Jak信号通路

目的 探索男性乳腺癌患者皮肤及胸肌受累的预后价值。方法 回顾性分析2008年9月至2020年4月期间四川大学华西医院收治的79例男性乳腺癌患者的病例资料及随访信息，分析其临床病理特征及皮肤及胸肌受MLN4924化学结构累的预后价值。结果 79例男性乳腺癌患者初诊时皮肤/胸肌受累23例（29.1%）。所有患者均获访，中位随访时间为63.3个月（1.0～204.5个月），随访期间发生局部复发的患者共8例（10.1%），远处转移19例（24Neurally mediated hypotension.7%,19/77），死亡4例（5.1%）。多因素Cox比例风险回归结果表明，在控制年龄、BMI、T分期、N分期、HR状态、Ki-67表达、术后放疗和化疗因素，皮肤/胸肌受累是患者无病生存的危险因素[RR=4.48,95%CI(1.08,18.52),P=0.038]。MK-4827临床试验结论 初诊时皮肤/胸肌受累是预测男性乳腺癌患者不良预后的重要因素。然而，受限于回顾性研究的局限性及样本量大小，还需要更多高质量研究论证这一发现。

目的：研究瑞芬太尼联合右美托咪定在乳腺癌根治术患者手术过程中的镇痛效果，以及围手术期对患者外周血T淋巴细胞亚群的影响。方法：收集2018年到2020年进行根治术手术的68例乳腺癌患者作为研究对象，随机数表法分为对照组和研究组，各34例。对照组给予瑞芬太尼进行麻醉诱导的维持，研究组患者给予瑞芬太尼和右美托咪定进行麻醉诱导和维持。比Cobimetinib供应商较两组患者麻醉时间、手术时间、手术出血量，术后苏醒时间、拔管时间以及不良反应发生率，并比较两组患者手术后2 h、8 h和24 h VAS和Ramsay评分以及麻醉诱导前、术中1 hgenetic factor和术后24 h外周血T淋巴细胞亚群变化。结果：两组患者年龄、麻醉时间、手术时间、手术出www.selleck.cn/products/MK-1775血量以及手术后2 h、8 h和24 h VAS和Ramsay评分无显著差异（P>0.05）；研究组患者术后苏醒时间、拔管时间以及不良反应发生率均显著低于对照组患者（P<0.05）。麻醉诱导前，两组患者外周血CD3~+、CD4~+、CD8~+及CD4~+/CD8~+T淋巴细胞比例无显著差异（P>0.05）；手术中1 h和术后24 h，研究组患者外周血CD3~+、CD4~+以及CD4~+/CD8~+细胞比例均高于对照组患者，而外周血CD8~+细胞比例低于对照组患者，差异均显著具体统计学意义（P<0.05）。结论：乳腺癌根治术患者使用瑞芬太尼联合右美托咪定进行麻醉诱导和维持不会影响患者镇痛效果，但可以降低患者术后不良反应发生率，并影响患者围术期T淋巴细胞免疫功能。

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)肝硬化相关早期肝癌肝切除术后医院感染危险因素及血清中Notch受体/配体蛋白含量变化。方法 选择2016年1月-2021年1月郑州大学附属洛阳中心医院收治的HBV肝硬化相关早期肝癌行肝切除术患者92例为研究对象，依据其是否发生术后医院感染分为感染组21例和非感染组71例。单因素及多因素Logistic回归分acute infection析术后医院感染危险因素，绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Notch2、Notch4和Jagged1水平评估术后医院感染selleck HPLC的诊断价值。结果 感染组患者血清Notch2、Notch4和Jagged1水平均高于非感染组(P<0.05);多因素Logistics回归分析结果显示年龄、引流管留置时间、Notch2、Notch4和Jagged1水平是HBV肝硬化相关早期肝癌肝切除术后医院感染的PS-341 NMR独立危险因素(P<0.05); ROC分析结果显示，血清Notch2、Notch4和Jagged1水平诊断术后医院感染的曲线下面积分别为0.854、0.746、0.705。结论 年龄、引流管留置时间、Notch2、Notch4和Jagged1水平是HBV肝硬化相关早期肝癌肝切除术后医院感染的独立危险因素，Notch通路参与了患者的医院感染的进程。

目的:建立抗CD79b单抗及抗CD79b单抗-vc-MMAE的表面等离子共振(surface plasmon resonance, SPR)法和酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法评价其结合活性。方法:采用SPR法，使用Protein A芯片，测定抗CD79b单抗及抗CD79b单抗-vc-MMAE与其靶点CD79b蛋白之间的动力学常数包括结合常数(K_a)和解离常数(K_d)、亲和力常数(K_D)、半最大效应浓度(half maximal effective concentration, EC_(50))及相对效价；采用经典ELISA法测定抗CD79b单抗及抗CD79b单抗-vc-MMAE与CD79b的EC_(50)及相对效价。结果:经3次实验测定，抗CD79b单抗与CD79b的K_a为(2.61±0.14)×10~6 L·mol~(-1)·s~(-1),K_d为(1.87±0.12)×10~(-2)Trichostatin A s~(-1),K_D为(7.17±0.30)×10~(-9) mol·L~(-1),RSD均<10%;抗CD79b单抗-vc-MMAE与CD79b的K_a为(2.99±0.26)×10~6 L·molDibutyryl-cAMP分子量~(-1)·s~(-1),K_d为(1.46±0.04)×10~(-2) s~(-1),K_D为(4.88±0.31)×10~(-9) mol·L~(-1),RSD均<10%。经3次实验测定，SPR法测得抗CD79b单抗与CD79b的EC_(50)为(78.68±6.35)ng·mL~(-1),相对效价为(84.62±6.63)%,RSD均<10%;测得Cognitive remediation抗CD79b单抗-vc-MMAE与CD79b的EC_(50)为(35.93±0.75) ng·mL~(-1),相对效价为(84.74±1.76)%,RSD均<5%。经3次实验测定，ELISA法测得抗CD79b单抗与CD79b的EC_(50)为(22.66±0.41) ng·mL~(-1),相对效价为(95.70±1.74)%,RSD均<5%;测得抗CD79b单抗-vc-MMAE与CD79b的EC_(50)为(69.19±1.71) ng·mL~(-1),相对效价为(97.64±2.39)%,RSD均<5%,SPR和ELISA 2种方法结果基本一致。结论:建立了抗CD79b单抗及抗CD79b单抗-vc-MMAE的SPR法，并对靶点结合的动力学、亲和力进行评价，与ELISA方法在EC_(50)及相对效价方面进行了对比，为该类抗体偶联药物的研发提供参考。

弹性蛋白是人体内一种重要的结构蛋白,广泛存在于血管、肺、韧带、皮肤等结缔组织中。它有着维持组织形态,赋予组织伸缩形变的功能。弹性蛋白作为医用材料的理想原料,具有良好的生物相容性。利用基因重组制备的弹性蛋白,具有序列可控、成本低廉、可大规模生产及免疫原性低等优势,是目前弹性蛋白最佳的获取方式。因此,如何在原核生物重组体系内高效表达和纯化弹性蛋白,并制备高力学强度、高生物活性的弹性蛋白医用材料,是组织工程领域的热点问题。本论文旨在设计和开发一种高效的弹性蛋白表达体系,解决现有重组弹性蛋白体系序列单一、仿生度较差等问题;在此基础上,以高活性重组弹性蛋白为原料,制备机械强度高、生物相容性好的弹性蛋白凝胶,为皮肤修复敷料、人工皮肤等医用材料的研发提供新的应用策略,主要内容如下:1.以人源全长弹性蛋白作为序列设计的主要参考来源,选取其中的关键结构域,构建重组人源弹性蛋白序列RE(RecombinanMCC950化学结构t Elastin);同时在RE序列N端引入Sc12折叠结构域(V-foldon),构建重组融合弹性蛋白RFE(Recombinant Fusion Elastin)。利用重组大肠杆菌BL21体系进行高效表达,再通过镍离子亲和色谱法进一步纯化,制备高纯度的重组人源弹性蛋白与重组融合弹性蛋白。2.天然弹性蛋白具有可逆相变的特征性质。可逆相变实验表明,重组人源弹性蛋白RE具有与天然弹性蛋白相近的温敏聚集行为。圆二色谱实验结果表明重组人源弹性蛋白RE具有天然弹性蛋白的二级结构。在此基础上,使用四羟甲基氯化磷(THSAHA半抑制浓度PC)对重组人源弹性蛋白RE进行交联改性,制备出性质稳定、力学性能优异的弹性蛋白凝胶材料。该凝胶材料微观尺度上具有规整、均一的三维网孔状结构;材料具有良好的生物活性,能够支持细胞在材料表面存活并增殖。在Colorimetric and fluorescent biosensor动物实验中,该凝胶无免疫排斥反应,有效的减轻了创面的炎症,促进了小鼠受损皮肤的愈合再生过程,在皮肤医学等领域具有较高的临床应用价值。3.重组融合弹性蛋白RFE同样具有可逆相变的温敏聚集特性,同时V-foldon结构域明显增加了弹性蛋白二级结构的有序性,并调控弹性蛋白的相变聚集过程,使其呈现三聚体的聚集过渡态,进而使得重组蛋白的相变温度降低,更接近于天然弹性蛋白的性质。此外,相较于人源弹性蛋白RE,重组融合弹性蛋白RFE具有更高的蛋白表达量,相近的生物活性与交联能力,所形成的凝胶材料作用于小鼠皮肤紫外损伤模型,也具有良好的修复效果。

G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)是人体内最大的膜蛋白受体超家族,介导着非常多且重要的生理功能,也是最重要的药物研发靶标。目前经FDA批准上市的药物中,超过35%的药物靶向GPCRs,其中A类GPCRs是最受欢迎的药物靶标。但在靶向A类GPCRs的药物中,约75%的药物以胺能受体为靶点,使得该靶点的药物研发处于过饱和状态,另外仅有10%左右的药物以肽类受体为靶点,为了进一步扩大新药市场,新靶点的确认和开发迫在眉睫。因此,我们选择A类GPCRs中Canagliflozin的两种肽类受体,识别环状多肽的生长抑素受体SSTR4和识别线性多肽的神经调节肽受体NMU2进行结构生物学研究,旨在阐明不同种肽类受体的配体识别和选择性机制,为该类受体的靶点开发和药物研究提供结构信息。生长抑素受体4(somatostatin receptors 4,SSTR4)属于SSTRs中的一员,与SSTRs家族中的其它成员相比,SSTR4特异性地分布于中枢神经系统的下丘脑、大脑皮层和纹状体等,参与调控学习、记忆功能、疼痛和炎症相关通路,成为开发非阿片类镇痛/抗炎药物的新靶点。目前已有靶向SSTRs的药物上市,但所有的药物分子对SSTR4的亲和力S63845研究购买特别低。因此本课题以SSTR4为主要研究对象,对SSTR4与不同种类的配体和下游效应蛋白的复合物展开研究。利用昆虫细胞表达系统进行表达载体筛选、G蛋白种类筛选、纯化步骤和纯化条件筛选以及相关抗体测试,得到了满足单颗粒冷冻电镜(cryo-electronic microscopy,cryo-EM)实验需求的复合物样品。通过对冷冻电镜的制样条件进行筛选,冷冻电镜数据收集与处理,最终得到了分别率分别为2.9(?)和2.8(?)的内源性多肽激动剂SST-14和小分子选择性激动剂J-2156与SSTR4–G_(i1)复合物的结构模型。我们通过与实验室同期解析的SST-14与SSTR2–G_(i1)复合物的结构比较,阐述了多肽环状激动剂SST-14在结合不同受体亚型时保守的和特异性的配体识别机制。SST-14的关键药理学中心在SSTR2和SSTR4中采取了相似的结合构象并具有相似的相互作用模式,但在关键药理学中心之外的氨基酸与受体的相互作用模式存在巨大差异。该差异由SSTR2和SSTR4的序列和结构特异性导致,SSImmune changesT-14的灵活构象使其能够对不同的受体保有同等的高亲和力。由于根据SST-14改造而来的药物分子构象受到限制,使其只能选择性地结合一种或几种受体,从而导致了配体选择性。SSTR4与小分子激动剂J-2156的结构显示在SSTR4中存在一个特异性的亚结合口袋,靶向该亚结合口袋进行新型的药物设计则有望提高配体对SSTR4的识别和选择性。神经调节肽U受体2(neuromedin U receptor 2,NMU2)属于A类GPCRs神经肽类受体中的一员,与同家族受体NMU1广泛表达于外周组织中不同的是,NMU2偏向于在人体大脑内的特定区域表达,特别是下丘脑,延髓和垂体等。有研究表明NMU2的激活可以显著抑制小鼠的进食行为并降低小鼠体重,而抑制NMU2的功能则会使小鼠体重增加,因此NMU2作为新的治疗肥胖的靶点得到广泛关注。但由于NMU2相关配体研究比较滞后,阻碍了NMU2进一步的功能研究和药物发现。因此我们以NMU2为主要研究对象,对NMU2的表达载体进行了大量筛选和优化,对已有的NMU2的配体进行了测试,并对NMU2与选择性拮抗剂EX9657和R-PSOP进行多次大量结晶实验,但并未得到复合物晶体。后续我们利用已解析的Nm U-25和NMU2–G_(i1)复合物的结构模型对选择性拮抗剂R-PSOP进行分子对接试验。分子对接实验结果表明,R-PSOP位于NMU2配体结合口袋的最底部,与NMU2形成关键的极性和疏水相互作用,除此之外,R-PSOP与NMU2的第三根和第四根跨膜螺旋之间形成的疏水口袋也有紧密的疏水相互作用。我们利用磷酸肌醇累积实验对R-PSOP的结合模式进行功能验证发现,该疏水口袋是决定R-PSOP受体选择性的关键所在。这些结构信息揭示了R-PSOP的受体选择性机制,同时为设计靶向NMU2的选择性配体提供了新的思路。SSTR4和NMU2与内源性配体和选择性配体的结构模型进一步增加了我们对肽类受体的配体识别机制和选择性机制的认识,为以结构为基础的药物设计提供了可靠的结构模型,进一步促进靶向肽类受体的药物研发。

目的 分析凝血四项指标与肿瘤标志物在乙型肝炎相关肝癌诊断中的价值。方法 选取58例乙型肝炎相关肝癌患者作为研究组,选取同期本院接诊的60例良性肝病患者作为对照组。依次对其展开肝功能、凝血指标、肿瘤标志物检测。比较两组患者肝功能[总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)以及碱性磷酸酶(ALP)]、凝血四项指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)]、肿瘤标志物[甲胎蛋白(AFP)、岩藻糖苷酶(AFU)、血管内皮生长因子(VEGF)]水平以及凝血四项指标、肿瘤标志物各项指标的阳性率。结果 研究组患者TBIL(71.43±7.33)μmol/L、ALT(62.24±6.35)U/L、GGT(241.85±25.59)U/L、ALP(29Enasidenib溶解度6.34±30.09)U/L高于对照组的(46.62±2.75)μmol/L、(58.63±4.92)U/L、(163.48±17.54)U/L、(214.52±22.36)U/L, AST(64.82±9.31)U/L低于对照组的(75.43±7.73)U/L,差异均具有统计学意义(P<0.05)。研究组的PT(20.15±2.48)s、APTT(51.16±6.75)s、TT(23.01±4.78)s均长于对照组的(14.92±2.31)、(2quality control of Chinese medicine5.07±4.09)、(15.58±3.42)s, FIB(1.85±0.37)g/L低于对照组的(2.83±0.44)g/L, AFP(98.02±8.94)μg/L、VEGF(760.27±88.14)pg/ml、AFU(80.49±6.82)U/L均高于对照组的(11.74±3.21)μg/L、(186.31点击此处±20.16)pg/ml、(65.96±3.84)U/L,差异均具有统计学意义(P<0.05)。研究组PT、APTT、TT、FIB、AFP、AFU、VEGF阳性率分别为68.97%、70.69%、74.14%、84.48%、65.52%、60.34%、68.97%,均高于对照组的10.00%、8.33%、13.33%、15.00%、15.00%、13.33%、16.67%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 凝血四项、肿瘤标志物等指标在病发乙型肝炎相关肝癌的患者中均呈异常表达,积极开展上述指标检验工作,有助于尽早诊断患者病情,同时还能为后续治疗方案的拟定提供一定助力。

目的:通过营养膳食知-信-行(KAP)问卷调查①了解不寐患者膳食情况,并基于中医食疗学与现代营养学,对不寐患者进行饮食干预,②观察试验组与对照组的匹兹堡睡眠质量指数、焦虑自评量表得分、总体幸福感指数的变化。以探讨饮食疗法对不寐患者生活质量的影响,为临床制定疾病的饮食干预措施提供参考依据与数据支持。研究方法:选取2016年4月-2017年2月哈尔滨某三级甲等医院针灸科符合标准的不寐症患者76例,脱落4例,最终试验组36例,对照组36例。入院当日,护士与受试患者签署参与研究知情同意书,向其发放”睡眠障碍患者健康护理手册”,受试患者填写一般情况调查表、PSQI量表、SAS量表以及GWB量表。对照组按常规护理,试验组患者在常规护理基础上给予药食同源饮食干预。研究者到试验组患者的病房进行饮食方面知识培训,与患者共同制定每日个体化膳食方案,并按方案用餐。研究者将14天出院的两组受试患者分别加入到对照组微信群和试验组微信群进行干预分析和随访观察。30天后研究者再次对患者进行相关量表的测评,比较试验组和对照组患者睡眠的改善及SAS量表、(GWB量表得分的变化等情况。研究结果:1.干预前:两组患者一般资料、失眠知识掌握程度、焦虑情绪情况、总体幸福感的各项分值比较差异无统计学意义(P>0.05)。而在参与研究的72例患者中,发病年龄主要集中在18～44岁和59～70岁,分别占总人数的62.501%、27.778%;其中52.778%是女性;95.833%的患者文化程度为大专及以上;79.167%从事科技文教人员、医务工作者或商业工作。受试患者在失眠相关知识掌握量上”一般”程度的占总的76.389%;通过网络媒体获得相关知识的占52.778%。对中国营养学会发布的《中国居民膳食指南(2007)》了解程度上,”基本了解”和”全了解”者占总62.500%。对日常饮食”很重视”者占61.111%;在”营养、合理搭配”者占55.556%;饮食偏嗜清淡者占59.772%;饮食偏嗜咸者占37.500%。2.干预后:①试验组睡眠质量改善程度明显优于对照组(P<0.01);②发生焦虑倾向的百分比对照组高于试验组(P<0.01)。试验组患者焦虑量表得分在70分以上的由干预前faecal microbiome transplantation2.778%降低至无。药食同源饮食干预对试验获悉更多组患者具有明显的正向激励的影响(P<0.01);③患者总体幸福感指数试验组明显优MC3溶解度于对照组(P<0.01)。药食同源饮食干预明显提高试验组患者的总体幸福感指数(P<0.01)。研究结论1.制定出针对心脾两虚型不寐患者药食同源饮食护理方案,为今后临床护理提供了有效的数据支持。2.药食同源饮食干预可以改善睡眠质量,缓解焦虑情绪,提高总体幸福感,帮助患者树立战胜疾病的信心;3.药食同源饮食方案设计科学、操作简单、安全可靠,推广性强。

目的 探究神经生长因子(NGF)中和抗体、γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对食管癌Eca109细胞p75神经营养因子受体(p75~(NTR))核表达及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法 采用免疫荧光细胞化学技术，检测NGF中和抗体GNE-140、DAPT处理Eca109细胞前后p75~(NTR)、Ki67的表达变化；分别采用CCK-8法和Transwell细胞侵袭实验，检测NGF中和抗体、DAPT单独或联合处理Eca109细胞前后其增殖能力及侵袭能力的变化。结果 免疫荧光细胞化学MAPK抑制剂技术检测结果显示NGF中和抗体、DAPT处理细胞后，p75~(NTR)核表达的细胞数量均减少，且NGF中和抗体和DAPT联合处理细胞后，p75~(NTR)核表达的细胞数量最少，差异有统计学意义(P<0.05);CCK-8法及Transwell细胞侵袭实验结果显示NGF中和抗体、DAPT处理细胞后，细胞增殖、侵袭能力较处理前均相应减弱，差异有统计学意义(P<0auto immune disorder.05)。结论 NGF中和抗体、DAPT抑制p75~(NTR)的核转移，降低p75~(NTR)的核表达率，减弱细胞增殖、侵袭能力。

【目的】制备鼠伤寒沙门菌高免血清并纯化抗体，构建免疫磁珠，进行吸附效果评价，为建立鼠伤寒沙门菌快速检测方法奠定基础。【方法】利用试验兔制备高免血清，检测效价后纯化提取IgG抗体，纯化后的抗体采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺方法与四氧化三铁磁性纳米颗粒偶联，制备出鼠伤寒沙门菌免疫磁珠。利用抗原抗体反应原理，通过免疫磁珠对样品中的鼠伤寒沙门菌进行富集分离，将鼠伤寒Hospice and palliative medicine沙门菌捕获到磁珠表面，达到检测鼠伤寒沙门菌的目的。【结果】制备出的血清效价达1∶51 200,纯化后的抗体特异性强，仅与鼠伤寒沙门菌有凝集反应，与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌均无凝集反应；制备的免疫磁珠能够富集奶样样品、肉样样品与蛋黄样品中的鼠伤寒沙门菌，灵MRTX849价格敏度为10~(1)CFU/mL。【结论】该研究制备的鼠伤寒沙门菌免疫磁珠点击此处，能够有效富集各种样品基质中的鼠伤寒沙门菌，有望用于鼠伤寒沙门菌快速检测方法的建立。