Jak信号通路

目的 探讨橘红素(tangeretin, Tan)通过腺苷酸活化的蛋白激酶(AMP activated proteinkinasCCRG 81045分子式e, AMPK)/沉默信息调节因子2相关酶3(silent information regulator factor 2related enzyme 3,SIRT3)信号轴对人胃癌AGS细胞自噬的影响及机制。方法 用不同浓度(5、10、30、60、120μmol·L~(-1))Tan分别作用于AGS细胞24、48、72 h,用MTT法检测Tan对细胞的抑制作用，计算半抑制浓度(50%inhibitory concentration, IC_(50)),观察细胞形态变化情况；将细胞随机分为对照组、Tan组、激动剂组，其中Tan组、激动剂组分别用IC_(50)的Tan、AMPK激动剂A-769662处理细胞，对照组不做处理，培养48 h后，用透射电镜观察自噬泡，用MDC染色法观察细胞自噬情况，用qRT-PCR法检测AMPK以及SIRT3基因诱导量的变化，用Western blot检测细胞中相关蛋白AMPK、p-AMPK、SIRT3、LC3II、p62的表达水平。结果 培养24、48、72 h后，AGS细胞对Tan的IC_(50)值分别为(46.42±5.62)、(59.76±7.01)、(83.56±8.86)μmol·L~(-1),不同浓度的Tan作用于细胞，细胞形态发生改变，随着Tan浓度的升高，细胞形态变化程度加剧；透射电镜下对照组有少量自噬泡形成，Tan组无自噬泡形成，激动剂组有大量自噬泡形成；MDC染色结果显示，与对照组比较，Tan组的荧光强度较弱，激动剂组的荧光强度较强；与对照组比较，Tan组SIRT3 mRNA的相对表达量降低，激动剂组SIRT3 mRNA的相对表达量升高(P<0.05)。与Tan组比较，激动剂组SIRT3 mRNA的相对表达量升高(P<0.05)。与对照组比较，Tan组细胞中p-AMPK、SIRT3、LC3II蛋白的相对表达量降低，p62蛋白的相对表达量升高，激动剂组p-AMPK、medical ultrasoundSIRT3、LC3II蛋白的相对表达量升高，p62蛋白的相对表达量降低(P<0.05)。与Tan组比较，激动剂组细胞中RepSox纯度p-AMPK、SIRT3、LC3II蛋白的相对表达量升高，p62蛋白的相对表达量降低(P<0.05)。各组细胞中AMPK mRNA和蛋白的相对表达量比较，差异无统计学意义。结论 Tan可抑制人胃癌AGS细胞发生自噬，可能是通过调控AMPK/SIRT3信号通路发挥作用。

目的：探究阿托伐他汀与丹参川芎嗪联合治疗冠心病合并高脂血症的临床疗效。方法：选取2019年11月-2020年11月国药葛洲坝中心医院收治的104例冠心病合并高脂血症患者，通过计算机随机填表法分为试验组与参照组，各52例。参照组实施阿托伐他汀治疗，试验组在参照组基SBE-β-CD体外础上联合丹参川芎嗪治疗，对比两组患者临床疗效、血脂相关指标及心功能相关指标变PCI-32765说明书化情况。synthetic genetic circuit结果：试验组临床治疗总有效率明显高于参照组，其血脂相关指标低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)均低于参照组，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)高于参照组，其心功能相关指标左室舒张末压(LVEDP)、左室收缩末期容积(LVESV)均低于参照组，左室射血分数(LVEF)高于参照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间产生的不良反应比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论：冠心病合并高脂血症应用阿托伐他汀联合丹参川芎嗪治疗可有效改善心功能指标，促使整体血脂水平改善，临床疗效提升，值得应用推广。

鸡(Gallus gallus)原始生殖细胞(primordial germ cells, PGCs)在转基因动物制备和种质资源保护领域具有广泛应用前景，为了解析鸡PGCs形成的分子机制，本研究前期鉴定了1个调节鸡PGCs形成的关键长链非编码RNA-骨形成蛋白(long noncoding RNA-bone morphogenetic protein 4, Lnc BMP4)，可编码小肽EPC5 (expression in primordial germ cells chromosome 5)。本研究通过在线预测软件初步分析EPC5小肽的化学结构并进行初步的亚细胞定位bioreceptor orientation。通过化学合成法构建PET-EPC5-His-B2M原核融合表达载体并转化大肠杆菌(Escherichia coli) BL2感受态细胞，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-Dthiogalactopyranoside, IPTG)诱导后大量表达和纯化EPC5抗GW4869原。利用纯化的抗原进行动物免疫并收集抗血清(G1480, G1481)，通过ELISA检测抗血清效价。纯化抗体并通过Western blot进行鉴定。结果表明，EPC5主要定位于细胞内并具有RNA聚合酶亚基。成功构建PET-EPC5-His-B2M载体，且诱导表达后重组蛋白大小约为25 k D。ELISA检测发现G1480抗血清效价为1∶5.12×10~5 (OD_(抗血清)/OD_(免前血)≥2.1),G1481抗血清效价为1∶1.024×10~6 (OD_(抗血清)/OD_(免前血)≥2.1)。对G1480抗血清进行纯化，产生的EPC5多克隆抗体浓度为10 mg/m L,ELISA检测显示效价为9.8 ng/m L时(OD_(450)>0.2)。Western blot检测结果显示制备的多克隆抗体可以特异性结合体内外表达的EPC5蛋白。本研究成功地制备EPC5多克隆抗体，为进一步研究EPC5在PGCs形成过程中的功能和机制提供更多了基础。

目的 探讨裸花紫珠调控胰岛素样生长因子(IGF)-1/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对糖尿病足溃疡(DFU)大鼠创面愈合的影响。方法 采用高脂高糖饲料联合腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病(DM)模型大鼠，再用DM大鼠和正常大鼠构建溃疡模型，可分为正常组、模型组、凡士林纱布组、裸花紫珠组，每组12只。正常组和模型组均用生理盐水纱布外敷，凡士林纱布组(10 mg/kg),裸花紫珠组(20 mg/kg)。采用Photoshop软件测算大鼠创面愈合率，光学显微镜观察创缘组织结构变化。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测创面组织IGF-1、IGF-1受体(IGF-1R)、PI3K、Akt、一氧化氮合酶(eNOS)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、VEGF受体(VEGFR)2的基因表达水平；并用Western印迹检测各组组织中IGF-1、IGF-1R、PI3K、Akt、eNOS、VEGF、VEGFR2蛋白表达水平。结果 治疗后第3、7天，与模型组比较，凡士林纱布组、裸花紫珠组创面愈合率显著升高，且治疗第7天裸花紫珠组和正常组显著高于凡士林纱布组(P<0.05);病理结果显示，除模型组外，各组毛细血管、炎症细胞、纤维细胞生Other Automated Systems长均明显增加；RT-PCR检测提示，正常组、凡士林纱布组及裸花紫珠组创面组织中IGF-1、IGF-1R、PI3K、Akt、eNOS、VEGF、VEGFR2 mRNA及蛋白表达均较模型组明显升高，且正常组及裸花紫珠组明显高于凡士林纱布组(P<0.05)购买SB431542。结论 裸花紫珠能有效促Enasidenib浓度进DFU大鼠创面愈合，并可能通过IGF-1/PI3K/Akt信号通路发挥治疗作用。

由于烯丙基化合物在有机合成和天然产物中的重要作用,将简单易得的原料转化为烯丙基衍生物是现代有机合成中一个重要的研究课题。以末端二烯类化合物为原料与芳基碘化物以及亲核试剂的Epimedii Herba三组分串联芳基化烯丙基化反应受到了广大研究者们的热爱,因为其原料简单易得、能够在一锅操作中形成两个化学键。然而,在目前已报道的有关该三组分串联反应中,得到的产物基本都是线性烯丙基化衍生物,只有少数几例能够得到支化烯丙基产物的报道。并且,针对该三组分串联芳基化/烯丙基化反应,目前没有有关不对称催化反应产物的报道。因此,该类反应目前面临着两个挑战,首先是如何控制该三组分串联反应的区域选择性来得到支化烯丙基衍生物;其次是如何实现该类反应的不对称催化从而得到手性烯丙基化衍生物。本文以2,3-联烯醇为原料,开发了一种新的合成功能化烯丙基衍生物的方法,该方法能够有效的控制其区域选择性来得到支化烯丙基产物,且产物具有优异的对映选择性。主要的研究工作如下:1.三组分串联芳基化/烯丙基醚化反应的研究以2,3-联烯醇、芳基卤化物以及各种醇类化合物为底物,开发了一种新的三组分串联芳基化醚化反应的方法。该方法利用钯配合物与有机硼试剂的协同催化,从而实现了对该三组分串联反应区域选择性的控制。通过一系列的条件优化,成功的以较好的产率和优异的区域选择性得到了芳基化烯丙基醚化产物。通过克级放大,药物分子的后期功能化反应以及二氢呋喃产物的制备证明了该方法的合成效用。2.三组分串联芳基化/胺化反应的研究通过联烯醇与芳基卤化物以及2-吡啶酮的反应,成功开发了一种新的合成手性N-取代2-吡啶酮衍生物的催化方法。该方法是目前为止的第一例有关联烯的三组分串联反应的不对称催化的报道。在该反应体系中,通过Pd_2(dba)_3·CHCl_3和(S,S,S)-SKP配体原位生成的钯配合物对该反应进行催化,成功的在一锅selleck ABT-263法操作中实现了碳-碳键和碳-氮键的构建。使用不同取代芳基碘化物和2-吡啶酮对该反应方法进行了底物的扩展,均以较好的收率成功的得到了各种功能化的N-烯丙基取代的2-吡啶酮化合物。在该反应过程中,不仅能够顺利的得到支化烯丙基取代产物,同时得到的产物具有优异获悉更多的对映选择性。对照实验表明,联烯醇上的羟基对于该方法的反应性和支链选择性的控制至关重要。通过控制实验以及该过程的Hammett分析相结合,阐明了可能的反应机理。通过克级反应和官能度更高的手性2-吡啶酮化合物的合成证明了本发明方法的合成效用。3.三组分串联芳基化/烯丙基环化反应的研究成功的以联烯醇与芳基碘化物以及迈克尔受体为底物实现了第一例钯催化的三组分不对称串联芳基化烯丙基环化反应。该反应方法为合成具有多手性中心的四氢呋喃衍生物提供了一种新的思路。该反应在一锅法中以较高的收率得到了含有不同取代的多功能化的四氢呋喃类化合物,且其产物具有优异的对映选择性。同时,以该方法为关键步骤,通过较少的步骤以较高的产率成功得到了具有立体选择性的天然产物(-)-2-episesaminone,为该类天然产物的合成提供了一种新的简单有效的方法。

免疫检查点抑制剂(ICI)是一种新型抗肿瘤药物，其在产生持久抗肿瘤反应的同时，也可引起多种免疫相关不良反应(irAE)的发生。irAE可涉及多个系统，其中眼部irAE在临床上发生率极低。本此网站文报告2例恶性黑色素瘤(MM)患者使用ICI治疗后发生葡萄膜炎。第1例为青年男性右侧胸壁皮bioresponsive nanomedicine肤MM患者，予以帕博利珠单抗治疗42周后，出现双眼结膜充血、畏光、疼痛，伴视物模糊、变形及视力下降，行眼底荧光素血管造影(FFA)诊断为双眼葡萄膜炎(G3)。第2例为青年女性直肠MM患者，予以特瑞普利单抗治疗12周后，出现双眼结膜充血、视物模糊和视力下降，行FFABI 10773半抑制浓度诊断为双眼葡萄膜炎(G3)。两例患者予以激素治疗后视力恢复正常或症状得到缓解。ICI相关眼毒性虽然少见，若不及时发现及治疗会严重影响患者的生活质量，及早诊断和治疗的患者预后较好。

目的 旨在研究乙酰唑胺(Acetazolamide, AZ)对急性低氧应激雄性大鼠肺通气功能及动脉血气的影响。方法 通过FinePointe无创气道功能检测仪测定在20%O_2下通气1、2、3、4、5分钟和在15%O_2下通气1、2、3、4、5分钟时的雄性大鼠肺通气功能各项指标，观察常氧和急性低氧条件下雄性大鼠肺通气功能的变化情况，测定并分析常氧及急性低氧情况下雄性大鼠动脉血气指标变化情况，并对有关数据进行相关分析。结果 AZ组通入15%O_2后雄性大鼠动脉血pMultiplex ImmunoassaysH、HCO_3~-下降，PaO_2、SaO_2、PaCO_2升高(P<0.05),AZ组大鼠潮气量(TV)CB-839体外、呼吸频率(FR)、每分通气量(MV)、特殊气道导率(sGaw)指标高于对照组，气道阻力(Raw)、特殊气道阻力(sRaw)指标较对照组低(P<0.05Regorafenib抑制剂)。结论 AZ通过引起代谢性酸中毒等机制增加通气量，提高PaO_2、SaO_2,以此改善急性低氧应激雄性大鼠的肺通气功能。

目的：观察麝香保心丸联合苯磺酸左氨氯地平片治疗高血压合并冠心病患者的效果。方法：选取2020年5月至2021年4月该院收治的90例高血压合并冠心病患者进行前瞻性研究，按照随机数字表法将其分为对照组和观察组，各45例。对照组采用苯磺酸左氨氯地平片治疗，观察组采用麝香保心丸联合苯磺酸左氨氯地平片治疗。比较两组治疗前后血清炎性因子[超敏C反应蛋白（hs-CRP）、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、人可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)]水平、血压、心绞痛发作次数及持续时间、血脂指标[总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）]水平，临床疗效及不良反应发生率。结果：治疗后，两组血清hs-CRP、Lp-PLA2、sICAM-1、舒张压和收缩压水平均低于治疗前，且观察组低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；两组心绞痛发作次数均少于治疗前，且观察组少于对照组，两组心绞痛发作持续NVP-TNKS656体内时间均短于治疗前，且观察组短于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；两组TC、TG和LDL-C水平均低于治疗前，且观察组低于对照组，两组HDL-C水平均高于治疗前，且观察组高于对照Colforsin配制组，差异有统计学意义（P<0.05）；观察组治疗总有效率为88.89%(40/45)，高于对照组的66.67%(30/45)，差异Wound infection有统计学意义（P<0.05）；两组治疗期间均未见药物相关不良反应。结论：麝香保心丸联合苯磺酸左氨氯地平片治疗高血压合并冠心病患者可降低血清炎性因子水平和血压，缓解心绞痛症状，改善血脂指标水平，以及提高治疗总有效率，效果优于单用苯磺酸左氨氯地平片治疗。

目的 分析卡瑞利珠单抗治疗实体肿瘤患者的临床效果。方法 选择2019年8月-2021年10月实体肿瘤疾病患者35例作为研究观察对象，所有患者均在常规化疗药物治疗的基础上联合瑞利珠单抗治疗。观察患者临床治疗总有效率、不良反应发生率、肿瘤标记物水平(癌胚抗原CEA、神经元特异性烯醇化酶NSE、乳酸脱氢酶LDH)的变化。结果 35例患者中全缓解0例(0%)、部分缓解16例(45.72%)、稳定13例(37.14%)、进展6例(17.14%)、总控制率为29例(82.86%)。用药后患者发生恶心呕吐5例(14.28%)、免疫性肝炎1例(2.86%)、皮疹2例(5.71%)、心肌炎Cophylogenetic Signal1例(www.selleck.cn/products/VX-7652.86%),不良反应发生率为9例(25.71%)。治疗确认细节后，患者平CEA、NSE、LDH肿瘤标记物水平均明显低于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 在肿瘤患者给予卡瑞利珠单抗治疗后，患者在治疗有效率及相关肿瘤标记物水平均得到显著改善，未发生严重不良反应。

近年来,随着人类活动的增加,许多有害物质被排入水环境。其中,重金属离子(heavy metal ions,CX-5461抑制剂HMIs)被认为是最危险的污染物之一,其自身具有的不可降解性、生物积累性和高毒性对生态环境以及人类健康造成了严重的威胁。因此,实现水体中HMIs的快速灵敏分析具有重要意义。目前,HMIs的检测主要依靠传统的仪器分析技术,所用的分析仪器价格昂贵、检测成本高、样品预处理复杂,且不适于现场分析和连续在线检测。与此相比,生物传感技术因其操作简便、响应快速、成本低、抗干扰能力强等优势在污染物快速分析diABZI STING agonist小鼠方面显示出极大的应用潜力。其中,DNA生物传感技术以DNA作为传感元件,具有较高的灵敏度、特异性和现场检测能力。基于此,本文构建了几种新型DNA生物传感器,可实现对环境HMIs进行快速、高灵敏分析的目的。主要研究内容如下:(1)构建了一种基于脱氧核酶(DNAzyme)的新型电化学DNA生物传感器,实现了水中Pb~(2+)的超灵敏检测。在本研究中,将DNAzyme固定在磁珠上形成DNAzyme步行器参与目标物的识别并触发后续的链置换反应(strand displacement reaction,SDR)以提高生物传感器的灵敏度;同时将三嵌段聚腺嘌呤探针固定在电极表面,特异性捕获SDR的产物,并自组装形成大量双链,供电化学活性物质亚甲基蓝嵌入。最终,构建的电化学DNA生物传感器在无需添加天然酶、使用特殊器件以及合成无机材料的情况下成功实现了对实际样品中Pb~(2+)的超灵敏检测,且该方法具有检测限低(limit of detection,LOD,0.039 p M)和检测范围宽(0.1 p M–500 n M)等优势。(2)上述工作中所用的聚腺嘌呤探针虽然具备多种优势,但作为单链DNA,其可控性和稳定性较低。为解决这一问题,本研究设计了一种聚腺嘌呤DNA四面体(ATDN)探针,以此构建了一种可再生电化学传感器,实现了对Pb~(2+)的快速灵敏检测(LOD,0.035 n M)。在本研究中,由于兼备了聚腺嘌呤和四面体的优势,ATDN能够高效稳定地固定在电极表面,极大地提高了探针的杂交效率。且ATDN自身的静电斥力以及空间结构使其具备了调控探针空间位置的能力,从而实现电活性物质与电极表面距离的调控。此外,基底材料的使用保障了传感器的检测性能以及与其它策略的兼容性。该方法简单快捷,有较高的应用潜力。(3)上述工作均基于单目标物分析,而真实环境中往往是多种重金属共存,为此,本研究设计了一种新型的熵驱动“DNA纳米花”结构用于多目标同时分析。这种结构可富集大量荧光探针,从而提高反应效率,改善体系稳定性,且与SDR体系兼容后,仅需一步操作即可实现信号的放大与输出。以此构建的荧光生物传感器,实现了水中Pb~(2+)、Cu~(2+)和Hg~(2+)的同时快速检测,其LOD分别dental pathology为0.13n M、3.5 p M和4.6 p M。得益于DNA的可编程性及体系的灵活性,该方法可通过添加或替换探针实现对其它目标物的检测,具有极高的应用价值。