Jak信号通路

目的 观察蛋白激酶D (PKD)的抑制剂CRT0066101对唾液腺腺样囊性癌（SACC）细胞迁移能力的影响，并探讨其相关机制，为SACC治疗提供新策略。方法 将不同浓度的CRT0066101作用于SACC-LM细胞，通过蛋白质印迹（Western blot）和细胞免疫荧光染色检测CRT0066101对细胞PKD磷酸化活化的作用；Transwell实验检测CRT0066101对细胞迁移能力的影响；利用WestFracture-related infectionern blot、细胞免疫荧光染色和实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测药物对上皮间充质转化（EMT）相关指标蛋白的影响；用蛋白酶体抑制剂处理CRT0066101作用后的细胞和对照细胞，Western blot检测锌指转录因子（Snaiselleckcheml）蛋白的表达。结果 CRT0066101能抑制PMA诱导的SACC-LM细胞PKD磷酸化；降低细胞迁移数。CRT0066101能降低N-钙黏着蛋白和Snail蛋白表达量，增加E-钙黏着蛋白和CDH1基因的表达。CRT0066101能调控蛋白酶体介导的Snail蛋白降解。结论 CRT0066101抑制SACC-LM细胞迁移能力，调节EMT相关点击此处蛋白和基因表达，机制可能与蛋白酶体介导的Snail蛋白降解有关。

目的：探讨SCR7对三阴性乳腺癌顺铂化疗的增敏作用。方法：选用三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞分为空白对照组、10μmol/L顺铂对照组和联合组（10μmol/L顺铂+10、20和40μmol/L SCR7），采用CCK-8法检测细胞活性并计算细胞增殖抑制率；取对数期TNBC MDA-MB-231细胞构建三阴性乳腺癌移植瘤小鼠模型，建模成功后荷瘤裸鼠随机分为对照组、SCR7组，顺铂组、SCR7+顺铂组；饲养24 d后，观察比较各组荷瘤鼠肿瘤质量、瘤体体selleckchem积的变化，计算肿瘤抑制率；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察瘤体组织细胞形态学变化；原位末端标记法（in situ end labeling,TUNEL）检测乳腺癌肿瘤组织的凋亡；采用Western blot检测X射线修复交叉互补蛋白1(X-ray repair cross complementing 1,XRCC1)、多聚（ADP核糖）聚合酶1[poselleck NMRly(adp ribose) polymerase 1,PARP1]蛋Equine infectious anemia virus白表达。结果：联合组细胞增殖抑制率均高于对照组（P<0.05），且随SCR7质量浓度增大呈逐渐升高趋势（P<0.05）。体内动物实验发现：相较于对照组，SCR7组、顺铂组、SCR7+顺铂组中的乳腺癌肿瘤体积、瘤重减小（P<0.05），其肿瘤抑制率分别是32%、40%、81%;SCR7+顺铂组较顺铂组减少更明显（P<0.05），且小鼠体质量与SCR7组、顺铂组相比无明显差异（P>0.05）;HE染色观察干预组肿瘤组织均呈现明显形态学改变，其中SCR7+顺铂组肿瘤细胞退变变化最明显；TUNEL染色显示SCR7+顺铂组肿瘤细胞凋亡最为严重，可见大量红色细胞凋亡；Western blot检测发现，SCR7+顺铂组XRCC1、PARP1蛋白表达均明显低于其他组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：SCR7在体内外对三阴乳腺癌顺铂化疗均有增敏作用。

目的:研究愈Telaglenastat分子量口宁(YKN)中土茯苓对于大鼠复发性阿弗他溃疡(RAU)抗炎作用。方法:随机将50只大鼠分为5组：左旋咪唑、模型对照、YKN、YKN-T(YKN去土茯苓)及土茯苓组，每组10只；化学灼烧法建立RAU模型，连续给药7 d。模型对照组给予等体积生理盐水，观察造模后用药1、3、7 d大鼠口腔溃疡状况。麻醉下脱颈处死大鼠，HE染色观察病理变化。蛋白免疫印记法(Western blot, WB)检查溃疡组织中TLR4、PI3K、p-PI3K、AKT、NF-κB、mTOR的蛋白表达量，ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-α水平。结果:模型对照组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高(P<0.01),土茯苓组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著下调(P<0.01)。WB示模型对照组TLR4、AKT、NF-κB、mTOR蛋白表达量显著上调，p-PI3K/PI3K显著下降，土茯苓组TLR4、AKT、NF-κB、mTOR表达量显著下降，p-PI3K/PI3K显著上升。结论:土茯苓对于RAU大鼠体内炎BMS-907351半抑制浓度性因子可以起到调和作用，可能通过抑制相kidney biopsy关通路以降低体内炎性因子，达到促进口腔溃疡愈合的作用。

目的 探讨黄芪皂苷Ⅱ(AsⅡ)对肾透明细胞癌786-O细胞增殖的影响及潜在机制。方法 噻唑兰(MTT)法和克隆实验检测AsⅡ对786-O细胞的生长和集落形成的Adezmapimod小鼠抑制作用。细胞流式术检测ASⅡ的凋亡诱导作用。随后，用免疫印迹法检测不同处理组细胞PI3K-AKT-mTOR通路蛋白及凋亡执行蛋白的变化，最后利用PI3K-AKT-mTOR通路激活剂IGF-1与AsⅡ对细胞共处理后，流式细胞术检测细胞凋亡水平的变化，进一步验证PI3K-AKT-mTOR通路在凋亡诱导中的作用。结果 AsⅡ对786-O细胞的增殖抑制效应具有浓度和时间依赖性，时间与浓度之间有交Hedgehog/Smoothened抑制剂互作用(F_(时间)=513.00,P<0.001;F_(浓度)=1 678.00,P<0.00Bayesian biostatistics1;F_(时间×浓度)=18.23,P<0.001),并可抑制细胞集落形成。AsⅡ可诱导细胞凋亡并诱导凋亡执行蛋白cleved caspase-3的表达(P_(0μmol/L AsⅡ组vs 10μmol/L AsⅡ组)=0.013 9,P_(0μmol/L AsⅡ组vs 20μmol/L AsⅡ组)<0.001)。AsⅡ可抑制PI3K、AKT、mTOR蛋白的磷酸化(p-PI3K:P_(0μmol/L AsⅡ组vs 20μmol/L AsⅡ组)=0.032 4;p-mTOR:P_(0μmol/L AsⅡ组vs 10μmol/L AsⅡ组)=0.004 1,P_(0μmol/L AsⅡ组vs 20μmol/L AsⅡ组)<0.001;p-AKT:P_(0μmol/L AsⅡ组vs 10μmol/L AsⅡ组)=0.003 2,P_(0μmol/L AsⅡ组vs 20μmol/L AsⅡ组)=0.001 2)。IGF-1可以逆转AsⅡ对AKT的磷酸化(P=0.006 8),并减弱AsⅡ对786-O细胞的凋亡诱导效应。结论 AsⅡ可抑制肾癌780-O细胞的增殖和集落形成，并通过抑制PI3K-AKT-mTOR信号通路的磷酸化，上调cleved caspase-3的表达，进而诱导细胞凋亡。

目的：总结寻常型银屑病合并大疱性类天疱疮（BP）患者的临床特征及治疗方法。方法：回顾分析武汉市第一医院2012至2021年11例寻常型银屑病合并BP的临床特征、实验室检查结果、治疗及MDV3100纯度预后。结果：11例寻常型银屑病合并BP患者中，其中男9例，女2例，平均年龄（67.73±13.06）岁，银屑病均先于BP发病，平均间隔时间为（15.95±13.17）年。11例BP均发生在外观正常的皮肤或红斑上。5例有明确窄谱中波紫外线光疗史，8例直接免疫荧光检查阳性，6例患者检测BP180抗体均为阳性，NN2211细胞培养4例患者检测BP230抗体仅1例阳性，8例给予系统糖皮质激素和/或免疫抑制剂治疗，3例给予四环素类、烟酰胺及局部外用激素治疗，其中1例给予免疫球蛋白冲击治疗。随访半年至6年，8例患Biofertilizer-like organism者无新发水疱，银屑病局限性复发，3例死亡。结论：寻常型银屑病合并大疱性类天疱疮临床相对少见，中老年男性多见，中重度患者给予糖皮质激素和或免疫抑制剂治疗有效，控制病情后先对糖皮质激素规律减量，较少引起银屑病加重。

目的 运用CRUSADE评分系统，探讨质子泵抑制剂在预防经皮冠状动脉介入治疗（PCISevere malaria infection）术后消化道出血中的价值。方法 前瞻性纳入华北医疗健康集团峰峰总医院心内科2018年3月—2021年12月收治的接受支架植入治疗的冠心病患者600例，依据CRUSADE评分系统的危险分层，把极低危、低危的归为低危分层组，中危、高危、很高危的归为中高危组，各危险分层按1∶1比例随机分为对照组与试验组，各组患者在PCI术前、术后均给予阿司匹林肠溶片、硫酸氢氯吡格雷片口服，试验组在此基础上给予联合质子泵抑制剂（雷贝拉唑肠溶片每天20 mg或泮托拉唑钠肠溶片每天40 mg）自PCI术前至术后连续服药3个月。随访12个月，观察各组患者消化道出血事件以及主要心脑血管不良事件发生情况。结果 根据CRUSADE评分的不同，中高危分层对照组较低危分层对照组的消化道出血事件明显selleckchem Dorsomorphin增加，差异有统计学意义（P<0.05）。同https://www.selleck.cn/products/Methazolastone.html时，与低危分层对照组相比，低危分层试验组消化道出血事件发生率未见明显差异（P>0.05）。中高危分层试验组消化道出血事件发生率较中高危分层对照组明显减少，差异有统计学意义（P<0.05）。在同一类CRUSADE评分系统危险分层中，试验组和对照组患者主要心脑血管不良事件发生率未见明显差异（P>0.05）。结论 应用CRUSADE评分系统进行危险分层，干预出血高危风险患者，PCI术后加用质子泵抑制剂可有效预防消化道出血，且未增加心脑血管不良事件风险。

降钙素原(Procalcitonin,PCT)是血清降钙素的一种前肽,被认为是诊断和管理细菌败血症的理想生物标志物,准确测定降钙素原在细菌性感染诊断中具有重要的意义。此前报道的大部分生物传感器都存在样本消耗量大的问题,导致较难应用于采血困难的患者,例如婴儿、老人和其他病情危重的患者。乳铁蛋白(Lactoferrin,Lf)是一种重要的营养强化剂,是奶粉中的明星营养素之一。快速、准确的定量检测奶粉中Lf含量是评价Lf强化奶粉质量的关键。然而,目前报道的Lf定量免疫分析方法大多存在样品预处理步骤繁琐、检测时间长等问题,不能满足奶粉中Lf快速检测的需求。动态光散射(Dynamic light scattering,DLS)是一种用于测量颗粒粒径和粒径分布的常用光学技术。基于抗原抗体的DLS免疫传感器由于抗原与抗体的结合亲和力有限,检测蛋白质的灵敏度通常寻找更多在ng/m L水平,难以满足微量目标物检测的需求,且该反应通常需要一对完全匹配的抗体。相反,硼酸亲和材料对含顺式二醇的化合物(如糖蛋白)表现出更高的结合亲和力(因为硼酸配体可以共价结合顺式二醇形成五元或六元环状酯)。PCT和Lf都是糖蛋白物质,均含有顺式二醇结构。本研究提出了一种基于硼酸亲和识别(Boronate affinity recognition,BAR)提高DLS生物传感器检测灵敏度的新策略,以实现PCT和Lf的超灵敏检测。在该生物传感系统中,以单克隆抗体修饰的磁性纳米颗粒(MNP@mAb)为探针,从样本中捕获目标物分子形成免疫复合物;以多价苯基硼酸标记的牛血清白蛋白(BSA@PBA)为“脚手架”,引发免疫复合物的聚集,从而导致MNP@mAb水化粒径(D_H)的增加。由于硼酸基团与糖蛋白上顺式二醇反应形成共价键,因此该方法检测PCT和LfKD025体内实验剂量具有更高的灵敏度。在最优检测条件下,该方法对PCT的检出限(Limit of detection,LOD)为0.03 pg/m L,线性范围为0.035 pg/m L-250pg/m L,回归方程为ΔD_H=6.985ln(C_(PCT))+24.789(R~2=0.989);实际血清加标回收实验结果显示,该方法批内和批间检测平均回收率为96.08%-117.6Health-care associated infection3%,变异系数(CV)介于2.93%-14.96%。对Lf的检出限为1.36 ng/m L,线性范围为1-10000 ng/m L,回归方程为y=7.4199ln(x)+142.85(R~2=0.96);实际奶粉加标回收实验结果显示,批内和批间的平均回收率为90.13%-108.64%,CV值范围为5.03%-14.83%。以上结果表明该方法检测实际样本中的糖蛋白具有较好的准确度和精确度。同时,该DLS免疫传感器对实际样本中PCT和Lf具有较高的特异性。此外,该反应总体检测总时间约15 min,样品需求量仅需1μL。进一步将该方法的检测结果与其他商业化免疫分析试剂盒相对比,如化学发光免疫(Chemiluminescence immunoassay,CLIA)试剂盒和酶联免疫(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒,两者的结果具有良好的一致性。总之,本研究提出以苯硼酸作为抗体替代物检测糖蛋白,克服了传统夹心免疫分析方法检测糖蛋白时需要匹配抗体的缺陷,同时极大地提高了免疫分析方法的灵敏度,缩短了检测时间。因此,这项工作为DLS生物传感器快速、超灵敏检测其他含顺式二醇结构的物质提供了一个简便通用的平台。

背景：椎间盘退变在临床上被认为是引起下腰痛的主要病因，但由于椎间盘退变发病机制尚不明确，目前仍缺乏有效手段来延缓疾病进展。单细胞转录组测序技术可以在单个细胞水平对mRNA进行扩增和测序，揭示单个细胞的基因表达强度，根据细胞的异质性发现组织中的不同细胞亚群，在分子水平上研究椎间盘退变的发病机制，为其早期诊断和治疗提供新的理论依据。目的：介绍了单细胞转录组测序技术的基本原理并综述了近年来单细胞转录组测序技术在椎间盘退变发病机制中的研究进展。方法：应用计算机系统检索PubMed、Web of Science、中国知网和万方数据库中2012-2022年出版的文献，英文检索词为：“single-cell RNA sequencing,intervertebral disc degeneration,sequencing technology”；中文检索词为“单细胞转录组测序，椎间盘退变，测Bioethanol production序技术”。排除重复、质量较差及不相关的文献，最终纳入70篇文献进行综述分析。结果与结论INCB018424半抑制浓度：(1)鉴定了稳态软骨样细胞、肥大软骨样髓核细胞、纤维髓核细胞等新型细胞亚群，识别了这几种细胞亚群的标记基因、转录因子，并阐述了这几种细胞亚群在椎间盘退变发生发展过程中的功能及分化轨迹和细胞命运，同时提出了祖细胞概念，确定了具备祖细胞特性的细胞亚群，在小鼠体内验证了该细胞亚群治疗椎间盘退变的有效性。(2)识别了兼具软骨特性和纤维特性的纤维软骨样纤维环细胞和纤维环干细胞，并在体外结合纤维软骨诱导剂和丝素蛋白及透明质酸制备了一种新型复合水凝胶，通过小鼠体内实验验证了这种水凝胶既能修复纤维环组织也能恢复软骨基质Cobimetinib molecular weight，对于椎间盘退变有显著治疗效果。(3)在终板软骨组织中发现了调节性软骨细胞，其在椎间盘退变进展中出现2种截然不同的命运并明确了2种命运中的差异基因，细胞间通讯分析表示调节性软骨细胞与内皮细胞之间互相作用从而促进血管生成。(4)在退变椎间盘组织中鉴定出巨噬细胞、T细胞、髓系祖细胞和嗜中性粒细胞等免疫细胞，证明了椎间盘退变过程中存在免疫反应，并发现载脂蛋白诱导了巨噬细胞M1和M2亚型的极化，这种极化过程通过MIF信号通路放大炎症反应来影响髓核祖细胞的活性。

目的：基于肝气虚理论和线粒体自噬探讨衰老机制，观察补肝散对衰老大鼠肝脏损伤的影响。方法：SPF级雄性SD大鼠32只，随机分为空白组、模型组、补肝散组、雷帕霉素组，每组8只。除空白组腹腔注射0.9%氯化钠溶液（10 mL/kg）外，其余各组均腹腔注射D-半乳糖溶液（D-gal,400 mg/kg），复制衰老大鼠模型。造模同时，补肝散组灌服补肝散煎液（14.06 g/kg），雷帕霉素组灌服雷帕霉素溶液（1 mg/kg），空白组和模型组灌服等量0.9%氯化钠溶液，连续56 d。测定各组大鼠体质量、抓力，血清丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）含量。HE染色观察各组大鼠肝组织病理学变化；RT-qPCR检plant bioactivity测线粒体融合蛋白（Mfn）1、Mfn2、自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62 mRNA表达水平；免疫组化染色（ABC法）检测Beclin1、p62蛋白表达；Western Blot测定Mfn1、Mfn2、LC3蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组大鼠出现肝细胞水肿购买Liproxstatin-1，肝血窦受挤压变窄，轻度脂肪变性及少量肝细胞坏死，另可见肝细胞嗜酸性病变及凋亡的肝细胞；体质量和抓力显著降低（此网站P<0.05）；血清MDA含量升高（P<0.05）,SOD活性降低（P<0.05）,ALT、AST、ALP含量升高（P<0.05）；肝组织中Mfn1、Mfn2、p62 mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05）,Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05）。与模型组比较，补肝散组大鼠肝细胞水肿减轻，脂肪变性减少，嗜酸性病变及凋亡的肝细胞明显减少；体质量和抓力显著升高（P<0.05）；血清MDA含量降低（P<0.05）,SOD活性升高（P<0.05）,ALT、AST、ALP含量降低（P<0.05）；肝组织中Mfn1、Mfn2、p62mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05）,Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论：衰老大鼠肝脏损伤与线粒体自噬功能下降关系密切，可作为肝虚致衰的重要机制；补肝散可通过提高肝脏线粒体自噬水平，减缓衰老大鼠肝脏损伤程度。

有机含氮化合物是指分子结构中含有碳氮键(C-N)的一类化合物。在自然界中,存在许多含氮有机物,例如多肽,氨基酸,蛋白质,生物碱等,这些含氮有机物与我们的生命有着非常密切的关系。此外,含氮有机化合物还是重要的药物分子和天然产物的构成,在自然界中广泛分布。在目前所报道的α-烯丙基胺化合物的合成过程中,大都使用了N-取代(强吸电子基团)亚胺作为底物,但是对于那些本身不稳定,不容易分离的亚胺分子而言,它们与烯丙基亲核试剂的加成反应目前还没有很多的报道。本论文以亚胺分LGX818供应商子与烯丙基亲核试剂的加成反应为切入点,主要研究了重氮化合物、叠氮化合物和α,β,γ-取代的烯丙基硼酸频哪醇酯三组分串联合成α-烯丙基氨基酸酯化合物的反应。论文包括三个部分:基于亚胺合成α-烯丙基胺化合物的研究进展;金属卡宾参与的三组分串联合成α-烯丙基氨基酸酯化合物的研究;金属卡宾参与的三组分串联合成手性α-烯丙基氨基酸酯化合物的研究。本论文第一部分介绍了论文的研究背景。分别综述了 α-烯丙基胺骨架化合物作为合成天然产物药物的前体和以N-取代亚胺分子作为底物合成α-烯丙基胺骨架化合物的研究进展。本论文第二部分重点介绍了我们使用重氮化合物、叠氮化合物和α,β,Y-取代的烯丙基硼酸频哪醇酯作为底物,通过三组分串联合成α-烯丙基氨基酸酯化合物的研究。使用Rh2(esp)2作为催化剂,重氮乙酸乙酯和苄基叠氮反应首先生成亚胺分子,接着亚胺分子与烯丙基硼酸频哪醇酯发生亲核加成反应得到了 α-烯丙基氨基酸酯化合物。反应通过一锅法,BMS-354825分子量且只需要相对温和的实验条件(室温,DCM溶剂)。最后进行了底物的拓展,结果显示该反应具有良好的官能团耐受性,可得到一系列良好收率(高达84%)不同取代的α-烯丙基氨基酸酯化合物。这些产物可作为合成多种多肽和蛋白质的前体。本论文第三部分介绍了我们使用重氮酯化合物、叠氮化合物和α,β,γ-取代的烯丙基硼酸频哪醇酯作为底物,三组分串联合成手性α-烯丙基氨基酸酯化合物方面所做的初步尝试。从手性铑催化剂的筛选,CuPF6(MeCN)4-配体的筛选,底物的deep sternal wound infection筛选等方面来进行实验。