果，有效的改善了MRL/lpr小鼠的狼疮样疾病表现，延缓了病情进展。

常见的生物活性物质易在光、热和氧气的作用下降解,口服后在Galunisertib供应商胃肠道中易被酶促降解,利用递送载体提高生物活性成分的稳定性和生Enasidenib纯度物可及性成为研究热点之一。高内相乳液(HIPEs)因其半固体凝胶质地和高负载能力具有优异的应用前景。本课题以鸡蛋高密度脂蛋白(HDL)为原料,经不同蛋白酶酶解后制备两亲性多肽,探究不同p H下高密度脂蛋白水解物自组装特性及其稳定HIPEs((?)=0.75)的界面结构和稳定性,进一步利用羧甲基糊精调控蛋白水解物的界面吸附和HIPEs消化特性,构建姜黄素的递送体系,揭示负载姜黄素的HIPEs对溃疡性结肠炎的预防作用机制。以HDL为原料,探究蛋白酶种类(胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶)和水解时间对HDL水解产物理化性质及乳化性能的影响。蛋白酶特异性的作用位点导致水解产物分子量分布存在明显差异。不同蛋白酶的水解作用均显著提高了HDL的溶解度,尤其是中性蛋白酶水解1.5 h后产物的溶解度显著增加至27.54%,水解产物表面疏水性、乳化活性和乳化稳定性随水解时间增加呈现先增后降的趋势。与HDL稳定的乳液相比,水解产物稳定的乳液具有更低的乳析指数(CI)、更小的粒径。在不同的p H、温度和离子强度下,水解产物制备的乳液的稳定性均高于HDL,尤其是胰蛋白酶水解产物(EHT)制备的乳液。以胰蛋白酶水解产物(EHT)为乳化剂,揭示EHT自组装纳米颗粒形成机制及其稳定HIPEs的界面结构和稳定性。透射电子显微镜结果表明,EHT在超过其临界胶束浓度后自组装形成粒径为108到1359.5 nm的纳米粒子,纳米颗粒粒径与p H(3-11)密切相关。FT-IR和荧光光谱结果表明,在p H 3、5和7条件下,EHT倾向于以致密的球形状态存在,而在碱性p H时,EHT结构发生一定程度的解离,无规卷曲含量增加,刚性下降。EHT浓度达到1.5%时,可有效稳定O/W HIPEs,液滴粒径较小且分布均匀。在p H 3、5和7条件下,EHT稳定的HIPEs表现出更好的稳定性,尤其是在p H 7条件下,EHT在界面上保持较高的结构完整性并形成致密的三维网络。利用羧甲基糊精(CMD)调控EHT的界面吸附行为及其稳定的HIPEs体外消化特性,构建姜黄素递送体系,提高其生物可及性。研究结果表明:随CMD含量增加(EHT与CMD质量比由8:1增加到1:2),EHT/CMD混合物的粒径从207.2nm增加到1229.6 nm,这与静电排斥引起的热力学不相容有关。在水相中,CMD与EHT形成弱静电复合物,CMD的屏蔽效应使其最大荧光强度显著降低。CMD的存在使界面吸附的EHT发生了结构折叠和重排,形成更紧凑的结构,改善界面处EHT的构象稳定性。随CMD含量增加(EHT与CMD质量比由8:1增加到1:1),HIPEs液滴粒径减小,油水分布更加均匀,弛豫时间(T_2)更短。界面吸附的蛋白质比例从60.83%增加到80.81%,形成更厚的界面层,具有更高的抗离心和离子强度稳定性。EHT/CMD(质量比为1:1)稳定HIPEs的游离脂肪酸释放量和姜黄素生物可及性最高。以DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠为模型,研究负immune architecture载姜黄素的HIPEs消化产物微观结构及结肠炎症因子及肠道菌群,揭示负载姜黄素的HIPEs对溃疡性结肠炎的预防作用。经过3%DSS处理,所有组的小鼠均出现体重下降及不同程度的结肠组织缩短。与DSS组相比,负载姜黄素的玉米油组和HIPEs组显著抑制了DSS诱导的体重减轻症状及DAI评分增加,且抑制了结肠炎小鼠的结肠缩短效应。结肠组织病理切片结果表明,负载姜黄素的玉米油组和HIPEs组结肠隐窝损伤、粘膜炎症和细胞浸润等症状改善。与DSS组小鼠相比,负载姜黄素的HIPEs的摄入可显著降低了小鼠结肠组织的炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β水平,显著提高了抗炎因子IL-10水平。DSS处理显著降低了拟杆菌的相对丰度,与负载姜黄素的玉米油组相比,负载姜黄素的HIPEs组中厚壁菌门相对丰度明显降低,拟杆菌门丰度明显提高。

目的:1.评价新型多基因检测平台在甲状腺细胞学诊断不明确结节中的诊断价值,通过分子检测来解决诊断不明确结节分流管理中的难题。2.探讨新型多基因检测平台在甲状腺癌高恶性风险地区的应用模式。方法:收集中国医学科学院肿瘤医院自2018年12月到2019年10月收治的2392例进行甲状腺细针穿刺并有细胞学诊断Bafilomycin A1体外结果的患者信息。细胞学诊断不明确病例共263例,排除不符合纳入标准及DNA或RNA量不足的病例后,剩余140例。对这140例细胞学诊断不明确病例进行新型多基因分子检测。该检测平台可检测基因点突变、插入/缺失、融合及基因的表达情况,并给出两种检测类型的结果即RNA分类器检测结果和DNA-RNA分类器检测结果。最后将分子检测结果同组织病理结果进行比较,分析新型多基因检测在细胞学诊断不明确甲状腺结节中的诊断效能。结果:总共有140例细胞学诊断不明确病例完成了分子检测,其中58例有术后病理结果,15例为良性;10例为交界性肿瘤;33例为恶性,这组病例的恶性(包括交界性病变)风险为74.1%。RNA分类器的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)的曲线下面积(Area under curve,AUC)分别是 93.0%、40.0%、81.6%、66.7%和 0.81。DNA-RNA分类器的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)的曲线下面积(Area under curve,AUC)分别是 88.4%、53.3%、84.4%、61.5%和 0.77。在 DNA-RNA 分类器中,检出26个基因突变和融合,包括5个BRAF v600E突变,2个BRAF K601E突变,10个RAS突变,2个TERT突变,7个基因融合(1个CCDC6-RET,1个NCOA4-RET,4个ETV6-NTRK3,1个STRN-ALK)。Pexidartinib临床试验结论:新型分子检测平台在细胞学诊断不明确结节再分类中有一定的诊断意义。基于本研究中诊断不明确结节的高恶性风险值,在本研究所的临床实践中我们建议将RNA和DNA-RNA检测作为“rule in”检测。分子检测平台是作为“rule in”或animal component-free medium者“rule out”的应用模式与诊断不明确结节的恶性风险密切相关。

目的分析乳腺癌患者行一步法乳房重建、二步法乳房重建术后不良事件和满意度的差异,从而为手术方式的选择提供证据。方法利用计算机检索PubMed、Web of Science、Cochrane图书馆、万方医学网、维普中文网、中国知网及中国生物医学文献数据库中自建库至2021年3月1日发表的有关一步法、二步法乳房重建的临床研究文献,排除不符合要求的selleck激酶抑制剂文献,对纳入研究的文infectious endocarditis献质量进行评估,并采用RevMan 5.4.1软件对提取的数据进行统计分析。结果共纳入17篇文献、14 582例患者,其中一步法组患者3005例,二步法组患者11 577例。一步法组患者乳房重建术后总体并发症发生率(OR=1.33,95%CI:1.01～1.75,P=0.04)、额外手术修复率(OR=1.71,95%CI:1.06～2.76,P=0.03)均显著高于二步法组,术后生理满意度(MD=-2.91,95%CI:-4.41～-1.40,P=0.0001)、社会心理满意度(MD=-3.11,95%CI:-4Apoptosis抑制剂.61～-1.61,P<0.0001)均显著低于二步法组;两组患者乳房重建术后性满意度、乳房满意度、结局满意度比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论二步法乳房重建在降低并发症发生率、额外手术修复率,提高术后生理、社会心理满意度方面具有优势,但二步法乳房重建手术需行两次手术,故应根据患者具体情况制订个性化方案。

本文旨在研究内源性n-3不饱和脂肪酸(n-3 polyunsaturated fatty acid,n-3PUFAs)对小鼠体重、炎症因子及自噬蛋白表达的影响,并探讨其作用机理。fat-1转基因小鼠与野生型C57BL/6小鼠的杂交后代经基因鉴定,分为fat-1转基因小鼠(n-3PUFAs内源性合成增加)与野生型小鼠两组。测定14周龄小鼠体重与体长,计算Lee’s指数,并称量小鼠不同解剖位置的脂肪;用试剂盒测定小鼠的血脂指标;用免疫荧光染色法和Western blot检测下丘脑中自噬相关蛋白表达水平;用实时荧光定量PCR检测下丘脑多种炎症因子和胶质细胞标志物的m RNA表达。结果显示,fat-1转基因小鼠Lee’s指数显著低于野生型小鼠(P<0.05)。fat-1转基因小鼠肠周脂肪、肾周脂肪和睾周脂肪质量均低于野生型小鼠。fat-1转基因小鼠外周血清中的高密度脂GDC-0973分子量蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholAlpelisibesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)、甘油三酯(triglyceride,TG)和总胆固醇(total cholesteroPumps & Manifoldsl,TC)水平均显著低于野生型小鼠(均P<0.05)。相对野生型小鼠,fat-1转基因小鼠下丘脑中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)、单核细胞趋化因子-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、小胶质细胞标志物TMEM119、星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)m RNA表达均显著下调。相对野生型小鼠,fat-1转基因小鼠的下丘脑自噬相关蛋白P62表达显著下调(P<0.01),而自噬相关蛋白ATG7表达显著上调(P<0.01)、LC3II/I比值显著升高(P<0.01)。以上结果提示,fat-1转基因小鼠体内增加的n-3PUFAs可抑制下丘脑炎症反应,维持下丘脑的正常功能和能量平衡,从而降低体重。

目的 对通心络胶囊治疗冠心病心绞痛的系统评价/Meta分析进PLX-4720行再评价。方法 检索建库至2022年5月1日中国知网(CNKI)、万方(WanFang Data)、维普(VIP)、PubMed、EMbase、the Cochrane Library数据库发表host-microbiome interactions的通心络胶囊治疗冠心病心绞痛的系统评价/Meta分析，由2位研究员筛选符合纳入与排除标准的系统评价，提取资料，交叉核对。采用AMSTAR2量表进行方法学质量评价，采用GRADE工具行证据等级评价。结果 共纳入9篇系统评价/Meta分析。AMSTARE2评价结果显示所有报告均为极低级质量。GEADE分级结果显示，57个结局指标中，证据质量为中级的指标3个，证据质量为低级的指标12个，证据质量为极低级的指标42个，研究的局限性和发表偏倚为主要降级原因。结论 通心络胶囊治疗冠心病心绞痛的相关系统评价/Meta分析的方法学质量总体不高，结论的证据水平普遍较低，未来需要严格遵循循证医学selleckchem GNE-140科研设计要求的临床试验和系统评价以提供更高质量的证据。

目的 观察石榴多酚鞣花酸(EA)干预对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠眼组织病变的改善作用。方法 将28只KM小鼠按体质量随机分为正常组(8只)、模型组(10只)和实验组(10只)。模型组和实验组按50 mg·kg~(-1)的剂量多次腹腔注射链脲佐菌素构造糖尿病模型。造模成功后，实验组按50 mg·kg~(-1)·d~(-1)的剂量灌胃给予5 mg·mL~(-1) EA,连续给药5周；其余2组均灌胃给予等量蒸馏水。用苏木精-伊红染色social immunity法观察眼组织尤其视网膜病理组织结构变化，用蛋白质印迹法点击此处检测小鼠眼组织中微管相关蛋白轻链3(LC3Ⅱ/Ⅰ)和选择性自噬接头蛋白(p62)蛋白的表达水平。结果 糖尿病小鼠眼组织病理损伤严重，鞣花酸干预后炎症、视网膜淤血均有较好的恢复。实验组、模型组和正常组的LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达量分别为0.52±0.10,0.14±0.08和1.00±0.20,p62相对表达量分别为1.61±0.50,3.28±0.70和1.00±0.4点击此处0,模型组的上述指标与正常组和实验组比较，差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 EA对糖尿病小鼠眼组织具有保护作用，可通过调节自噬蛋白，进而有效地改善眼组织病变。

将120只雏鸡随机平均分为空白寻找更多对照组、氟苯尼考(florfenicol, FFC)组和FFC+丹参多糖(Salvia miltiorrhiza polysaccharides, SMPs)组。从1日龄起，连续给药5 d。于第6天采取肝脏样品，进行转录组和蛋白组测序；采集和制备血清样品，保存剩余肝组织，用于检测其他相关的试GSI-IX供应商验指标。采用qPCR和PRM的方法验证测序结果。测序和验证结果显示，暴露于FFC之后，雏鸡肝脏中1 989个基因和917个蛋白质发生了显著变化。这些显著改变了的基因和蛋白与对刺激的反应、异生物质的代谢与氧化解毒等生物功能有关。FFC显著改变了PPAR信号通路中的13个基因和18个蛋白，SMPs的干预则调整了其中的7个显著差异基因和8个显著差异蛋白的表达水平。此外，FFC还显著地提高了雏鸡血清中AST和ALT的含量，降低了肝脏中TG、TC和ANDP的含Immune subtype量。SMPs则有效逆转了以上因子的变化趋势。结果表明，FFC改变了PPAR信号通路关键因子的表达水平，进而造成了雏鸡肝脏的脂质代谢紊乱。SMPs则通过进一步调控该通路，在一定程度上改善了雏鸡肝脏的脂质代谢紊乱，进而维护了肝脏的正常功能。