Jak信号通路

目的：探究不同氧浓度环境对结肠癌细胞增殖、自噬的影响，并基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路探讨养阴化瘀解毒方在低氧环境下对结肠癌细胞自噬及凋亡的影响。方法：HCT-116细胞分为常氧组、1%低氧组、5%低氧组，通过细胞增殖与毒性检测法（MTS）检测细胞存活率，单丹磺酰尸胺（MDC）染色观察不同氧浓度下细胞自噬荧光表达情况；在5%低氧微环境下用养阴化瘀解毒方干预HCT-116细胞，分ICI 46474体内实验剂量为正常组、空白血清组、养阴化瘀解毒方低、中、高剂量组；通过细胞增殖与毒性检测法（MTS）计算各组细胞的抑制率；单丹磺酰尸胺（MDC）染色探究各组自噬细胞率的变化；利用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）/碘化丙锭（PI）流式细胞术检测各组细胞凋亡率；蛋白印记分析法（Western blot）检测不同组自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3Ⅱ/LC3Ⅰ）、酵母ATG6同源物（Beclin-1）、泛素结合蛋白（p62）和凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2/腺病毒E1B相互作用蛋白3（BNIP-3）、Bcl-2关联X蛋白（Bax）、活化的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Cleaved Casepase-3）及缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和通路蛋白磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）表达情况。结果：与常氧组相比，1%低氧组Enfermedades cardiovasculares与5%低氧组细胞存活率均明显上升，以5%低氧组细胞存活率提升幅度最大，具有统计学意义（P<0.01）；与常氧组相比，1%低氧组与5%低氧组细胞自噬荧光强度均明显增强，且以5%低氧环境下MDC染色自噬荧光表达最强；低氧环境下，与空白血清组相比，中、高剂量组细胞抑制率明显提高、自噬细胞率明显降低、细胞凋亡率明显升高，差异具有统计学意selleckchem SBE-β-CD义（P<0.01）；与空白血清组相比，中、高剂量组Beclin-1蛋白表达明显降低（P<0.05）；与低剂量组相比，高剂量组Beclin-1蛋白表达降低（P<0.05）；与空白血清组相比，低、中、高剂量组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达均明显降低（P<0.05，P<0.01）；与空白血清组相比，中、高剂量组p62蛋白表达升高（P<0.01）；与低剂量组相比，高剂量组p62蛋白表达升高（P<0.05）；与空白血清组相比，高剂量组促凋亡蛋白BNIP-3、Bax表达升高，抑凋亡蛋白Bcl-2表达降低（P<0.01）；与低剂量组相比，高剂量组Bax蛋白表达上升（P<0.05）；与空白血清组相比，给药组促凋亡蛋白Cleaved Casepase-3无统计学意义；与空白血清组相比，中、高剂量组低氧因子HIF-1α表达明显降低（P<0.01）；与空白血清组相比，高剂量组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt表达上升（P<0.05、P<0.01）；与中剂量相比，高剂量组p-Akt/Akt表达上升（P<0.05）。结论：低氧微环境能明显促进结肠癌细胞自噬及增殖，发挥细胞保护作用，养阴化瘀解毒方在5%低氧环境下能明显抑制结肠癌细胞自噬和增殖，并促进细胞凋亡，其机制可能与上调PI3K/Akt信号通路有关。

目的 了解磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B,PI3K/ICI 46474采购AKT)信号通路在甲状腺癌中的研diABZI STING agonist价格究现状以及在甲状腺癌的发生、细胞分化、侵袭和转移中的作用，以发现甲状腺癌治疗的潜在靶点。方法 检索Integrated Chinese and western medicine关于PI3K/AKT信号通路在甲状腺癌中研究的相关文献并进行分析及总结。结果 PI3K/AKT信号通路在甲状腺癌中直接或间接地被异常活化，导致细胞凋亡受抑制、恶性增殖、周期进展加速、侵袭、转移等，从而促进甲状腺癌的发生及发展；同时也有一些抑癌基因、微小RNA、长链非编码RNA等间接抑制PI3K/AKT信号通路的激活或直接作用于PI3K/AKT信号通路并抑制其活性，从而抑制甲状腺癌的发生和发展。结论 在甲状腺癌中，有不少蛋白、基因、微小RNA和长链非编码RNA通过不同的靶点直接或间接地激活PI3K/AKT信号通路，促进甲状腺癌的发生与发展；同时也有许多靶点抑制PI3K/AKT信号通路的激活，从而抑制甲状腺癌的恶性增殖、侵袭与转移。目前已有研究者尝试将PI3K/AKT信号通路作为治疗甲状腺癌的切入点，深入探究PI3K/AKT信号通路在不同甲状腺癌中的作用，此对寻找治疗甲状腺癌的新靶点具有重要意义。

采用DTT还原结合Sephadex LH-20葡聚糖凝胶层析的方法分离测定了汉麻球蛋白3种酶解产物中巯基肽的含量，测定结果显示：碱性蛋白酶>胃蛋白酶>木瓜蛋白酶。采用LC-MS-MS检测并鉴定出3种蛋白酶酶解物中巯基肽的分布和序列，结果显示：碱性蛋白酶酶解物中巯基肽数量为41个，木瓜蛋白酶和胃蛋白酶酶解物中都是31个，来源均是Edestin2 、Edestin3、清蛋白和非特征蛋白。3种酶酶解获得的麻仁球蛋白（Edestin）巯基肽大部分为亲水性的，分子质量主要分布于1 000～2 000 u，其中10个是3种酶解产物共有的，碱性蛋白酶和胃蛋白酶酶解物中有4个相同的来源于Edestin3的麻仁球蛋白巯基肽。胃蛋白酶酶解得到了一个独有的源于Edestin2的麻仁球蛋白巯基肽。碱性蛋白酶酶解得Dolutegravir体内实验剂量到了4个独有的源于Edestin3的麻仁球蛋白巯基肽。研究结论：3种蛋白酶由于作用位点和效力不同得到的麻仁球蛋白巯基肽数量和分布均有不同，但是碱性蛋白酶酶解汉麻球蛋白可以获得更多的麻仁球蛋白巯基肽，推测碱性蛋白酶可以CP-690550核磁更好地打开汉麻球蛋白中的二级及以上adoptive immunotherapy结构，使二硫键更多的暴露出来。

目的:探讨星形胶质细胞(astrocyte,ASC)的缝隙连接蛋白Connexin43(Cx43)在调控细胞凋亡和铁死亡中的作用及机制。方法:采用氧化血红素(hemin)处理ASC建立模拟脑出血后细胞凋亡和铁死亡的细胞模型,通过Core functional microbiotas干扰慢病毒敲降ASC中Cx43表达,观察细胞对hemin诱导的凋亡和铁死亡的敏感性。通过基因集富集分析(geEntinostat体内实验剂量ne set enrichment analysis,GSEA)预测Cx43参与调控细胞凋亡和铁死亡的可能机制。通过对Hippo信号通路的关键效应分子Yes相关联蛋白(Yes associated protein,YAP)进行免疫荧光染色以及使用Bemcentinib抑制剂干预,对生信分析预测的信号通路进行验证。结果:与对照组相比,hemin处理引起细胞凋亡和铁死亡比例显著增加(P<0.05),在接受hemin处理的各组中,相比单纯hemin处理组和阴性对照组(Cx43 NC),Cx43敲降组(Cx43 KD)细胞凋亡比例显著降低(P<0.05),铁死亡比例显著升高(P<0.05)。生信分析结果显示,Cx43与Hippo信号通路、铁离子结合基因集、脂质过氧化通路、缺氧应激等通路显著相关,进一步转录因子调控网络分析发现转录增强相关结构域(transcriptional enhanced associate domain,TEAD)转录因子家族中TEAD3可能参与调控Cx43相关性下游信号转导通路。免疫荧光染色结果显示,Cx43KD组YAP出现核转位,采用抑制剂阻断YAP和TEAD结合后,Cx43敲降引起的细胞凋亡抵抗和铁死亡增敏得到部分逆转。结论:Cx43敲降通过抑制Hippo通路,促进YAP核转位,与TEAD3结合形成转录复合体,调控ASC对hemin诱导的细胞凋亡抵抗和铁死亡增敏。

目的 MEM164是TMEM家族的一员,实验基于肿瘤基因组图谱(TCGA)和Oncomine数据库评估了TMEM164在肝细胞癌中表达及临床意义。方法 从GDC Data Portal网站(https://portal.gdc.cancer.gov/)下载424例HCC的RNA表达谱和临床病理参数资料。其中HCC组织374例,癌旁组织50例。借助Oncomine数据库进一步扩大样本量,验证TCGA数据库分析结果是否正确。采用Kaplan-Meier曲线和Cox回归分析TMEM164表达与患者预后的相关性,并进行基因集富集分析(GSEA),探讨其潜在作用机制。结果 TMEM164在HCC组织中表达量显著高于癌旁组织(P <0.001);TMEM164表达水平与HCC患者的Stage分期和T分期均显著相关(P <0.05);生存分析显示TMEM164高表达患者总生存率显著低于低表达患者(Roxadustat细胞培养P<0.01);单因素及多因素COX回归分析结果表明TMEM164高表达可能作为HCC患者预后的独立指标。GSEA表明TMEM164可能通过调控Testis biopsyMTOR、ERBB等通路进而调控细胞周期、凋亡、自噬及RNA降解等参与HCC的进程,此外TMEM164还可能作用于与免疫相关的信号通路。结论 TFer-1供应商MEM64在肝细胞癌中高表达,与患者预后不良相关,可能成为HCC患者的预后标志物及潜在治疗靶点。

目的 探索互联网医疗对Wagner分级2～3级糖尿病足溃疡患者居家康复治疗的新模式及其有效性。方法选取2020年1月至2021年9月中山市三乡医院内二科病房出院和门诊首诊的糖尿病足溃疡患者（糖尿病足Wagner分级2～3级）62例，采用非同期对照，对照CNS nanomedicine组为常规门诊医疗患者（2020年1—10月诊治的31例患者），研究组为互联网+居家康复患者（2020年11月至2021年9月诊治的31例患者），两组均引进中山大学孙逸仙纪念医院杨川教授糖尿病足管理团队的以安尔碘为足溃疡的主要换药方法，研究组医院-社区联动，以健康中山App互联网医院为平台，构建互联网医院居家康复为核心的糖尿病足新型管理模式。比较两组患者治疗15、30、60 d溃疡的渗液量、临床疗效、康复费用。结果 两组患者治疗15、30 d溃疡渗液量均明显减少，差异selleck GSI-IX无统计学意义（P> 0.05）；治疗60 d，研究组1例有少量分泌物，而对照组尚有9例有少量分泌物，差异有统计学意义（P <0.05）。研究组治疗总有效率为96.77%，高于对照组的71.00%，差异有统计学意义（P <0.05）。研究组康复费用明显低于对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。结论 互联网+居家康复糖尿病足管理新模式的应用，可促进Wagner分级2～3级糖尿病足溃疡的愈合，提高临床疗效，减轻照确认细节顾负担，节省费用。

目的：研究胃癌诊断中肿瘤标志物CEA、CA72-4、CA199、CA125联合检测的应用价值。方法：选取2018年1～2020年5月期间的住院患者，分为胃癌患者（胃癌组）、胃良性疾病患者（胃良性病组）、同期健康体检者（对照组）各100例，进行CEA、CA72-4、CA199、CA125检测，比较三组之间的差异。结果：胃癌组CEA、CA72-4、CA1selleckchem99、CA125高于胃良性病组和对照组，差异有统计学意义P<0.05。胃良性病组CEA、CA72-4、CA199高于对照组，差异有统计学意义P<0.05。胃良性病组和对照组CA125比较差异无统计学意义（P>0.05），胃癌组CEA、CA72-4、CA199、CA125阳性率高于胃良性疾病组、对照组（P<0.05）PCI-32765临床试验，差异有统计学意义。胃良性疾病组CEA、CA72-4、CA199阳性率高于健康体检组（P<0.05），差异有统计学意义，CA125胃良性疾病组与对照组差异无统计学意义（P>0.05），CEA、CATibiofemoral joint72-4、CA199、CA125联合检测的阳性率为92.0%，显著高于任一单项检测（P<0.05），差异有统计学意义。结论：胃癌患者CEA、CA72-4、CA199、CA125联合检测的阳性率高于胃良性病组和对照组，联合检测阳性率显著高于任一单项检测，肿瘤标志物联合检测对在胃癌诊断中具有重要的应用价值。

目的 探究P2X7受体（P2X7R）对小鼠Lewis肺癌（LLC）细胞迁移和侵袭能力的影响及其作用机制，同时探究体内P2X7R对荷LLC小鼠成瘤能力的影响。方法 体外实验：RT-PCR检测LLC细胞P2X7R表达。将LLC细胞分别给予P2X7R激动剂三磷酸腺苷（ATP）、2′-3′-O-(4-苯甲酰-苯甲酰)ATP(BzATP)干预或预先给予P2X7R拮抗剂oxATP、A438079然后再给予激动剂干预，共分为7组。使用细胞划痕实验和Transwell实验检测LLC细胞的迁移和侵袭能力；Western blot检测蛋白激酶B(AKT)信号通路关键蛋白的活化水平。将LLC细胞给予BzATP、A438079、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/AKT信号通路抑制剂LY294002干预，共分为5组。利用Transwell实验检测LLC细胞的迁移和侵袭能力。体内实验：构建荷LLC细胞的皮下移植瘤的野生（WT）型和P2X7R基因敲除Cardiac histopathology（P2X7~(-/-)）型小鼠模型，比较两组肿瘤的体积及质量。结果 LLCCaspase抑制剂细胞中表达P2X7R。划痕实验和Transwell实验结果显示：与对照组相比，激动剂组迁移和侵袭能力增强；与激动剂组相比，拮抗剂可以抑制激动剂促进LLC细胞的迁移及侵袭（P<0.001）。Western blot显示：BzATP组p-AKT蛋白表达水平相比于对照组增加；与BzATP组相比，拮抗剂组p-AKT蛋白表达水平降低（P<0.01）。Transwell实验结果显示：与BzATP组相比，拮抗剂组均可抑制BzATP促进的LLC细胞的迁移及侵袭（P<0.001）。小鼠荷瘤显示：与WT小鼠相比，P2X7~(-/-)小鼠瘤体更多体积和瘤体重量均降低（P<0.05）。结论 P2X7R通过激活AKT信号通路促进LLC细胞的迁移及侵袭，P2X7~(-/-)小鼠降低LLC细胞的体内成瘤能力。

目的 探究Yes相关蛋白(YAP)调控B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)/E1B-19k Da相互作用蛋白3(BNIP3)在糖尿病大鼠心肌缺Cryptosporidium infection血再灌注损伤(MIRI)中的作用。方法 无特定病原体(SPF)级成年雄性SD大鼠，腹腔注射链脲佐菌素(SZT)法构建1型糖尿病模型，成功造模后继续饲养12周。取非糖尿病大鼠12只和糖尿病大鼠24只，分为6组：非糖尿病假手术组(NS组)、非糖尿病缺血再灌注组(NIR组)、糖尿病假手术组(DS组)、糖尿病缺血再灌注组(DIR组)、糖尿病缺血再灌注+YAP抑制剂Super-TDU组(DIR+ST组)、糖尿病缺血再灌注+YAP抑制剂Super-TDU+自噬抑制剂3-MA组(DIR+ST+3-MA组),每组6只。MIRI模型通过结扎左冠状动脉前降支30 min后再灌注120 min的方法建立。Super-TDU和3-MA分别于再灌注前1 d和1 h注射。再灌注结束后ELISA法检测各组大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平；2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)法检测各组大鼠心肌梗死面积，苏木素-伊红(HE)染色法观察心肌组织病理变化，蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组大鼠心肌组织YAP、BNIP3和Beclin表达水平。结果 与各自NS组、DS组比较，NIR组和DIR组大鼠血清CK-MB和LDH表达水平升高，心肌组织YAP、BNIP3和Beclin表达水平上升(均P<0.05);与NIR组比较，DIR组血清CK-MB和LDH表达水平升高，心肌梗死面积增加，心肌病理损伤加重，心肌组织YAP表达水平明显上升，且BNIP3和Beclin表达水平下降(均P<0.05);与DIR组比较，DIR+ST组血清CK-MB和LDH表达水平和心肌梗死面积明显降低，心肌病理损伤减轻，心肌组织YAP表达水平明显下调，BNIP3和Beclin表达水平降低(P<0.05);与DIR+ST组比较，DIR+STPD0325901 NMR+3-MA组血清CEmricasan溶解度K-MB和LDH表达水平升高，心肌梗死面积增加，心肌病理损伤加重，BNIP3和Beclin表达水平降低(P<0.05)。结论 YAP介导的BNIP3线粒体自噬可能是调控糖尿病大鼠MIRI的重要机制。

背景葡萄糖在目标范围内时间（TIR）是近年兴起的糖尿病血糖管理的新指标。研究证实TIR与糖尿病慢性并发症存在密切联系。目前对TIR与糖尿病肾脏疾病（DKD）的研究主要集中在蛋白尿方面，往往忽视了肾小球滤过率（eGFR）在其中的作用，且对TIR评价血糖控制的切点划分的研究较少。目的 探讨TIR与DKD的相关性，进一步分析了TIR评价2型糖尿病（T2DM）血糖控制的切点划分。方法 纳入自2021年7月到2021年12月在上海交通大学医学院附属新华医院内Aerobic bioreactor分泌科住院的T2DM患者共214例，根据尿白蛋白/肌酐比值（UACR）和估算MK-2206价格肾小球滤过率（eGFR）结果，将研究对象分为单纯T2DM组（n=156）和DKD组（n=58），比较分析各组间资料差异，采用二元logistic回归分析方法对TIR与DKD的独立相关性进行分析，进一步采用40%、70%、85%作为切点将TIR分为4组，比较分析4组间临床资料的分布趋势。结果 与单纯T2DM组相比，DKD组患者DM病程更长，高血压患病率、SBP更高，UA、TG水平更高，血糖控制更差，血糖波动更大，ACEI/ARB类药物、胰岛素以及GLP-1RA类药物使用比例更高（P均<0.05）。多因素logistic回归分析结果显示，在校正了协变量后，TIR与DKD存在独立相关性（P=0.042），进一步根据TIR不同切点分组后发现，随着TIR升Pevonedistat临床试验高，HDL-C越高，HbA1c、TAR、MG越低，血糖波动越小，胰岛素使用以及GLP-1RA使用比例越高（P均<0.05）,DKD检出率随TIR的下降呈升高趋势（P<0.001）。多因素logistic回归分析结果显示，在校正了协变量后，相较于TIR1组，TIR2组DKD检出风险是TIR1组的1.962倍（P=0.206）,TIR3组DKD的风险是TIR1组的5.287倍（P=0.001）,TIR4组发生DKD的风险是TIR1组的4.712倍（P=0.032）。结论 TIR与DKD发生风险存在独立相关性，随TIR上升，DKD发生率显著下降。